一種磁微粒介導(dǎo)的層析檢測技術(shù)裝置及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種磁微粒介導(dǎo)的層析檢測技術(shù)裝置及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002]免疫學(xué)檢測技術(shù)是應(yīng)用免疫學(xué)原理設(shè)計的測定抗原、抗體、免疫細胞及化學(xué)成分等的實驗手段，廣泛用于來源于人體和動物體可進行疾病診斷和健康檢測的樣品以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。常用的有免疫濁度技術(shù)、固相酶免疫測定技術(shù)、化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)、免疫熒光標記技術(shù)、流式細胞術(shù)、膠體金技術(shù)等。
[0003]免疫濁度技術(shù)，也稱免疫濁度法是可溶性抗原、抗體在液相中特異結(jié)合，產(chǎn)生一定大小的復(fù)合物，形成光的折射或吸收，測定這種折射或吸收后的透射光或散射光作為計算單位，用于定量檢測，但檢測靈敏度低，不適合于微量檢測。固相酶免疫測定技術(shù)基于抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體保持其免疫學(xué)活性，抗原或抗體的酶結(jié)合物既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)，具有靈敏度高、線性響應(yīng)范圍寬和易于實現(xiàn)自動化等顯著優(yōu)點。但檢測反應(yīng)時間長限制了其使用。免疫化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)是一種高靈敏的微量及痕量分析技術(shù)，具有操作方便、靈敏度高、線性響應(yīng)范圍寬和易于實現(xiàn)自動化等顯著優(yōu)點，廣泛地應(yīng)用于環(huán)境、臨床、藥物分析、食品和工業(yè)分析中，也是基于抗原或抗體的固相分離手段及抗原或抗體的發(fā)光試劑標記技術(shù)。但檢測反應(yīng)時間長及對檢測設(shè)備的要求高也影響其使用。免疫熒光標記技術(shù)、流式細胞術(shù)、膠體金技術(shù)也是常用的檢測技術(shù)被廣泛使用，但均有其相應(yīng)的不足。
[0004]高靈敏度、快速、便捷是目前臨床免疫檢測技術(shù)產(chǎn)品的發(fā)展方向之一，但現(xiàn)有的檢測技術(shù)都無法以含有被撿物的材料作為檢測指示劑直接進行檢測。因此，開發(fā)一種能夠?qū)崿F(xiàn)既具有高靈敏度、快速等特點，同時又能夠直接以含有被撿物的材料作為檢測指示的檢測技術(shù)，不僅使用方便、減少浪費，同時也可顯著提高工作效率，在檢測和分析、分離的諸多領(lǐng)域具有重要的實用意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種具有靈敏度高、檢測速度快的免疫檢測技術(shù)裝置，特別是以磁微粒作為捕獲相的免疫層析檢測技術(shù)裝置。
[0006]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案。
[0007]—種以磁微粒介導(dǎo)的層析檢測技術(shù)裝置，所述的檢測技術(shù)裝置是以固定在固相支撐物平面上的磁微粒作為捕獲相的檢測技術(shù)，由磁微粒、固相支撐物、分散膜、顯色相和含有待檢物的液體待檢相組成，其中所述的磁微粒表面含有能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的磁微粒標記物并固定在固相支撐物上。所述的的磁微粒標記物以能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的抗體或抗原最為常用。
[0008]所述的固相支撐物具有如下特征:1)所述的固相支撐物為固相支撐板狀結(jié)構(gòu)時，其材料為含有能夠吸附磁微粒的磁性材料；2)所述的固相支撐物為膜狀結(jié)構(gòu)時，其材料為能夠與磁微粒結(jié)合并固定的膜性材料。磁性材料在固相支撐板狀結(jié)構(gòu)上的分布可以為均勻分布狀態(tài)，也可以是按照具體要求的局部特征性分布，如線條狀或斑點狀。膜性材料常用的有硝酸纖維膜。
[0009]所述的分散膜包括玻璃纖維膜、聚酯纖維膜、硝酸纖維膜、木質(zhì)纖維類膜結(jié)構(gòu)。木質(zhì)纖維類膜結(jié)構(gòu)包括各種類型的濾紙和紙質(zhì)濾膜。
[0010]所述的顯色相的顯色指示劑包括膠體金、熒光物質(zhì)、血細胞、體細胞和培養(yǎng)細胞。
[0011]所述的含有待檢物的液相包括來源于人體和動物血液、體液和排泄物以及用于環(huán)境、藥物分析、食品和工業(yè)分析的樣品。
[0012]所述的檢測技術(shù)包括以下一種或多種特征:
I)本技術(shù)裝置還包含有用于標記顯色指示劑的能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的檢測物，所述的檢測物以能夠與待檢物形成特異性結(jié)合的抗體或抗原最為常用；2)用磁微粒標記物標記磁微粒，常用的磁微粒標記物為抗體或抗原；3)用檢測物標記顯色指示劑；4)以局部裝有磁性材料板狀結(jié)構(gòu)作為固相支撐物，通過磁性吸附固定所述的標記磁微粒到固相支撐物上的所述的局部磁性材料位置，有線條狀、斑點狀；5)以均勻分布磁性材料板狀結(jié)構(gòu)作為固相支撐物，將標記的磁微粒包被到固相支撐物的特定位置上，多采用劃線或噴涂等方式；6)通過生物素-親和素連接系統(tǒng)將標記的磁微粒連接固定到所述的固相支撐模性材料上，通常采用將親和素或鏈親和素包被到硝酸纖維膜上，將磁微粒標記物或磁微粒用生物素標記，然后與親和素連接固定；7)本技術(shù)裝置還包含有支撐底片，通常是在支撐底片粘貼有固相支撐物和分散膜；8)從下而上依次粘貼吸附固定有標記磁微粒的固相支撐物、分散膜；9)從下而上依次粘貼支撐底片、吸附固定有標記磁微粒的固相支撐物、分散膜；10)從下而上依次粘貼支撐底片、連接固定有標記磁微粒的固相支撐膜、分散膜；11)制備待檢物與顯色指示劑為一體并能夠通過磁微粒標記物直接特異性結(jié)合磁微粒的液體顯色相，然后將液體顯色相置于分散膜上，通過層析擴散流經(jīng)標記磁微粒，直接特異性地通過磁微粒標記物與磁微粒結(jié)合并顯色，這種情況通常用于檢測細胞表面抗原且同時以細胞作為顯色指示劑的檢測方法；12)用檢測物標記顯色指示劑，將含有待檢物的液體與標記的顯色指示劑混合，通過層析擴散流經(jīng)標記磁微粒，標記顯色指示劑通過待檢物間接特異性地與磁微粒標記物結(jié)合,進而使磁微粒顯色；13)所述的磁微粒為通用的磁微粒及其衍生磁性微粒結(jié)構(gòu)；14)在固相支撐物的前端還粘貼有分散膜，將所述的待檢測液相滴加到前端分散膜上。
[0013]間接檢測通常以作為檢測物的能夠通過待檢物與磁微粒標記物形成特異性結(jié)合的抗體或抗原，檢測對應(yīng)的抗原或抗體。
[0014]磁性微粒，即磁微粒，是指磁性納米粒子與無機或有機分子結(jié)合形成的可均勻分散于一定基液中具有高度穩(wěn)定性的膠態(tài)復(fù)合材料，是一種具有磁性和特殊結(jié)構(gòu)的一種新型高分子聚合材料。具有超順磁性、較高的比表面積、可修飾功能基團等特性。磁微粒的核心組成是納米磁性粒子(包括鐵的氧化物、金屬鐵、鈷、鎳及正鐵酸鹽等)，也稱磁流體。將磁流體與其它性質(zhì)材料的基質(zhì)相互作用，便形成磁性復(fù)合微粒(簡稱磁性微粒、磁性微球、磁珠等)。磁微粒分類方法很多，按其結(jié)構(gòu)不同，可分為簡單結(jié)構(gòu)、核殼結(jié)構(gòu)、夾心結(jié)構(gòu)；磁性微粒的核心組成一磁流體為納米無機材料，按照與其復(fù)合的材料組成不同，可分為無機/有機磁性微粒和無機/無機磁性微粒。其無機/有機磁性微粒是通過生物或合成高分子物質(zhì)及其它有機試劑對磁流體進行包覆或修飾而得到，如葡聚糖磁性微粒磁性脂質(zhì)體微粒等；而無機/無機磁性微粒則是通過磁流體與金、二氧化硅、量子點等無機物復(fù)合制得，如磁性二氧化硅微粒、金磁微粒、載有量子點的磁性微粒等。
[0015]所述的檢測技術(shù)裝置在多種檢測技術(shù)產(chǎn)品開發(fā)中的應(yīng)用?？捎糜谀壳俺Ｓ玫募垖游鰴z測產(chǎn)品的開發(fā)和大顆粒的如細胞類直接檢測產(chǎn)品的開發(fā)。
[0016]人群中最常見的血型有ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)。都是根據(jù)紅細胞表面有無特異性抗原(凝集原)來劃分的血液類型系統(tǒng)。ABO血型系統(tǒng)是根據(jù)凝集原A、B的分布把血液分為Α、Β、ΑΒ、0四型。紅細胞上只有凝集原A的為A型血，其血清中有抗B凝集素；紅細胞上只有凝集原B的為B型血，其血清中有抗A的凝集素；紅細胞上A、B兩種凝集原都有的為AB型血，其血清中無抗A、