一種高通量血型系統(tǒng)檢測(cè)裝置及方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及血型檢測(cè)領(lǐng)域，特別涉及一種高通量血型系統(tǒng)檢測(cè)裝置及方法。
【背景技術(shù)】
[0002]血型是對(duì)血液分類的方法，通常是指紅細(xì)胞(RBC)的分型，其依據(jù)是RBC表面是否存在某些可遺傳的抗原物質(zhì)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并為國(guó)際輸血協(xié)會(huì)承認(rèn)的血型系統(tǒng)有32種，與人類輸血關(guān)系最密切的是ABO血型系統(tǒng)，其次是Rh血型系統(tǒng)，還有麗S型、孟買型等。血型鑒定是指對(duì)血液成分中細(xì)胞表面抗原進(jìn)行鑒定的技術(shù)。快速、準(zhǔn)確的血型鑒定技術(shù)對(duì)遺傳學(xué)、法醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等學(xué)科都有廣泛的實(shí)用價(jià)值，因此具有重要的理論和實(shí)踐意義。血型鑒定對(duì)輸血至關(guān)重要，尤其在醫(yī)學(xué)創(chuàng)傷性大出血、臟器移植、新生兒溶血等時(shí)，以不相容的血型輸血可能導(dǎo)致溶血反應(yīng)的發(fā)生，造成溶血性貧血、腎衰竭、休克以至死亡。因此，快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單的篩查血型可為搶救危急病人，應(yīng)對(duì)突發(fā)事件提供保障。
[0003]目前血型篩查方法主要分為凝集法和基因法兩大類。凝集法的原理為檢測(cè)受檢者血液中RBC表面抗原，只要RBC表面存在相應(yīng)抗原，即可與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集反應(yīng)。包括傳統(tǒng)的玻片法、紙片法、試管法，后續(xù)發(fā)展起來(lái)的微柱法和卡式法。其優(yōu)點(diǎn)是速度較快，但受抗體保存條件限制，不適用于野外緊急條件使用。第二類為基因法，主要通過(guò)特異性引物對(duì)RBC基因進(jìn)行分型，以此對(duì)各種血型進(jìn)行鑒定，尤其適合于復(fù)雜血型的鑒定。然而，其檢測(cè)速度慢，成本高，不適合于臨床常規(guī)檢測(cè)。所以上述方法，都不能避免檢測(cè)速度慢、操作不便、成本高等問(wèn)題。因此，研發(fā)操作簡(jiǎn)便、快速準(zhǔn)確的高通量血型系統(tǒng)檢測(cè)裝置，可實(shí)現(xiàn)同時(shí)ABO,Rh,MNS等多種血型同步檢測(cè)，自動(dòng)化檢測(cè)可縮短時(shí)間，降低檢測(cè)成本，第一時(shí)間獲得血型信息，從而為搶救贏得時(shí)間，挽救寶貴生命，這對(duì)于提高緊急情況下的醫(yī)療救治水平具有重要意義。
[0004]為了操作簡(jiǎn)便、提高血型檢測(cè)速度，人們進(jìn)行了如下探索:
[0005]中國(guó)專利[200820179524.1](公開號(hào)為 201302573)公開了一種用于 ABO，Rh-D 的血型鑒定卡。該卡以塑料或膠質(zhì)紙作為基板，在基板上的血清凹槽內(nèi)包被干燥的標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B、抗D血清，以此進(jìn)行血型鑒定。該鑒定卡易攜帶，適用性好，易保存，可彌補(bǔ)傳統(tǒng)玻片法發(fā)生冷凝集現(xiàn)象的不足。但該方法僅為正定型方法，缺少質(zhì)控，容易出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性。
[0006]中國(guó)專利[200920222236.4](公開號(hào)為201522495U)的ABO血型檢測(cè)卡，由載體和固定在載體上的抗體層組成，抗體層由至少兩個(gè)字母形狀的抗體印跡(A/B)組成，以抗A/B印記作為結(jié)果判斷的依據(jù)。該檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)便，可直接讀出血型結(jié)果，適合非專業(yè)人員操作，同時(shí)便于保藏和運(yùn)輸。該方法缺乏準(zhǔn)確量化結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，且一次僅檢測(cè)ABO血型系統(tǒng)，未能同時(shí)檢測(cè)Rh等其他多種血型系統(tǒng)。
[0007]中國(guó)專利[200920041078.2](公開號(hào)為201382943)公開了一種采用迀移層析法檢測(cè)人ABO和RhD血型定型的試劑卡，在反應(yīng)膜上設(shè)抗A檢測(cè)線、抗B檢測(cè)線、抗RhD檢測(cè)線、質(zhì)控線。檢測(cè)線為對(duì)應(yīng)的單克隆抗體，質(zhì)控線為多克隆抗體。以檢測(cè)線和質(zhì)控線顯示紅色進(jìn)行相應(yīng)的結(jié)果判斷。該方法檢測(cè)時(shí)間短，檢測(cè)成本較低。但因血液顏色為紅色，檢測(cè)線和質(zhì)控線依據(jù)顯示紅色進(jìn)行結(jié)果判讀，誤差較大，特異性有待提高。
[0008]Noiphung等報(bào)道了一種可同時(shí)檢測(cè)的ABO (Α/Β/ΑΒ/0)血型和RhOO的血型檢測(cè)試紙條；但其因采用紅細(xì)胞與血漿層析距離比進(jìn)行結(jié)果鑒定，要求血液樣本的紅細(xì)胞比容(HCT)低于42%，且需1: 2稀釋后方可進(jìn)行檢測(cè)，其操作不簡(jiǎn)便。同時(shí)，正常人群HCT —般范圍約為37%?50%，其檢測(cè)的樣本范圍較小，不能滿足普通人血型檢測(cè)需求。單純依靠紅細(xì)胞與血漿層析距離比進(jìn)行結(jié)果驗(yàn)證，缺乏質(zhì)控對(duì)照，導(dǎo)致其結(jié)果特異性較差。
[0009]所有上述方法均缺乏對(duì)血型檢測(cè)裝置的質(zhì)控，存在一定的假陰性和假陽(yáng)性；且大多檢測(cè)血型系統(tǒng)中的單一血型或某幾種抗原，無(wú)法對(duì)常見(jiàn)血型(如Rh血型、MNS血型等)進(jìn)行同步檢測(cè)；常規(guī)技術(shù)檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，自動(dòng)化檢測(cè)未能完全實(shí)現(xiàn)，難以滿足緊急情況下的使用，極大限制了其應(yīng)用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]為解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種高通量血型系統(tǒng)檢測(cè)裝置，該裝置是在多通道血型檢測(cè)卡上利用血液抗原抗體反應(yīng)以及蛋白質(zhì)顯色反應(yīng)原理進(jìn)行多種血型系統(tǒng)同步鑒定，然后運(yùn)用光譜學(xué)原理對(duì)多通道血型檢測(cè)卡進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)，通過(guò)數(shù)據(jù)處理與結(jié)果輸出裝置進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換及結(jié)果輸出，自動(dòng)得出血型結(jié)果。
[0011]本發(fā)明的另一目的在于提供一種基于上述裝置的高通量血型系統(tǒng)檢測(cè)方法。
[0012]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:
[0013]一種高通量血型系統(tǒng)檢測(cè)裝置，該裝置由多通道血型檢測(cè)試紙卡，血液加樣器，沖洗液加樣器，標(biāo)本架，檢測(cè)臺(tái)，自動(dòng)化光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，控制系統(tǒng)，數(shù)據(jù)處理與結(jié)果輸出裝置組成，其中，多通道血型檢測(cè)試紙卡固定于檢測(cè)臺(tái)上，血液加樣器經(jīng)標(biāo)本架吸樣后為多通道血型檢測(cè)試紙卡加樣，沖洗液加樣器對(duì)多通道血型檢測(cè)試紙卡進(jìn)行沖洗，自動(dòng)化光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)多通道血型檢測(cè)試紙卡上血樣結(jié)果并將其輸出至數(shù)據(jù)處理與結(jié)果輸出裝置進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與結(jié)果輸出，控制系統(tǒng)控制檢測(cè)裝置運(yùn)行。
[0014]進(jìn)一步的，所述多通道血型檢測(cè)試紙卡為圓形、正多邊形或長(zhǎng)方形，長(zhǎng)方形檢測(cè)試紙卡中，檢測(cè)通道平行設(shè)置。試紙卡內(nèi)設(shè)加樣孔及不少于一條的檢測(cè)通道，圓形或正多邊形檢測(cè)試紙卡的加樣孔位于中心處，，其他檢測(cè)通道圍繞加樣孔設(shè)置，單一檢測(cè)通道檢測(cè)一種抗原或抗體；每一檢測(cè)通道與加樣孔相連，并放置有檢測(cè)試紙，檢測(cè)試紙分為正定型檢測(cè)試紙和反定型檢測(cè)試紙，檢測(cè)試紙由抗體墊或抗原墊、泳動(dòng)墊、反應(yīng)墊、吸水墊依次搭接；根據(jù)需要在抗體墊/抗原墊固定特征性的抗體或抗原；反定型檢測(cè)試紙?jiān)诳乖瓑|前設(shè)置有血漿分離墊促使RBC與血漿分離層，使血漿與預(yù)固定的抗原分子反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)反定型有效檢測(cè)；利用血液抗原抗體反應(yīng)以及蛋白質(zhì)顯色反應(yīng)原理，在試紙條上預(yù)包被血型抗體或抗原，在反應(yīng)墊上固定顯色試劑，以此進(jìn)行血型鑒定，檢測(cè)盤內(nèi)設(shè)陽(yáng)性、陰性質(zhì)控試紙條，作為高通量檢測(cè)試紙卡結(jié)果是否有效的質(zhì)控，質(zhì)控試紙條結(jié)構(gòu)與其他試紙條一致，區(qū)別在于其陽(yáng)性質(zhì)控條抗體墊預(yù)固定為多種抗體混合抗體，與任何血液樣本發(fā)生凝集反應(yīng)，反應(yīng)墊上包被顯色試劑；陰性質(zhì)控條抗體墊未包被任何抗體/抗原，不與血液樣本發(fā)生凝集反應(yīng)，血液樣本可全部層析到反應(yīng)墊。
[0015]進(jìn)一步的，所述抗體墊為一個(gè)或相連的多個(gè)，其預(yù)包被的血型抗體為ABO (抗A、抗B) 'Rh (抗 D、抗 C、抗 C、抗 c)、MNS (抗 M、抗 N、抗 S、抗 s) ,Kell (抗 K、抗 k)、P (抗 P1)、Kidd (抗見(jiàn)\抗Jka);采用IgM、IgG、IgM-1gG混合抗體；所述抗原墊預(yù)包被對(duì)應(yīng)血型抗原。
[0016]進(jìn)一步的，所述血液加樣器，包括與多通道血型檢測(cè)試紙卡位置對(duì)應(yīng)的加樣針，加樣針與清洗液儲(chǔ)存器連接，清洗液儲(chǔ)存器上設(shè)置有廢液儲(chǔ)存器；沖洗液加樣器，包括與多通道血型檢測(cè)試紙卡位置對(duì)應(yīng)的加樣針，加樣針與沖洗液儲(chǔ)存器連接，血液加樣器與沖洗液加樣器通過(guò)升降器與頂部的滑輪連接。
[0017]進(jìn)一步的，所述標(biāo)本架，設(shè)置若干標(biāo)本孔，用于放置血液標(biāo)本；其排列結(jié)構(gòu)與血液加樣器一致，每一組加樣針與標(biāo)本放置孔位置--對(duì)應(yīng)。
[0018]進(jìn)一步的，所述檢測(cè)臺(tái)設(shè)置有至少一個(gè)檢測(cè)區(qū)域，每一檢測(cè)區(qū)域?qū)?yīng)一個(gè)多通道血型檢測(cè)試紙卡，檢測(cè)臺(tái)底部設(shè)置受控制系統(tǒng)控制左右滑動(dòng)的滑輪或傳送帶。
[0019]進(jìn)一步的，所述自動(dòng)化光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，包括光源及激發(fā)鏡組，反射率檢測(cè)器，信號(hào)放大系統(tǒng)；所述激發(fā)鏡組，根據(jù)需要激發(fā)不同波長(zhǎng)的可見(jiàn)光若干組，為雙波長(zhǎng)、三波長(zhǎng)或三波長(zhǎng)以上，與各檢測(cè)區(qū)相對(duì)應(yīng)；所述波長(zhǎng)，若采用溴甲酚綠試劑作為檢測(cè)試劑時(shí)優(yōu)選為560nm,600nm,630nm ;若采用溴甲酸紫作為檢測(cè)試劑時(shí)為優(yōu)選540nm，603nm，628nm ;所述樣品反射率檢測(cè)器輸出端與信號(hào)放大系統(tǒng)輸入端相連，該信號(hào)放大系統(tǒng)輸出端與所述的數(shù)據(jù)處理與結(jié)果裝置輸入端相連。
[0020]進(jìn)一步的，所述控制系統(tǒng)，包括兩條滑動(dòng)軌道，升降器，調(diào)控系統(tǒng)，所述滑動(dòng)軌道分為上下兩條，所述血液加樣器、沖洗液加樣器、自動(dòng)化光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)設(shè)于上方軌道；升降器與加樣器連接，受控制系統(tǒng)控制進(jìn)行上下運(yùn)動(dòng)；所述標(biāo)本架，檢測(cè)臺(tái)設(shè)于下方軌道，均受控制系統(tǒng)控制。
[0021]進(jìn)一步的，所述數(shù)據(jù)處理與結(jié)果輸出裝置采集信號(hào)放大系統(tǒng)輸出的電信號(hào)，提取不同激發(fā)波長(zhǎng)獲得的反射率，進(jìn)行數(shù)據(jù)處理后，得到各通道試紙上的各待測(cè)血型樣本對(duì)應(yīng)的血型，受控制系統(tǒng)控制將結(jié)果經(jīng)結(jié)果輸出裝置顯示，所述的數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)內(nèi)已存入一組對(duì)應(yīng)不同波長(zhǎng)反射率的結(jié)果判斷閾值，陽(yáng)性為(R1 %?R2 %，N1 %?N2 %，Y1 %?Y2 % )，陰性為(R3%?R4%，N3%?N4%，Y3%?Y4%)，存入質(zhì)控試紙條反應(yīng)墊的質(zhì)控基準(zhǔn)值為(C1 %?C20A, C3%?C4% )。