一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測(cè)樣本的采集和保存方法，尤其涉及一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法。
【背景技術(shù)】
[0003]在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的過(guò)程中，聚丙烯酰胺凝膠電泳銀染、顯色后，聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜樣本將粘附在玻璃板上，如果要保存分析圖譜，需要用凝膠成像分析儀進(jìn)行圖譜采集保存，但凝膠成像分析儀的價(jià)格昂貴，不適合中小醫(yī)療、研宄單位的推廣應(yīng)用；而傳統(tǒng)的保存方法通常是拍照或連同玻璃板和聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜一并保存，但是一方面，拍照?qǐng)D片對(duì)于弱顯帶的分辨率不高，很容易將有價(jià)值的分析圖譜丟失；另一方面，玻璃板沉重且易碎，也不利于聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜樣本的保存。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供了一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法，用以解決【背景技術(shù)】中聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法存在的問(wèn)題。
[0005]為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法，包括以下五個(gè)步驟:
第一步:將醫(yī)用振蕩器的反應(yīng)槽中加入軟化活性反應(yīng)試劑；
第二步:將粘附有聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的玻璃板板放入軟化活性反應(yīng)試劑中進(jìn)行加熱、振蕩，使聚丙烯酰胺凝膠和軟化活性反應(yīng)試劑充分反應(yīng)，減小聚丙烯酰胺凝膠與玻璃板之間的吸附力；
第三步:用經(jīng)過(guò)活化處理的纖維素膜覆蓋在粘附在玻璃板上的聚丙烯酰胺凝膠樣本上，再用刮板除去纖維素膜與聚丙烯酰胺凝膠樣本之間的氣泡；
第四步:揭下纖維素膜；
第五步:將上一步中加下的纖維素膜放入醫(yī)用干燥器中進(jìn)行干燥，干燥完成后，取出纖維素膜并放置在指定的位置保存即可。
[0006]第一步中所述的軟化活性反應(yīng)試劑的成分主要由兩性表面活性劑、碳酸鈉、碳酸鎂、三聚磷酸鈉、硅烷、冰醋酸和去離子水組成，兩性表面活性劑占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的3%-4%，碳酸鈉占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的7%-10%，碳酸鎂占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的2%-3%，三聚磷酸鈉占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的12%-14%，硅烷占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的2%-3%，冰醋酸占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的11%-13%，去離子水占軟化活性反應(yīng)試劑質(zhì)量百分比的56%-59%。
[0007]第一步中所述的醫(yī)用振蕩器包括振蕩器主體和反應(yīng)槽，所述的反應(yīng)槽包括槽體、槽蓋、固定件和電磁振動(dòng)儀，所述的固定件設(shè)置在槽體內(nèi)，固定件由支柱、搖擺臂和塑料螺栓構(gòu)成，支柱的下表面與槽底固定連接，支柱的上端與搖擺臂的第一端鉸接，搖擺臂的第二端設(shè)置有螺孔，螺孔的直徑與塑料螺栓的直徑相匹配，電磁振動(dòng)儀的非振蕩端與槽體底面固定連接。
[0008]所述的固定件不少于四個(gè)，固定件的支柱沿槽體邊沿對(duì)稱(chēng)設(shè)置。
[0009]所述的電磁振動(dòng)儀不少于四個(gè)，電磁振動(dòng)儀均勻設(shè)置在槽底中部。
[0010]第三步中所述的纖維素膜的孔徑與凝膠顆粒的大小相匹配。
[0011]首先，本發(fā)明采用了利用特定的活性軟化反應(yīng)試劑來(lái)減小玻璃板與聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜之間的吸附作用，保證了從玻璃板上分離聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜時(shí)聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的完整性，防止由于兩者粘附比較牢固而導(dǎo)致分離時(shí)損壞聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的情況的發(fā)生；其次，本發(fā)明采用與聚丙烯酰胺凝膠顆粒大小相匹配的纖維素膜來(lái)作為聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的承載體，一方面，可以保證從玻璃板上分離聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜時(shí)聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的完整性；另一方面，纖維素膜干燥后既輕便易攜，又方便保存。
【附圖說(shuō)明】
[0012]圖1為本發(fā)明的流程示意圖；
圖2為本發(fā)明所述的醫(yī)用振蕩器的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]如圖1和圖2所示，本發(fā)明所述的一種聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的采集和保存方法，包括以下步驟:
第一步:將醫(yī)用振蕩器的反應(yīng)槽中加入軟化活性反應(yīng)試劑，所述的軟化活性反應(yīng)試劑的
主要成分按質(zhì)量分?jǐn)?shù)百分比混合，軟化活性反應(yīng)試劑的主要成分包括占質(zhì)量比3.5%的兩性表面活性劑、占質(zhì)量比8.5%的碳酸鈉、占質(zhì)量比2.3%的碳酸鎂、占質(zhì)量比13.5%的三聚磷酸鈉、占質(zhì)量比2.5%的硅烷、占質(zhì)量比12%的冰醋酸和占質(zhì)量比57.7%的去離子水，調(diào)節(jié)軟化活性反應(yīng)試劑的PH值至5.5，進(jìn)入下一步；
第二步:將粘附有聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜的玻璃板放入醫(yī)用振蕩器進(jìn)行加熱、振蕩，使玻璃板上的聚丙烯酰胺凝膠與振蕩器反應(yīng)槽中的軟化活性反應(yīng)試劑充分反應(yīng)，首先，兩性表面活性劑易吸附于固-水界面，能夠減少聚丙烯酰胺凝膠與玻璃板之間的吸附力；其次，軟化活性反應(yīng)試劑中其它介質(zhì)通過(guò)加熱、振蕩，能夠增加分子間的運(yùn)動(dòng)，加速物化反應(yīng)，使聚丙烯酰胺凝膠與玻璃板之間締合鏈狀的大分子，斷裂成單個(gè)小分子，溶解鹽類(lèi)的正負(fù)離子被單個(gè)水分子包圍，使軟化活性反應(yīng)試劑中鹽離子結(jié)合物的針狀結(jié)晶體變?yōu)榱罱Y(jié)晶體，相互粘附與積聚性受到破壞，減少聚丙烯酰胺凝膠與玻璃板之間吸附力；進(jìn)入下一步；
第三步:用經(jīng)過(guò)活化處理的纖維素膜覆蓋在粘附在玻璃板上的聚丙烯酰胺凝膠樣本上，
再用刮板除去纖維素膜與聚丙烯酰胺凝膠樣本之間的氣泡，使纖維素膜與聚丙烯酰胺凝膠完全吸附，本步驟中纖維素膜的孔徑與聚丙烯酰胺凝膠顆粒的大小相匹配，以保證聚丙烯酰胺凝膠顆粒能夠進(jìn)入纖維素膜縫隙，從而使聚丙烯酰胺凝膠顆粒與纖維素膜縫隙形成機(jī)械性粘合，使得聚丙烯酰胺凝膠與纖維素膜完全吸附，然后進(jìn)入下一步；
第四步:揭下纖維素膜，由于步驟三中的聚丙烯酰胺凝膠與纖維素膜完全吸附，所以聚丙烯酰胺凝膠電泳分析圖譜就粘附在了揭下的纖維素膜上了，