或甲醛通過(guò)大氣中的氧氣氧化為甲酸。 甲醛的出氣此外導(dǎo)致對(duì)使用者的潛在危害。根據(jù)本發(fā)明的釋放醛類的含氮化合物也是如 此，但是僅僅無(wú)疑更小的程度。甲醛濃度因此連續(xù)降低，甚至在沒(méi)有固定反應(yīng)的情況下。
[0031] 因?yàn)樵诒景l(fā)明的情況下固定試劑中包含的、能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一 種醛的至少一種含氮化合物的僅特定部分在固定時(shí)以受控的方式釋放，固定試劑可特別有 利地重復(fù)使用。特別有利的是確定根據(jù)本發(fā)明提供的該化合物的濃度，因?yàn)檫@允許可靠地 確定該化合物是否仍以對(duì)另外固定操作而言足夠的濃度存在。不正確的固定，即以上說(shuō)明 的過(guò)度固定或欠固定，由此可以可靠地避免。
[0032] 濃度可在固定之前、過(guò)程中或之后確定。為了提供包含能夠依賴壓力和/或溫度 釋放至少一種醛的至少一種含氮化合物的固定試劑或其組分，可能的是，例如使用包括明 確標(biāo)識(shí)特征的、特別適用于組織處理機(jī)的儲(chǔ)存容器（藥盒或曲頸甑）。將其中對(duì)應(yīng)標(biāo)識(shí)特征 還可以防止誤操作的方式（例如通過(guò)使用RFID或NFD芯片或條形碼中的加密碼）實(shí)施的 該儲(chǔ)存容器引入組織處理機(jī)。在組織處理機(jī)中，可能的是，基于標(biāo)識(shí)特征確定在儲(chǔ)存容器中 對(duì)應(yīng)濃度是否已經(jīng)被確定過(guò)一次。如果是，組織處理機(jī)"知道"固定試劑是否仍適于另外固 定。當(dāng)對(duì)應(yīng)容器第一次使用時(shí)，將該容器明確分配給特定組織處理機(jī)也可實(shí)現(xiàn)，使得不再可 能在另一個(gè)組織處理機(jī)中使用該容器。由此可避免有意或無(wú)意的誤處理或不正確操作，且 保證可靠的固定。
[0033] 對(duì)應(yīng)容器還可包括，例如（例如可寫存儲(chǔ)芯片形式的）存儲(chǔ)工具，其允許組織處理 機(jī)確定的能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種化合物的濃度被存儲(chǔ)。組織 處理機(jī)可例如在固定操作結(jié)束時(shí)確定該濃度且將其存儲(chǔ)在容器的存儲(chǔ)工具中。對(duì)應(yīng)容器因 此還可用在能夠讀出存儲(chǔ)工具的另一個(gè)組織處理機(jī)中。
[0034] 確定能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種含氮化合物的濃度也 是特別有利的，因?yàn)楦鶕?jù)確定的濃度，例如根據(jù)本發(fā)明的固定操作使用的固定時(shí)間和/或 壓力和/或根據(jù)本發(fā)明的固定操作使用的溫度可調(diào)節(jié)。例如，固定試劑的重復(fù)使用之后，對(duì) 應(yīng)化合物的濃度可降低，使得需要更長(zhǎng)固定時(shí)間和/或改變對(duì)應(yīng)壓力值和/或溫度值。如 果濃度在固定操作之前被確定或如說(shuō)明地是已知的（例如來(lái)自前面的固定操作，例如與儲(chǔ) 存容器相關(guān)聯(lián)或存儲(chǔ)在對(duì)應(yīng)儲(chǔ)存容器的存儲(chǔ)工具中），對(duì)應(yīng)的調(diào)節(jié)可特別簡(jiǎn)單地進(jìn)行。
[0035] 固定過(guò)程中，確定能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種含氮化合 物的濃度是特別有利的，因?yàn)橥ㄟ^(guò)每種情況下消耗的化合物推出固定操作本身的成功是可 能的。例如，固定可進(jìn)行，直到觀察到濃度降低了預(yù)定值。這允許的推斷是，特定量的該至 少一種醛已經(jīng)被釋放且因此至少部分進(jìn)入待固定的樣本中。
[0036] 在本發(fā)明的情況下，對(duì)應(yīng)的組織處理機(jī)可使用防止誤處理方式中永久限定的閾值 或可限定的閾值操作。例如，可提供的是，當(dāng)能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至 少一種含氮化合物的濃度低于該閾值時(shí)，組織處理機(jī)不再進(jìn)行固定且由此鼓勵(lì)使用者更換 固定試劑或?qū)?yīng)組分。
[0037]組織處理機(jī)還可構(gòu)造為基于根據(jù)本發(fā)明輸出的信號(hào)（例如諸如監(jiān)控器的輸出單 元上輸出的信號(hào)）通知使用者，使得使用者例如總是知道存在的濃度和/或時(shí)間和/或固 定試劑仍然足夠的固定操作的數(shù)量。
[0038] 在本發(fā)明的情況下提出的是使用室溫（S卩，例如在20°C至25°C范圍內(nèi)的溫度）和 /或冷存儲(chǔ)溫度（即，例如在〇°C至10°C范圍內(nèi)或在-25°C至-15°C范圍內(nèi)）作為第一溫度 水平，且使用高于對(duì)應(yīng)溫度的溫度（特別是高于室溫的溫度，例如在20°C至80°C范圍內(nèi)的 溫度）作為第二溫度水平。由于使用與能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的含氮化 合物分別適應(yīng)的對(duì)應(yīng)溫度水平，或反之亦然，對(duì)應(yīng)固定試劑可被安全地處理。
[0039] 根據(jù)本發(fā)明有利地使用的壓力水平也是如此，例如，第一壓力水平特別是大氣壓 或甚至更低，后者例如用于組織樣本的真空滲入；且第二壓力水平與高于大氣壓的壓力水 平對(duì)應(yīng)。例如，5kPa至1000 kPa范圍內(nèi)的表壓、例如5kPa至20kPa范圍內(nèi)的表壓、20kPa至 50kPa范圍內(nèi)的表壓、50kPa至IOOkPa范圍內(nèi)的表壓、IOOkPa至500kPa范圍內(nèi)的表壓或 500kPa至1000 kPa范圍內(nèi)的表壓可用作高于大氣壓的壓力水平。在提高的溫度和壓力下， 本發(fā)明的情況下使用的、能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的含氮化合物的化學(xué)平 衡位于醛側(cè)。
[0040] 氨與至少一種醛的反應(yīng)產(chǎn)物在本發(fā)明的情況下特別用作能夠依賴壓力和/或溫 度釋放至少一種醛的含氮化合物。該至少一種醛為甲醛和/或戊二醛或其他醛類。諸如烏 洛托品、三嗪類、二羥甲基二羥基乙烯脲、單羥甲基三聚氰胺、二羥甲基三聚氰胺、三羥甲基 三聚氰胺、四羥甲基三聚氰胺、五羥甲基三聚氰胺、六羥甲基三聚氰胺、四羥甲基乙炔二脲、 二羥甲基丙烯脲、乙酰胍胺和/或5, 5-二甲基乙內(nèi)酰脲特別適于本發(fā)明提出的方法。這些 為所謂的甲醛釋放體。
[0041] 以下將使用烏洛托品（六亞甲基四胺）的例子說(shuō)明甲醛的釋放，但是其可對(duì)應(yīng)適 用于另外化合物。在更高溫度下，以下表示的等式中的化學(xué)平衡在甲醛+氨側(cè)（反應(yīng)箭頭 的左側(cè)）。這的結(jié)果是烏洛托品（反應(yīng)箭頭的右側(cè)）分解，形成中間體，且被消耗。
[0042]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于固定至少一種組織樣本（1)的方法（100)，所述方法使用組織處理機(jī)（10) 進(jìn)行且所述方法中將所述至少一種組織樣本（1)在第一溫度水平和第一壓力水平下引入 包含能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種含氮化合物的固定試劑（2)，所 述至少一種組織樣本（1)在所述固定試劑（2)中停留至少固定時(shí)間段， 其中將其中引入了所述至少一種組織樣本（1)的所述固定試劑（2)在所述固定時(shí)間 段內(nèi)帶至高于所述第一溫度水平的第二溫度水平和/或高于所述第一壓力水平的第二壓 力水平；和使用所述組織處理機(jī)（10)的至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置（14)來(lái)確定所述固定試劑 (2)中能夠依賴壓力和/或溫度釋放所述至少一種醛的所述至少一種含氮化合物的濃度， 且基于所述至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置（14)的測(cè)量值輸出信號(hào)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法（100)，其中所述第一溫度與室溫和/或冷存儲(chǔ)溫度對(duì) 應(yīng)，且所述第二溫度在20°C至80°C范圍內(nèi)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法（100)，其中所述第一壓力水平最大與大氣壓對(duì)應(yīng) 且所述第二壓力水平與高于大氣壓的壓力水平對(duì)應(yīng)。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法（100)，其中能夠依賴壓力和/或溫度釋放 所述至少一種醛的所述至少一種含氮化合物包含氨與至少一種醛的至少一種反應(yīng)產(chǎn)物。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法（100)，其中所述至少一種醛包含甲醛和/ 或戊二醛。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法（100)，其中能夠依賴壓力和/或溫度釋放 所述至少一種醛的所述至少一種含氮化合物包含烏洛托品、至少一種三嗪、二羥甲基二羥 基乙烯脲、單羥甲基三聚氰胺、二羥甲基三聚氰胺、三羥甲基三聚氰胺、四羥甲基三聚氰胺、 五羥甲基三聚氰胺、六羥甲基三聚氰胺、四羥甲基乙炔二脲、二羥甲基丙烯脲、乙酰胍胺和/ 或5, 5-二甲基乙內(nèi)酰脲。
7. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法（100)，其中所述固定試劑包含pKs值小于 6. 4和/或pH在2至4范圍內(nèi)的至少一種酸。
8. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法（100)，其中所述固定試劑包含5%至50% 范圍內(nèi)的至少一種醇。
9. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法（100)，其中將引入了所述至少一種組織樣 本（1)的所述固定試劑（2)在所述固定時(shí)間段內(nèi)至少間歇引入所述組織處理機(jī)（10)的處 理室（12)且在所述處理室（12)內(nèi)將所述固定試劑（2)帶至所述第二溫度水平和/或所述 第二壓力水平。
10. -種組織處理機(jī)（10)，所述組織處理機(jī)（10)具有至少一個(gè)處理室（12)，所述處理 室（12)構(gòu)造為容納具有引入至固定試劑⑵中的至少一種組織樣本⑴的樣本容器（11)， 所述固定試劑（2)包含能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種含氮化合物， 其特征為構(gòu)造為進(jìn)行根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的方法的工具（13至16)，所述工具 (13至16)包括至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置（14)，所述至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置（14)構(gòu)造為確定 所述固定試劑（2)中能夠依賴壓力和/或溫度釋放所述至少一種醛的所述至少一種含氮化 合物的濃度和基于所述至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置（14)的測(cè)量值輸出信號(hào)。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的組織處理機(jī)（10)，所述組織處理機(jī)（10)包括構(gòu)造為將壓 力和/或溫度應(yīng)用至所述至少一個(gè)處理室（12)的工具（15、16)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及使用釋放醛類的含氮化合物固定組織樣本。提出用于固定至少一種組織樣本的方法，該方法使用組織處理機(jī)進(jìn)行且其中將至少一種組織樣本在第一溫度水平和第一壓力水平下引入包含能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種含氮化合物的固定試劑，至少一種組織樣本在固定試劑中停留至少固定時(shí)間段。將引入至少一種組織樣本的固定試劑在固定時(shí)間段內(nèi)帶至高于第一溫度水平的第二溫度水平和/或高于第一壓力水平的第二壓力水平。使用組織處理機(jī)的至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置確定固定試劑中能夠依賴壓力和/或溫度釋放至少一種醛的至少一種含氮化合物的濃度，基于至少一個(gè)濃度測(cè)量裝置的測(cè)量值輸出信號(hào)。本發(fā)明還涉及對(duì)應(yīng)的組織處理機(jī)。
【IPC分類】G01N1-30, A01N1-00, G01N1-36, G01N33-48
【公開(kāi)號(hào)】CN104655471
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410645932
【發(fā)明人】赫爾曼·奧博銳, 馬庫(kù)斯·伯布里克
【申請(qǐng)人】萊卡生物系統(tǒng)努斯洛赫有限責(zé)任公司
【公開(kāi)日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2014年11月12日
【公告號(hào)】DE102013223384A1, DE102013223384B4, EP2873962A1, US20150140601