一種膠基型嚼煙中煙堿含量的測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于無煙氣煙草制品成分測定技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及膠基型嚼煙中煙堿含量 的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在《煙草控制框架公約（FCTC)》中有關(guān)禁止煙草煙霧在公共場所擴(kuò)散的禁令的頒 布，對卷煙和雪茄煙等傳統(tǒng)煙草制品的發(fā)展形成了強(qiáng)大沖擊。發(fā)展新型煙草之無煙氣煙草 已成為國際煙草領(lǐng)域的共識之一。膠基型嚼煙是一種以煙草或煙草提取物為效用組分，以 可食用膠基為載體，通過咀嚼方式向人體遞送煙堿的新型煙草制品，其外層可被糖衣包裹。 消費者在使用該類產(chǎn)品時，經(jīng)過口腔咀嚼包埋于膠基中的煙堿等成分經(jīng)唾液溶解后通過口 腔黏膜被人體吸收。所述膠基型嚼煙產(chǎn)品由瑞典火柴公司（SwedishMatch)于2003年首 先研發(fā)成功并投放市場。目前，國內(nèi)市場上尚未有相關(guān)產(chǎn)品形成銷售且缺乏針對所述膠基 型嚼煙廣品的相關(guān)檢測指標(biāo)及檢測方法。
[0003] 煙堿是易揮發(fā)且堿性較強(qiáng)的吡啶族生物堿，屬于弱二級堿，主要以游離態(tài)、單質(zhì)子 態(tài)和雙質(zhì)子態(tài)三種形態(tài)存在。煙堿的三種形態(tài)受外界pH的影響，一方面煙堿可與有機(jī)酸結(jié) 合而以質(zhì)子化的形式存在，而隨著堿性的增強(qiáng)，質(zhì)子化的煙堿可轉(zhuǎn)化為非質(zhì)子化的游離態(tài) 煙堿。
[0004] 煙堿（尼古丁）是煙草中特有且含量最高的生物堿，是評價無煙氣煙草制品質(zhì)量 和安全性的重要指標(biāo)。目前已有的無煙氣煙草煙堿含量的檢測方法，大多是針對傳統(tǒng)口含 煙等煙草制品的檢測方法。膠基型嚼煙，由于產(chǎn)品形式較新且基質(zhì)復(fù)雜，因此相關(guān)研宄和報 道較少。因此探索膠基型嚼煙的預(yù)處理和其中煙堿含量的測定方法是相當(dāng)必要的。
[0005] 張文娟等發(fā)明的中國專利CN201110364439. 9中公開了一種采用反向高效液相色 譜法（RP-HPLC)測定煙草膠基制品中煙堿含量的方法，其中將模擬人體咀嚼后的煙草膠基 制品的殘留樣品先用正己烷振蕩萃取、再用酸性磷酸鹽緩沖溶液振蕩萃取得到煙堿萃取液 后通過高效液相色譜進(jìn)行分析。但是在該方法中，膠基不溶物和煙堿最終均存在于下層的 水相中，而且下層由于不溶物的存在是渾濁的，不僅不利于取樣而且還會影響煙堿含量測 定的準(zhǔn)確性。且因為不溶物的存在造成進(jìn)樣困難，該分析方法無法使用更簡便快捷的氣相 色譜法，而只能使用液相色譜法。
[0006] 在本發(fā)明中開發(fā)了一種用堿液和有機(jī)溶劑共同萃取膠基型嚼煙中的煙堿并用更 快捷的氣相色譜進(jìn)行檢測的方法，本發(fā)明的測定方法取樣簡單，操作方便。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于改進(jìn)目前已有的膠基型嚼煙中煙堿含量測定方法的不足，提供 一種操作方便且測定結(jié)果準(zhǔn)確的膠基型嚼煙中煙堿含量的測定方法。
[0008] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：
[0009] 本發(fā)明涉及一種膠基型嚼煙中煙堿含量的測定方法，其包括以下步驟：
[0010] (1)將膠基型嚼煙樣品用堿液和不能與所述堿液互溶的有機(jī)溶劑的混合物進(jìn)行萃 取，得到含有煙堿的粗萃取液；
[0011] (2)將所述含有煙堿的粗萃取液靜置分層，收集含有煙堿的有機(jī)相層；
[0012] (3)將得到的所述含有煙堿的有機(jī)相層用有機(jī)相膜過濾，得到含有煙堿的萃取液。 其中，可以使用有機(jī)相針式過濾器進(jìn)行過濾，過濾的目的是確保氣相色譜儀的管路不被堵 塞。最常用的有機(jī)相膜有尼龍和聚丙烯兩種材質(zhì)。
[0013] (4)將所述含有煙堿的萃取液用氣相色譜儀或氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行檢測， 采用內(nèi)標(biāo)法得到所述膠基型嚼煙中的煙堿含量。
[0014] 優(yōu)選地，在步驟（2)中靜置的時間為lOmin以上。優(yōu)選地，在步驟（3)之前將所述 含有煙堿的有機(jī)相層進(jìn)行脫水處理，例如，可以使用無水硫酸鈉粉末進(jìn)行脫水。
[0015] 在優(yōu)選的實施方案中，步驟（1)中所述堿液為濃度為1~8mol/L的氫氧化鈉溶 液。
[0016] 在優(yōu)選的實施方案中，步驟（1)中所述有機(jī)溶劑為正己烷、甲基叔丁醚、甲基丁 醚、二氯甲烷或三氯甲烷。
[0017] 在優(yōu)選的實施方案中，步驟（1)中所述堿液與所述有機(jī)溶劑的體積比為1:3~ 1:6〇
[0018] 在優(yōu)選的實施方案中，在步驟（1)的萃取過程中對混合物進(jìn)行攪拌；獨立地，步驟 (1)中的萃取時間為90~llOmin。例如，可以通過磁力攪拌的方式。
[0019] 在優(yōu)選的實施方案中，步驟（1)中所用的所述膠基型嚼煙樣品的數(shù)量為2-6粒。 在所述膠基型嚼煙的實際制作加工過程中，通常會由于一些不穩(wěn)定的因素而導(dǎo)致最終得到 的所述膠基型嚼煙產(chǎn)品的單顆重量存在變化波動，這必然會導(dǎo)致單粒產(chǎn)品中煙堿含量的波 動，為了避免由此產(chǎn)生的對所述膠基型嚼煙樣品中煙堿含量檢測結(jié)果的影響，本發(fā)明中優(yōu) 選地先對各膠基型嚼煙樣品進(jìn)行重量檢測，計算樣品中各單顆重量分布范圍和形態(tài)以及樣 品重量的平均值和重量的方差，最終選擇重量范圍在平均值±(1-3)倍方差范圍內(nèi)的試樣 進(jìn)行后續(xù)測定。
[0020] 在優(yōu)選的實施方案中，所述內(nèi)標(biāo)法中使用的內(nèi)標(biāo)物為喹啉。其中，所述內(nèi)標(biāo)物的濃 度為20yg/ml左右。優(yōu)選地，將通過所述氣相色譜儀或氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀采用內(nèi)標(biāo)法 檢測過程中所需的內(nèi)標(biāo)物先加入到最初的有機(jī)溶劑中，再將所述有機(jī)溶劑和堿液用于萃取 所述膠基型嚼煙樣品，這樣可保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
[0021] 在優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)采用所述氣相色譜儀或所述氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 (GC-MS)進(jìn)行檢測時，所述氣相色譜儀的檢測條件為：采用熔融石英毛細(xì)管色譜柱，其柱長 為30m、內(nèi)徑為0? 25mm、固定相涂層液膜厚度為0? 25ym，固定相為5%苯基-甲基聚娃氧 烷；程序升溫方式為初始溫度60°C，以10°C/min速率升至280°C，保持15min，總運行時間 37min;以氦氣為載氣，流速為2.Oml/min;進(jìn)樣口溫度250°C，進(jìn)樣量1yL。所述恪融石英 毛細(xì)管色譜柱的型號可以為DB-5MS。
[0022] 在優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)采用所述氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行檢測時，其中所述 質(zhì)譜儀的檢測條件為：電離源為電子轟擊電離源；脈沖分流進(jìn)樣，分流比為40:1 ;采用質(zhì)譜 檢測器，溶劑延遲5min，電離電壓為70ev、離子源溫度為230°C、傳輸線溫度為250°C;質(zhì)譜 掃描方式為選擇離子監(jiān)測，煙堿和內(nèi)標(biāo)物喹啉的定性離子質(zhì)量數(shù)分別為133和102 ;定量 離子質(zhì)量數(shù)分別為84和129。其中煙堿的保留時間為8. 45min，內(nèi)標(biāo)物喹啉的保留時間為 7. 04min〇
[0023] 相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明取得了以下有益效果：
[0024] 1、本發(fā)明的測定方法對膠基型嚼煙中的煙堿提取穩(wěn)定且得率高，適應(yīng)于目前市場 上的膠基型嚼煙產(chǎn)品和自行研制的產(chǎn)品，煙堿含量測定值接近理論值；并且方法簡單、便于 操作，有推廣的價值。
[0025] 2、本發(fā)明的測定方法中利用堿液的作用，使所述膠基型嚼煙中的煙堿轉(zhuǎn)化為非質(zhì) 子化的游離態(tài)煙堿，進(jìn)而被萃取到有機(jī)相中；萃取后的有機(jī)相為清液且除煙堿外其他雜質(zhì) 較少，不僅便于取樣檢測，而且也避免了現(xiàn)有的煙堿含量測定方法中將煙堿萃取到水相中， 而水相中因有大量其他雜質(zhì)會因雜質(zhì)影響煙堿含量測定準(zhǔn)確度的弊端。此外，還避免了一 部分質(zhì)子態(tài)煙堿殘留在水相中造成的被測物損失。
[0026] 3、膠基型嚼煙的包衣僅溶于水而不溶于有機(jī)物，且包衣與膠基的粘合力很強(qiáng)，測 量時難以完整地去除包衣，所以現(xiàn)有技術(shù)的膠基型嚼煙中煙堿含量的測定方法中無法測定 帶有包衣的膠基型嚼煙樣品中的煙堿含量，而僅能針對經(jīng)過模擬人體咀嚼或通過其他方式 破碎后的膠基型嚼煙；而本發(fā)明的方法中所述膠基型嚼煙的包衣溶解在水相中，膠基和煙 堿溶解在有機(jī)相中，樣品能夠?qū)崿F(xiàn)"全溶"，故無需經(jīng)過模擬咀嚼和破碎就可以直接測定帶 有包衣的膠基型嚼煙；另一方面，由于包衣中也可能含有部分煙堿，因此本發(fā)明的測定方法 可以進(jìn)一步保證煙堿含量測定的準(zhǔn)確性。
【附圖說明】
[0027] 無
【具體實施方式】
[0028] 下面以具體實施例來說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但應(yīng)理解本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于 此。
[0029] 實施例中所采用的材料與儀器信息如下：
[0030] 膠基型嚼煙（加包衣，生產(chǎn)廠家：云南中煙技術(shù)中心）；正己烷（AR，生產(chǎn)廠家：西 隴化工股份有限公司）；甲基叔丁醚（AR，生產(chǎn)廠家：西隴化工股份有限公司）；二氯甲烷 (AR，生產(chǎn)廠家：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；異丙醇（A