本技術(shù)涉及食品檢測，更具體地說，它涉及一種寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法。

背景技術(shù)：

1、三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物，為重要的有機(jī)化工原料，廣泛應(yīng)用于塑料、涂料、粘合劑、食品包裝材料、消毒劑、化肥和殺蟲劑的生產(chǎn)，其可能從環(huán)境、食品包裝材料等突進(jìn)進(jìn)入到食品中。

2、三聚氰胺在一般情況下較為穩(wěn)定，但在高溫下可能會放出氰化物；在強(qiáng)酸或強(qiáng)堿環(huán)境下，三聚氰胺會發(fā)生水解，氨基逐步被羥基取代，生成三聚氰胺同系物，主要有三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺等；而上述三聚氰酸類物質(zhì)出現(xiàn)在寵物食品中，則會影響寵物健康，需要對此類物質(zhì)進(jìn)行相關(guān)檢測。

3、目前檢測三聚氰酸類物質(zhì)的方法主要包括高效液相色譜-二極管陣列法、高效液相色譜-質(zhì)譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法等，而上述方法再應(yīng)用前，均需要對寵物食品進(jìn)行處理，以減少干擾，獲得較為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。通常會先使用乙腈和水的混合液進(jìn)行處理后，再用乙腈飽和正己烷處理，這種分兩步的處理方式能夠有效沉淀蛋白質(zhì)和脂肪，有效減少干擾，進(jìn)而保證對寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的精準(zhǔn)檢測。

4、針對上述中的相關(guān)技術(shù)，發(fā)明人認(rèn)為，上述對寵物食品的處理雖然能夠有效減少干擾，但分兩步處理的方式，不僅在實(shí)際操作上變得相對復(fù)雜，還會在操作過程中易人為造成樣品溶液損失，在整體應(yīng)用的穩(wěn)定性和便捷性上依然有待提升。

5、因此，目前亟需提出一種方案以解決上述技術(shù)問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了保證對寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)進(jìn)行精準(zhǔn)測量的前提下，提高整個檢測應(yīng)用的穩(wěn)定性和便捷性，本技術(shù)提供一種寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法。

2、本技術(shù)提供的一種寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法，采用如下的技術(shù)方案：

3、一種寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法，包括以下步驟：

4、(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置：稱取0.01g的三聚氰酸類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品于10ml容量瓶中，用甲醇水配制成1000ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液；再移取標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.00ml至100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，得到標(biāo)準(zhǔn)溶液；

5、(2)樣品溶液的提?。悍Q取0.5g寵物食品樣品，于10ml離心管中，在離心管中加入功能助劑、乙腈和水的混合溶液至刻度，渦旋后，再進(jìn)行超聲處理，取上清液過有機(jī)濾膜，得到樣品溶液；

6、所述功能助劑、乙腈和水的質(zhì)量混合比為(0.4-0.6):(3-4):1；

7、所述功能助劑由二乙胺和三氯乙酸組成，且二乙胺和三氯乙酸的質(zhì)量混合比為1:(8-10)；

8、(3)對標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms分析，并根據(jù)下列公式計算三聚氰酸類物質(zhì)的殘留量；

9、x＝a×c×v/(a0×m)；

10、x-寵物食品樣品中三聚氰酸類物質(zhì)的殘留量，mg/kg；

11、a0-標(biāo)準(zhǔn)溶液中三聚氰酸類物質(zhì)的峰面積；

12、1.樣品溶液中三聚氰酸類物質(zhì)的峰面積；

13、c-標(biāo)準(zhǔn)溶液中三聚氰酸類物質(zhì)的濃度，μg/ml；

14、v-樣品溶液體積，ml；

15、m-寵物食品樣品質(zhì)量，g；

16、所述三聚氰酸類物質(zhì)為三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺中的任意一種。

17、通過采用上述技術(shù)方案，在樣品溶液的提取制備中，通過功能助劑的使用，搭配乙腈-水溶液，可以在一次性混合處理過程中有效地沉淀寵物食品樣品中的蛋白質(zhì)和脂肪，使得提取和凈化同時完成，減少干擾的同時，使得整個處理過程更加便捷和簡單，不易出現(xiàn)人為因素導(dǎo)致的測量結(jié)果不準(zhǔn)，整體應(yīng)用更加穩(wěn)定。其中，功能助劑由二乙胺和三氯乙酸組成，二乙胺有利于提高三聚氰酸類物質(zhì)的萃取率，且二乙胺分子中的氨基可以與油脂中的脂肪酸結(jié)合形成乙酰胺，其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)使得其具有剝離作用；三氯乙酸可以將蛋白質(zhì)的氨基酸上的羧基質(zhì)子化，具有輔助沉淀蛋白的作用；通過二乙胺和三氯乙酸能夠與乙腈相互間發(fā)揮出優(yōu)異的協(xié)同配合作用，對于寵物食品樣品中蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子能夠做到有效的分離處理，并加快三聚氰酸類物質(zhì)的溶出獲取，進(jìn)而后續(xù)能夠?qū)櫸锸称分械娜矍杷犷愇镔|(zhì)進(jìn)行精準(zhǔn)測量。由此可見，本寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法在實(shí)際應(yīng)用過程中，能夠兼顧準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和便捷性，具有顯著的應(yīng)用效果。

18、優(yōu)選的，所述功能助劑由二乙胺和三氯乙酸組成，且二乙胺和三氯乙酸的質(zhì)量混合比為1:8.5。

19、通過采用上述技術(shù)方案，上述重量比的二乙胺和三氯乙酸進(jìn)行組合使用時，彼此間應(yīng)用的平衡性較佳，與乙腈間的配合效果較為優(yōu)異，進(jìn)而在樣品溶液的提取過程中，所帶來的蛋白質(zhì)和脂肪去除效果較佳，后續(xù)檢測過程中的干擾也較低，使最終得到寵物食品樣品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的結(jié)果也更加精準(zhǔn)。

20、優(yōu)選的，所述功能助劑、乙腈和水的質(zhì)量混合比為0.5:3.5:1。

21、通過采用上述技術(shù)方案，以功能助劑、乙腈和水按上述質(zhì)量混合比應(yīng)用于寵物食品樣品上，使得功能助劑、乙腈間搭配所發(fā)揮的相應(yīng)效果較為優(yōu)異，一次混合處理，既可以有效排除蛋白質(zhì)和脂肪的干擾，還能夠使三聚氰酸類物質(zhì)被完全萃取出，進(jìn)而使寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法具有較佳的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和便捷性。

22、優(yōu)選的，步驟(2)中，在超聲處理過程中，控制溫度為20-28℃。

23、通過采用上述技術(shù)方案，在樣品溶液的提取過程中，超聲處理萃取會產(chǎn)生熱量，如果溫度過高可能會影響樣品的穩(wěn)定性和萃取效果，而上述溫度的選用，有利于獲得較佳的三聚氰酸類物質(zhì)萃取效果。

24、優(yōu)選的，步驟(2)中，有機(jī)濾膜孔徑為0.2-0.3μm。

25、通過采用上述技術(shù)方案，上述規(guī)格的有機(jī)濾膜能夠?qū)μ崛∪芤褐械碾s質(zhì)起到較佳的過濾和分離效果，進(jìn)而能夠得到較為純凈的樣品溶液，保證后續(xù)行l(wèi)c-ms/ms分析的準(zhǔn)確性，最終得到較為精準(zhǔn)的寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量。

26、優(yōu)選的，步驟(3)中，lc-ms/ms分析過程中，流動相包括a相和b相，a相為10％乙酸銨水溶液，b相為乙腈，且10％乙酸銨水溶液和乙腈的體積比為1:(4-9)。

27、通過采用上述技術(shù)方案，上述選擇的a相和b相，以及二者選用合適的體積比，能夠在lc-ms/ms分析對標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液起到穩(wěn)定且較佳的洗脫效果，進(jìn)而有利于保證譜圖的精準(zhǔn)，在后續(xù)依公式進(jìn)行計算時，能夠得到較為精準(zhǔn)的寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量。

28、優(yōu)選的，所述10％乙酸銨水溶液和乙腈的體積比為1:6。

29、通過采用上述技術(shù)方案，上述體積比的10％乙酸銨水溶液和乙腈進(jìn)行應(yīng)用后，所帶來的相應(yīng)效果較為穩(wěn)定，有利于使獲得的寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量更加精準(zhǔn)。

30、優(yōu)選的，所述寵物食品樣品為干燥型寵物食品、半干型寵物食品和寵物流質(zhì)食品中的任意一種。

31、通過采用上述技術(shù)方案，上述類型的寵物食品樣品均適用于本技術(shù)三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法，且能夠獲得較為精準(zhǔn)的三聚氰酸類物質(zhì)殘留量，整體應(yīng)用范圍較廣，應(yīng)用效果突出。

32、綜上所述，本技術(shù)具有以下有益效果：

33、本技術(shù)采用二乙胺和三氯乙酸組成功能助劑，配合乙腈-水溶液對寵物食品樣品進(jìn)行萃取，不僅具有優(yōu)異的三聚氰酸類物質(zhì)的萃取率，還能夠有效地沉淀寵物食品樣品中的蛋白質(zhì)和脂肪，使得提取和凈化同時完成，減少干擾；如此，使得本寵物食品中三聚氰酸類物質(zhì)殘留量的檢測方法在實(shí)際應(yīng)用過程中兼顧準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和便捷性，具有顯著的應(yīng)用效果。