溶劑泵20必須在注樣時間內(nèi)停止其流動， 以防止在相連的溶劑支管19和分析支管17內(nèi)的壓力增大。
[0030] 現(xiàn)在，樣品通過計量裝置10從樣品支管18 (在被壓入的針1內(nèi)的、直至與之相連 的止回閥3端口前的物質(zhì)）被泵送向柱9。在加入了位于針1內(nèi)的期望數(shù)量的樣品并且計 量裝置10已調(diào)節(jié)好輸送率之后，止回閥3自動關(guān)閉并且溶劑泵20又開始其泵送。
[0031] 為了避免在此注入過程中的流動增強（分析支管內(nèi)的體積流^和壓力增大或者 猛降，在自動進(jìn)樣器（計量裝置10、樣品回路管2和針1)與溶劑泵20之間發(fā)生數(shù)據(jù)通訊 (例如借助控制裝置40)，其協(xié)調(diào)在計量裝置10和溶劑泵20之間的流體接收。
[0032] 通過這種方式，可限定的期望樣品量被直接加入通向分離柱9的溶劑流，而樣品 未被溶劑流稀釋。另外，微弱的樣品分散和縱向混勻不僅提高了分析精度（在示意性所示 的檢測器30中），而且延長了柱9的使用壽命。
[0033] 如圖1所示，可以通過計量裝置10借助與沖洗介質(zhì)容器16相連的沖洗泵14來沖 洗或清洗樣品回路管2連同注樣針，隨后樣品回路管2和針1的內(nèi)部借助泵15(其也像泵 20 -樣與用于溶劑25 (流體）的儲存容器相連）來灌充。當(dāng)然也可以想到，為了清洗也使 用溶劑25,從而可以省掉附加泵14和沖洗介質(zhì)16。此時樣品回路管直到注樣針1的尖都 被灌充溶劑，以避免樣品（通常在HPLC內(nèi)除氣）的吸氣及其不希望有的混勻。為了能在自 動進(jìn)樣器中保持相應(yīng)的溶劑柱，可以設(shè)有相應(yīng)的止回閥13用于阻止向后流出以及從針1前 側(cè)噴出，如圖示意性所示。
[0034] 因為針1在投入使用前是無菌的并且在通常要刺破樣瓶8的隔膜的取樣過程中被 污染，故根據(jù)本發(fā)明在注樣之后但在重新取樣之前進(jìn)行上述的清洗，從而在這樣的清洗之 后又保證了無菌狀態(tài)。
[0035] 如在圖1中通過四個樣瓶8示意所示，根據(jù)本發(fā)明可以（如在HPLC中常見地）從 許多不同的樣瓶8來先后取樣并注入或加入。樣瓶8(管瓶）此時能設(shè)置在例如呈托盤或 (微）滴定板（阱板）形式的自動進(jìn)樣器中。
[0036] 為了允許在注樣之后立即進(jìn)行沖洗，針座6在其頂面具有包圍該針座的朝上敞開 的溢流容器7,從而流出的沖洗液和/或溶劑可進(jìn)入溢流容器并且可根據(jù)所示的拐彎箭頭 流走或被排出。由此可以利用本發(fā)明的加樣器取出和注入許多樣品，在這里，在注入之后且 重新取樣之前的沖洗防止了后面的樣品和進(jìn)而下一次樣品循環(huán)被污染。
[0037] 為了控制上述過程尤其以便保持在分析支管17中的體積流恒定，泵20和計量裝 置10或其驅(qū)動馬達(dá)12可通過控制裝置被相應(yīng)控制。泵14和/或15的相應(yīng)控制在如前所 述的時間過程中進(jìn)行，但只為了清洗目的和在加樣器內(nèi)維持溶劑。為了允許特別高的控制 精度，如圖1示意性所示，可以在溶劑支管19內(nèi)額外設(shè)有壓力傳感器以及在樣品支管18內(nèi) 設(shè)有壓力傳感器11，其將相應(yīng)的實際狀態(tài)傳輸給控制裝置，在控制裝置中加以分析。這樣的 壓力傳感器21和11也能被集成在泵20和計量裝置10內(nèi)。
[0038] 在圖2中在四個位置被放大的針座6局部示出了如何在第一位置上該閥3在截止 狀態(tài)利用球5封閉通向針座6的端口，進(jìn)而體積流亡等于體積流A。在此閥位置上，針1還 是可以位于針座6外，沒有溶劑經(jīng)關(guān)閉的通向針座的止回閥端口流出。接著，針1被密封壓 入針座6中（如圖2的左側(cè)第二分圖所示），從而通向針座6的閥3端口被緊密關(guān)閉并且在 此位置上該端口還通過球5被關(guān)閉。
[0039] 圖2中的第三分圖示出了如下情況：已經(jīng)停止了體積流在系統(tǒng)或者說溶劑支 管19和與之相連的分析支管17中所存在的壓力相等的情況下，球5松開并且放開通向針 座的端口；而通過體積流?,樣品被加入該分析支管17。圖2中的右側(cè)視圖又示出了如下情 況：最好在加入比在針1和樣品回路管2所容納的樣品量少的預(yù)定量體積流β之后停止樣 品注入，并且體積流t又由溶劑的體積流A供給。即使在該方法的優(yōu)選實施方式中未把樣 品回路管2和針1內(nèi)包含的所有樣品量加入體積流t并由此損失所取樣品的一部分，該方 法也可能是有利的，因為由此可以避免在后分界面處的混勻效果。否則就會出現(xiàn)這樣的混 勻過程，這是因為后分界面在取樣時向后運動并且在樣品注入時又向前移動，直到它作為 分界面存在于體積流(?中。但是，通過該運動，所述分界面因混勻效果而變得不鮮明，這不 利地影響到在檢測器30內(nèi)的分析精度。
[0040] 圖3所示的單位時間體積流的曲線圖示出了體積流C如何作為體積流A和E之 和的合量來組成。在截止閥位（圖2中的左圖、從左起的第二個以及右圖），體積流A是恒 定的并且作為恒定的體積流C繼續(xù)前進(jìn)。體積流￡在此刻（在Tl前和在T4后）是不存在 的。
[0041] 在打開位置，如圖2中的左起第三視圖所示，通過泵20的停止使得體積流A停止， 從而在T2和T3之間的期間內(nèi)該體積流β前進(jìn)成為體積流亡。在與注樣持續(xù)時間相比很短 的例如是10毫秒至1分鐘（例如1毫秒或更短，但至少短于幾毫秒）的過渡階段Τ1-Τ2和 Τ3-Τ4中，體積流β增大（或降低）的幅度與體積流A降低（或增大）的幅度相同。雖然圖 3以直線示意示出了與此相關(guān)的斜線，但是相應(yīng)的增減當(dāng)然也可以根據(jù)相應(yīng)曲線進(jìn)行。但在 本發(fā)明優(yōu)選實施方式中，通過相應(yīng)控制泵20和計量裝置10,即使閥3在過渡階段T1-T2中 打開以及閥3在過渡階段T3-T4中關(guān)閉，也保證了在任何時刻這些體積流的總和所達(dá)到的 程度與在前的體積流A和在后的體積流β (從閉到開的過渡）或者在前的體積流β和在后 的體積流A (在從開到閉過渡時）一樣。通過遵守恒定的體積流，不僅在樣品注入之前、之 中和之后，而且在過渡階段（Τ1-Τ2和Τ3-Τ4)，樣品或者說"樣品結(jié)"的加入是在維持清晰分 界面的情況下完成的，在此如已經(jīng)描述，可以通過將預(yù)定樣品量與整個取樣分隔開來阻止 因在針1和樣品回路管2內(nèi)的運動所導(dǎo)致的就流向看在后的混勻。
[0042] 如在HPLC中常見的那樣，樣品流通在例如高于500巴或甚至高于1000巴的很高 壓力下進(jìn)行，從而在所要求的在分析支管內(nèi)的狹窄橫截面（IOym至最大Imm)情況下可以 產(chǎn)生幾微升至10毫升/分鐘、最好是小于100微升/分鐘且尤其是小于300微升/分鐘 的體積流，但在當(dāng)前期望的水平，其偏差常數(shù)小于25%，例如小于10%或小于5%，尤其是 < 1%，以保護分離柱免受不利的過高流動波動。整個樣品流轉(zhuǎn)過程由此可以持續(xù)一分鐘或 許多分鐘，直至一小時，直到物質(zhì)連同樣品通過分離柱9到達(dá)檢測器30。
【主權(quán)項】
1. 一種將樣品加入液相色譜設(shè)備尤其是高效液相色譜設(shè)備的分析支管（17)中的方 法， a) 其中，溶劑（25)或溶劑混合物從至少一個溶劑支管（19)作為體積流A被送入該分 析支管（17)， b) 至少一個樣品從至少一個樣品支管（18)作為體積流?在一個預(yù)定的時間間隔（At =t4-t)內(nèi)被加入該分析支管（17)中， 其特征是， c) 在所述預(yù)定的時間間隔（At = It1)期間，所述體積流A的量被減少， d) 其中，由所述體積流A和所述體積流?之和產(chǎn)生的體積流G在該分析支管（17)內(nèi) 保持基本恒定。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，在所述預(yù)定的時間間隔（At = t4_ti)期間， 至少在過渡階段（h-tptftj之前和之后，所述體積流A完全停頓（為了加入樣品而停止 溶劑泵，同時啟動計量裝置泵；而在樣品加入之后，停止該計量裝置泵，同時再次啟動該溶 劑泵）。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征是，所述體積流t等于所述體積流A或所 述體積流β的最大值。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的方法，其特征是，所述體積流β (用于從樣品回路管 加入樣品）在到達(dá)樣品端和溶劑之間的就流向看靠后的過渡部之前被停止，從而在被加入 該分析支管的所述體積流?中的樣品上出現(xiàn)新的靠后的過渡部。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的方法，其特征是，為了加入樣品，注樣針（1)在一次取 樣后被高度密封地壓入針座（6)中，該針座通過單向作用閥且尤其是止回閥（3)與該分析 支管（17)相連。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征是，該注樣針（1)在樣品加入之后在另一次取樣 之前借助沖洗被自動清洗。
7. 根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的方法，其特征是，在一次樣品注入之后或之前，溶劑或 溶劑混合物被加入該分析支管（17)。
8. -種用于執(zhí)行根據(jù)前述權(quán)利要求之一的方法的、用于液相色譜設(shè)備尤其是高效液相 色譜設(shè)備的加樣器，其具有： a) 能夠以馬達(dá)方式控制的至少一個注樣針（1)， b) 至少一個針座（6)，該至少一個注樣針（1)的針尖能被密封壓入該針座中， c) 單向作用的注入閥，在該注入閥的入口連接有至少一個樣品支管（18)，該樣品支管 與該至少一個針座（6)相連，以及至少一個接頭，在該接頭上連接有通向至少一個分離柱 (9)的分析支管（17)和至少一個溶劑支管（19)， d) 其中，在該閥（3)的一個位置上，該樣品支管（18)被液密封閉， e) 在該閥⑶的另一個位置上，該樣品支管（18)被打開，從而來自樣品支管（18)的樣 品作為體積流?在預(yù)定的時間間隔（At = t4_ti)內(nèi)被加入與該溶劑支管（19)相連的分析 支管（17)中。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的加樣器，其特征是，該注樣針（1)與樣品回路管（2)相連。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的加樣器，其特征是，該加樣器包括控制裝置（40)，該控 制裝置是如此構(gòu)成的，即，控制溶劑泵（20)和/或計量裝置泵（10)以將該分析支管（17) 內(nèi)的體積流t保持基本恒定。
【專利摘要】本發(fā)明涉及將樣品加入液相色譜設(shè)備尤其是高效液相色譜設(shè)備的分析支管(17)的方法，其中，溶劑(25)或溶劑混合物從至少一個溶劑支管(19)作為體積流被送入分析支管(17)，至少一個樣品從至少一個樣品支管(18)作為體積流在預(yù)定的時間間隔(Δt＝t4-t1)內(nèi)被加入分析支管(17)，在所述預(yù)定的時間間隔(Δt＝t4-t1)期間內(nèi)，該體積流的量被減小，其中，由體積流和之和產(chǎn)生的體積流在分析支管(17)內(nèi)保持基本恒定。本發(fā)明還涉及執(zhí)行這種方法的加樣器。
【IPC分類】G01N30-24
【公開號】CN104833745
【申請?zhí)枴緾N201510065060
【發(fā)明人】赫爾曼·霍克格雷伯
【申請人】道尼克斯索芙特隆公司
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年2月6日
【公告號】DE102014101617A1, US20150226710