微量測量母乳的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種微量測量母乳的方法，以較小的量檢測母乳成分，屬于母乳檢測 領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 嬰兒期是小兒生長發(fā)育最快的時期，需要攝入適量的營養(yǎng)素，才能保證正常的生 長發(fā)育，母乳含有新生兒生長發(fā)育所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，適合新生兒胃腸功能的消化和吸 收，而且其質(zhì)和量會不斷變化，以適應(yīng)嬰兒的生長發(fā)育所需，但是母乳營養(yǎng)不夠均衡，影響 嬰兒發(fā)育。因此，有必要對嬰兒的主要食物來源進行營養(yǎng)成分分析。
[0003] 現(xiàn)在很多醫(yī)院婦幼保健院等需要母乳檢測的機構(gòu)還沒有相應(yīng)的技術(shù)，分析母乳中 的營養(yǎng)物質(zhì)，特別是微量元素，為哺乳期媽媽補充營養(yǎng)提供依據(jù)，為嬰兒更好的補充營養(yǎng)， 但目前有的母乳分析所需要的母乳量是5毫升到20毫升，母乳采用量大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明微量測量母乳的方法利用物質(zhì)對不同波長光的吸收 現(xiàn)象，對物質(zhì)進行定性和定量分析，它符合朗伯一比耳定律；一種微量測量母乳的方法，包 括以下步驟，
[0005] 1)分光光度計儀器的定標；
[0006] 2)樣品離心：
[0007] a)將300ul-800ul母乳樣品放入離心管中，每個樣品做2-3個離心管備用，
[0008] b)母乳樣品需要在12000轉(zhuǎn)至20000轉(zhuǎn)的高速離心機上離心10-20分鐘，
[0009] C)將離心后的離心管取出，不要倒立或搖動，以免使得樣品出現(xiàn)混濁，
[0010] d)用一次性針管從離心管的管壁刺入離心管中，吸出離心管中間澄清的母乳上清 液并注入試管中備用；
[0011] 3)采用分光光度計儀器檢測母乳中微量元素的含量。
[0012] 所述母乳樣品量優(yōu)選為500ul。
[0013] 所述高速離心機的離心速度優(yōu)選為16000轉(zhuǎn)。
[0014] 所述母乳樣品離心時間優(yōu)選為15分鐘。
[0015] 測量的微量元素為鋅時，所述的鋅試劑1為Tris緩沖液，所述的鋅試劑2為鋅貢 (Zincon)，標準液為硫酸鋅。
[0016] 鋅的定標包括以下工序：
[0017] a)取1700ul鋅試劑1與IOOul鋅試劑2放入試管中混勻作為空白管；
[0018] b)取1500ul鋅試劑1與IOOul鋅試劑2再加入200ul鋅標準液放入試管中混勻 作為標準管；
[0019] c)將以上兩支試管放入溫度為37°C的恒溫水浴箱中預(yù)溫5分鐘；
[0020] d)使用630nm波長，將鋅的標準濃度及范圍預(yù)先輸入儀器、吸液量調(diào)整為 800-1000ul ；
[0021] e)按下調(diào)零鍵并吸入預(yù)溫好的空白管中液體待儀器提示調(diào)零結(jié)束；
[0022] f)調(diào)零之后按儀器上的定標鍵并吸入預(yù)溫后的標準管中的標準液，待儀器提示結(jié) 束會在定標因子處顯示此次定標的值、按確定完成鋅測量定標。
[0023] 鋅元素的測量包括以下工序：
[0024] a)取1500ul鋅試劑1、IOOul鋅試劑2、200ul母乳離心上清液將之混勻放入37°C 恒溫水浴箱中預(yù)溫5分鐘；
[0025] b)在儀器鋅測量項目中按測量鍵進入測量界面，將預(yù)溫好的樣品液吸入儀器中等 待測量結(jié)束。
[0026] 測量的微量元素為鐵時，所述的鐵試劑1為甘氨酸或鹽酸羥胺，所述的鐵試劑2為 菲洛嘆（Ferrospectral)，標準液為硫酸亞鐵。
[0027] 鐵的定標包括以下工序：
[0028] a)取2000ul鐵試劑1與IOOul鐵試劑2放入試管中混勻作為空白管；
[0029] b)取2000ul鐵試劑1與IOOul鐵試劑2再加入200ul鐵標準液放入試管中混勻 作為標準管；
[0030] C)將以上兩支試管放入溫度調(diào)整為37°C的恒溫水浴箱中預(yù)溫10分鐘；
[0031] d)使用578nm波長，將鐵的標準濃度及范圍預(yù)先輸入儀器、吸液量調(diào)整為 800-1000ul ；
[0032] e)按下調(diào)零鍵并吸入預(yù)溫好的空白管中液體待儀器提示調(diào)零結(jié)束；
[0033] f)調(diào)零之后，按儀器上的定標鍵并吸入預(yù)溫后的標準管中的標準液，待儀器提示 結(jié)束會在定標因子處顯示此次定標的值、按確定完成鐵測量定標。
[0034] 鐵元素的測量包括以下工序：
[0035] a)取2000ul鐵試劑1、IOOul鐵試劑2、200ul母乳離心上清液將之混勻放入37°C 恒溫水浴箱中預(yù)溫10分鐘；
[0036] b)在儀器鐵測量項目中，按測量鍵進入測量界面，將預(yù)溫好的樣品液吸入儀器中 等待測量結(jié)束。
[0037] 測量的微量元素為鈣時，所述的鈣試劑1為2-氨基-二甲基-1-丙醇，鈣試劑2 為鄰甲酚酞絡(luò)合酮或8-羥基喹啉，標準液為碳酸鈣。
[0038] 鈣的定標包括以下工序：
[0039] a)先把鈣測試液1與鈣測試液2等量取出放置在試管中混勻做為工作液；
[0040] b)取1500ul鈣工作液放入試管中作為空白管；
[0041] c)取1500ul鈣試劑1與20ul鈣標準液放入試管中混勻作為標準管；
[0042] d)將以上兩支試管在室溫條件下放置3分鐘；
[0043] e)使用578nm波長，將鈣的標準濃度及范圍預(yù)先輸入儀器、吸液量調(diào)整為 800-1000ul ；
[0044] f)按下調(diào)零鍵并吸入預(yù)溫好的空白管中液體，待儀器提示調(diào)零結(jié)束；
[0045] g)調(diào)零之后按儀器上的定標鍵，并吸入標準管中的標準液，待儀器提示結(jié)束會在 定標因子處顯示此次定標的值，按確定完成鈣測量定標。
[0046] 鈣元素的測量包括以下工序：
[0047] a)取1500ul鈣工作液、20ul母乳離心上清液將之混勻在室溫條件下放置3分鐘， [0048] b)在儀器鈣測量項目中，按測量鍵進入測量界面，將預(yù)溫好的樣品液吸入儀器中 等待測量結(jié)束。
[0049] 本發(fā)明微量測量母乳的方法，利用物質(zhì)對不同波長光的吸收現(xiàn)象，對物質(zhì)進行定 性和定量分析，
[0050] 采用這種方法，所用母乳數(shù)量少，為500ul，僅是現(xiàn)有方法的1/10,減少母乳的浪 費，而且檢測方法簡便。
【具體實施方式】
[0051] 本發(fā)明微量測量母乳的方法，儀器的測量原理為：利用物質(zhì)對不同波長光的吸收 現(xiàn)象，對物質(zhì)進行定性和定量分析，它符合朗伯一比耳定律，T 一 I/Ι。
[0052] A = Log(I〇 /D
[0053] 其中：T--透光度
[0054] I--透射光強度
[0055] 1"--入射光強度
[0056] A--吸收率
[0057] 包括以下步驟，
[0058] (1)儀器定標
[0059] 1、鋅的定標方法
[0060] 鋅試劑主要組成成份：
[0061] 鋅試劑I :Tris緩沖液
[0062] 鋅試劑 2 :鋅貢（Zincon)
[0063] 標準液：硫酸鋅
[0064] 定標步驟：
[0065] a)空白管：取1700ul鋅試劑1與IOOul鋅試劑2放入試管中混勻；
[0066] b)標準管：取1500ul鋅試劑1與IOOul鋅試劑2再加入200ul鋅標準液放入試 管中混勻；
[0067] c)將以上兩支試管放入溫度為37°C的恒溫水浴箱中預(yù)溫5分鐘；
[0068] d)使用630nm波長，將鋅的標準濃度及范圍預(yù)先輸入儀器、吸液量調(diào)整為 800-1000ul ；
[0069] e)此時按下調(diào)零鍵并吸入預(yù)溫好的空白管中液體待儀器提示調(diào)零結(jié)束；
[0070] f)調(diào)零之后按儀器上的定標鍵并吸入預(yù)溫后的標準管中的標準液待儀器提示結(jié) 束會在定標因子處顯示此次定標的值、按確定完成鋅測量定標；
[0071] g)單位：umol/L。
[0072] 2、鐵的定標方法
[0073] 鐵試劑主要組成成份：
[0074] 鐵試劑1 :甘氨酸、鹽酸羥胺
[0075] 鐵試劑 2 :菲洛嘆（Ferrospectral)
[0076] 鐵準液：硫酸亞鐵
[0077] 定標步驟：
[0078] ①空白管：取2000ul鐵試劑1與IOOul鐵試劑2放入試管中混勻；
[0079] ②標準管：取2000ul鐵試劑1與IOOul鐵試劑2再加入200ul鐵標準液放入試管 中混勻；
[0080] ③將以上兩支試管放入溫度調(diào)整為37°C的恒溫水浴箱中預(yù)溫10分鐘；
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