一種同時(shí)測(cè)定軟膠囊保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥非法添加品的測(cè)定，具體地說(shuō)，是涉及一種同時(shí)測(cè)定軟膠囊 保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法，屬于醫(yī)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前我國(guó)已批準(zhǔn)的保健食品的保健功能有減肥、緩解體力疲勞、輔助降血脂、輔助 降血壓、輔助降血糖、輔助改善記憶力等27種，近年來(lái)，隨著社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)壓力的不斷增大和老 年化社會(huì)的擴(kuò)大，輔助改善記憶力類保健品正步入人們的學(xué)習(xí)、工作和生活中，常見(jiàn)功能有 改善記憶力、補(bǔ)充大腦營(yíng)養(yǎng)等。"輔助改善記憶"的保健功能主要通過(guò)補(bǔ)充大腦正常運(yùn)行所 必須的物質(zhì)、增加大腦細(xì)胞對(duì)氧氣的利用、提供能夠促進(jìn)腦部新陳代謝排出的物質(zhì)等功效。 然而不法商家為了使保健品起效快，以達(dá)到增加銷售量目的，會(huì)在保健品中非法添加化學(xué) 藥物，但化學(xué)藥物的副作用往往會(huì)嚴(yán)重影響人們的身體健康。
[0003] 目前用于輔助改善記憶力類保健食品非法添加的篩查方法較少，同時(shí)檢測(cè)多種非 法添加藥物的方法更是少之又少。因此，針對(duì)此類保健食品中潛在的、可能添加化學(xué)藥物建 立一種有效的、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，預(yù)防輔助改善記憶類保健食品進(jìn)入市場(chǎng)后導(dǎo)致的不良事 件發(fā)生，確保其安全性。本研宄依據(jù)相關(guān)發(fā)明通過(guò)對(duì)17種促智類化學(xué)藥品（多奈哌齊、石 杉?jí)A甲、依達(dá)拉奉、倍他司汀、煙酸占替諾、吡拉西坦、加蘭他敏、咖啡因、茴拉西坦、氟馬西 尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、雙氯芬酸鈉）建立高效液相 色譜分析方法，應(yīng)用于改善記憶力類保健食品中非法添加化學(xué)藥物的篩查。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的是提供一種同時(shí)測(cè)定軟膠囊保健食品中非法添加的 多種化學(xué)藥物的方法，該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速測(cè)定軟膠囊保健食品中17種非法添加 化學(xué)物的同時(shí)分析，可用于輔助改善記憶類保健食品中非法添加化學(xué)藥品的定性篩查和定 量檢測(cè)。
[0005] 本發(fā)明提供的的技術(shù)方案是這樣的：
[0006] -種同時(shí)測(cè)定軟膠囊保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法，依次包括下述 步驟：
[0007] 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0008] 分別精密稱取17種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，加50%乙腈水溶液使成濃度為0. 3mg/mL，檢測(cè) 17種化學(xué)藥物單標(biāo)色譜和混標(biāo)色譜圖；
[0009] 2)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
[0010] 取標(biāo)準(zhǔn)溶液適量加50%乙腈水溶液，分別配制成40 μ g/mL、80 μ g/mL、100 μ g/ mL、200 μ g/mL、400 μ g/mL，作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶；
[0011] 3)樣品前處理
[0012] 稱取相當(dāng)于一次口服劑量，置于IOOmL瓶子中，精密加入50mL 50%乙腈水溶液， 稱其重量，超聲提取30分鐘，冷卻，用50%乙腈-水溶液補(bǔ)足重量，于5°C冰箱放至3小時(shí)， 待略有沉淀產(chǎn)生，將溶液轉(zhuǎn)移離心管，于4000r/min離心10min，上清液過(guò)濾，濾液待用；
[0013] 4)凈化
[0014] 精密量取上述濾液2mL以約lmL/min流速通過(guò)C18-SPE柱，用5ml50%乙腈-水洗 脫，合并流出液與洗脫液，用0. 33um有機(jī)濾膜過(guò)濾即得待測(cè)樣品。
[0015] 進(jìn)一步的，上述的同時(shí)測(cè)定軟膠囊保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法， 所述色譜條件為：
[0016] 色譜柱！C18-SPE ;流動(dòng)相：A :水；B :100mmol/L磷酸二氫鉀緩沖鹽，pH 6. 4 ;C:乙 腈；梯度洗脫程序：〇 ~l〇min，85% ~45%A、10%B、5% ~45%C ;10 ~12min，45%A、10% B、45% C ;12 ~15min，45%~31% A、10%~14% B、45% C ;15 ~15. lmin，31%~0% A、 14%~50% B、50% C ;15· 1 ~17min，0% A、50% B、50% C ;17 ~17. lmin，0%~85% A、 50%~10% B、50%~5% C ;17· 1 ~20min，85% A、10% B、5% C ;在 85% A、10% B、5% C 下平衡3min。流速：0. 8mL/min ;柱溫：40°C ;進(jìn)樣量：1 μ I ;檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm為主要檢測(cè)波 長(zhǎng)；254nm、280nm輔助定性。
[0017] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案建立了使用同一種色譜條件同時(shí)測(cè)定輔 助改善記憶類保健食品中可能添加的17種化學(xué)藥物含量的高效液相方法，在20min內(nèi)完成 了對(duì)各化合物的分析測(cè)定，在保證分離度的情況下，實(shí)現(xiàn)了快速有效的高通量分析，可為監(jiān) 測(cè)輔助改善記憶類保健食品非法添加藥物提供強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面通過(guò)實(shí)施例的方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任 何人在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改仍在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)。
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 1材料與方法
[0021] 1.1 材料
[0022] I. I. 1樣品來(lái)源
[0023] 輔助改善記憶力類保健食品來(lái)源于市場(chǎng)銷售樣品。
[0024] I. 1. 2主要儀器與試劑
[0025] Agilent 1260高效液相色譜儀（二極管陣列檢測(cè)器，美國(guó)Agilent)，XA20OTU電 子分析天平（瑞士梅特勒公司），Classic UVF超純水器（英國(guó)ELGA公司），P300H超聲 波清洗器（德國(guó)Elma公司），Sigma 3K15高速離心機(jī)（德國(guó)賽多利斯公司），C18-SPE柱 (60mg/3mL,天津博納艾杰爾科技有限公司）。
[0026] 多奈哌齊、石杉?jí)A甲、依達(dá)拉奉、倍他司汀、煙酸占替諾、吡拉西坦、加蘭他敏、咖啡 因、茴拉西坦、氟馬西尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、雙氯 芬酸鈉對(duì)照品均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研宄院，純度均多98.5% ;乙腈和乙腈（液質(zhì)級(jí)， B&J)，其它試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)ELGA PURELAB Classic UVF凈化系過(guò)濾的去離 子水。
[0027] 1. 2 方法
[0028] I. 2. 1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0029] I. 2. I. 1標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別精密稱取17種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，加50%乙腈水溶液使成濃 度為0. 3mg/mL ; 17種化學(xué)藥物：其中：1吡拉西坦；2萘普生；3咖啡因；4依達(dá)拉奉；5雙氯 酚酸鈉；6茴拉西坦；7佛馬西尼；8煙酸占替諾；9雌三醇；10石杉?jí)A甲；11尼莫地平；12加 蘭他敏；13倍他司?。?4己烯雌酚；15阿米三嗪；16 ;多奈哌齊；17,佛桂利嗪；c膠囊制劑。
[0030] 1. 2. 1. 2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線：取標(biāo)準(zhǔn)溶液適量加50 %乙腈水溶液，分別配制成40 μ g/ mL、80 μ g/mL、100 μ g/mL、200 μ g/mL、400 μ g/mL，作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶液。
[0031] 1.2. 2樣品前處理
[0032] 軟膠囊制劑：稱取相當(dāng)于一次口服劑量（如說(shuō)明書無(wú)一次口服劑量，則取日服劑 量），置于IOOmL瓶子中，精密加入50