新型癌癥病變標(biāo)記用組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及新型癌癥病變標(biāo)記用組合物，更具體地，本發(fā)明涉及包含在大顆粒聚 合白蛋白（MAA，macroaggregated albumin)結(jié)合有生物組織染色用色素、放射性同位素或 它們的組合的復(fù)合體的癌癥病變標(biāo)記用組合物、利用上述癌癥病變標(biāo)記用組合物來(lái)提供癌 癥病變的位置信息的方法、包含上述癌癥病變標(biāo)記用組合物的癌癥病變標(biāo)記用試劑盒以及 包含于上述癌癥病變標(biāo)記用組合物的、在大顆粒聚合白蛋白結(jié)合有生物組織染色用色素的 復(fù)合體。
【背景技術(shù)】
[0002] 在抗癌治療的情況下，開發(fā)利用多種抗癌藥的方法，但至今最廣泛使用通過外科 手術(shù)方法切除癌細(xì)胞的方法。但是，在使用外科手術(shù)方法的情況下，術(shù)后為了患者的健康及 福祉，需要在手術(shù)中將手術(shù)范圍最小化的技術(shù)。尤其，在乳腺癌的情況下，當(dāng)對(duì)乳房小的韓 國(guó)國(guó)內(nèi)女性進(jìn)行手術(shù)時(shí)，只有切除的病變小于在其他國(guó)家切除的病變，才可以實(shí)現(xiàn)乳房保 存治療法的目標(biāo)。手術(shù)范圍由病變和病變周圍的邊緣多余部位決定。若主刀醫(yī)生未準(zhǔn)確地 了解病變部位和范圍，則只能多留病變周圍的邊緣多余部分。這是因?yàn)槿裘つ康販p小手術(shù) 范圍，則也有可能腫瘤留在切除面。但是，在實(shí)際臨床手術(shù)中用于由手術(shù)主刀醫(yī)生在手術(shù)中 準(zhǔn)確地實(shí)時(shí)確認(rèn)病變的方法并不多。即使開發(fā)了非常精密的診斷方法，這種診斷方法在手 術(shù)中也未能使用，從而在實(shí)際手術(shù)中主要依賴于手術(shù)人員的觸覺或視覺，而在這種情況下， 很少存在病變顯著地被區(qū)別的情況。尤其，在病變小的情況下更不好區(qū)別。為了實(shí)現(xiàn)微創(chuàng) 手術(shù)及保存手術(shù)的目的，需要在手術(shù)中向手術(shù)人員實(shí)時(shí)告知病變的技術(shù)。
[0003] 以往的腫瘤切除手術(shù)，尤其，當(dāng)進(jìn)行乳腺癌手術(shù)時(shí)，在手術(shù)之前通過超聲波、乳房 攝影術(shù)或磁共振成像對(duì)患者的微小病變的位置進(jìn)行確認(rèn)，并表示經(jīng)確認(rèn)的病變的位置之 后，切除被表示的部位的組織，作為表示經(jīng)確認(rèn)的病變的位置的方法使用在皮膚表面畫畫 兒的方法、利用金屬絲的方法、注射如木炭（Charcoal)之類的黑色素的方法等。但是，為了 表示病變的位置，利用筆在皮膚上畫畫兒的方法在非常柔軟的乳房組織的特性上與診斷時(shí) 不同，在手術(shù)室中乳房的形狀變化多，在乳房深部的病變的情況下，僅使用表示于皮膚表面 的方法是不能充分顯示等，從而可容易使用，但存在準(zhǔn)確度低的缺點(diǎn)。其次，利用金屬絲來(lái) 刺入乳房病變的方法存在如下缺點(diǎn)：本來(lái)需要向皮膚表面垂直地插入金屬絲，但因有可能 對(duì)超聲波探針產(chǎn)生影響而不得不斜線地插入金屬絲，金屬絲的位置可隨著乳房的移動(dòng)而移 動(dòng)等，因而呈現(xiàn)比預(yù)期低的準(zhǔn)確度，被插入的金屬絲妨礙手術(shù)，還需要執(zhí)行切除金屬絲的插 入部位的手術(shù)。最后，如注射木炭之類的色素的方法，具有所注射的色素可與病變相結(jié)合來(lái) 準(zhǔn)確地標(biāo)記病變的位置的優(yōu)點(diǎn)，相反，在乳房深部的病變的情況下，存在無(wú)法從外部確認(rèn)黑 色色素，且手術(shù)部位因色素而受污染的缺點(diǎn)。并且，這種缺點(diǎn)在用于切除乳腺癌之外的癌癥 組織的外科手術(shù)中也相同地成為問題。
[0004] 像這樣，很難以至今所開發(fā)的技術(shù)精密地確定用于以外科方式切除癌癥病變的手 術(shù)范圍，因而至今，在以外科方式切除癌癥病變的情況下，切除范圍只能擴(kuò)大必要以上，且 術(shù)后只能伴隨用于確認(rèn)病變是否正常切除的檢查。
[0005] 對(duì)此，本發(fā)明人確認(rèn)了如下情況后，完成了本發(fā)明。即，當(dāng)以外科方式切除癌癥病 變時(shí)，包含結(jié)合有生物組織染色用色素的大顆粒聚合白蛋白的標(biāo)記有效地吸附于癌癥的病 變，從而可以準(zhǔn)確地標(biāo)記病變的位置，并對(duì)上述色素實(shí)時(shí)進(jìn)行追蹤來(lái)準(zhǔn)確地確認(rèn)所要切除 的病變的位置。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 技術(shù)問題
[0007] 本發(fā)明的目的在于，提供包含在大顆粒聚合白蛋白（MAA，macroaggregated albumin)結(jié)合有生物組織染色用色素、放射性同位素或它們的組合的復(fù)合體的癌癥病變標(biāo) 記用組合物。
[0008] 本發(fā)明的再一目的在于，提供利用上述癌癥病變標(biāo)記用組合物來(lái)提供癌癥病變的 位置信息的方法。
[0009] 本發(fā)明的另一目的在于，提供包含上述癌癥病變標(biāo)記用組合物的癌癥病變標(biāo)記用 試劑盒。
[0010] 本發(fā)明的還一目的在于，提供包含于上述癌癥病變標(biāo)記用組合物的、在大顆粒聚 合白蛋白結(jié)合有生物組織染色用色素的復(fù)合體。
[0011] 解決問題的手段
[0012] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供包含在大顆粒聚合白蛋白（MAA，macroaggregated albumin)結(jié)合有生物組織染色用色素、放射性同位素或它們的組合的復(fù)合體的癌癥病變標(biāo) 記用組合物。此時(shí)，由上述癌癥病變標(biāo)記用組合物標(biāo)記的癌癥若包含滲透大顆粒聚合白蛋 白而可進(jìn)行固定的組織，則不受特別的限制，但優(yōu)選為在組織內(nèi)滲透上述大顆粒聚合白蛋 白而可進(jìn)行固定的實(shí)體癌，作為其例，可以為前列腺癌、乳腺癌、子宮癌、皮膚癌、宮頸癌、肺 癌、腦腫瘤、胃腸道腫瘤、肝癌、軟組織肉瘤、淋巴瘤等。
[0013] 在本說明書中，"大顆粒聚合白蛋白（MAA，macroaggregated albumin) "是指對(duì)人 血清白蛋白進(jìn)行加熱并凝固而制備的直徑為10至50 μπι的蛋白質(zhì)粒子，與直徑小于IOnm 的人血清白蛋白進(jìn)行比較可知，其結(jié)構(gòu)及物理特性不同。上述大顆粒聚合白蛋白呈現(xiàn)在靜 脈注射的情況下，停留于約8 μπι的肺毛細(xì)血管而有可能引起微栓塞的特性，因而利用上述 特性，由放射性同位素標(biāo)記的大顆粒聚合白蛋白使用于肺閃爍圖（肺栓塞、肺血栓、高安 病、肺炎及肺癌等的肺血流異?；蜃笥覀?cè)支路或肺靜脈壓亢進(jìn)的診斷）或靜脈掃描（在其 部位，中樞的靜脈血診斷）或靜脈掃描（障子病等末梢動(dòng)脈血流異常的診斷）等。本發(fā)明 的大顆粒聚合白蛋白注入于癌癥病變組織，并使用為用于將標(biāo)記物質(zhì)結(jié)合于癌癥病變組織 的介質(zhì)。本發(fā)明的大顆粒聚合白蛋白可利用重組人血清白蛋白（HSA)來(lái)合成，也可利用非 自我衍生的人血清白蛋白來(lái)合成。并且，也可購(gòu)買商業(yè)上可利用的白蛋白來(lái)使用。本發(fā)明 的大顆粒聚合白蛋白注入于癌癥病變組織，并使用為用于將標(biāo)記物質(zhì)結(jié)合于癌癥病變組織 的介質(zhì)，上述介質(zhì)使標(biāo)記物質(zhì)吸附來(lái)執(zhí)行防止上述標(biāo)記物質(zhì)向癌癥病變組織擴(kuò)散的作用。
[0014] 在本說明書中，"生物組織染色用色素"是指與生物組織相結(jié)合來(lái)標(biāo)記結(jié)合的位 置，從而可通過肉眼確認(rèn)或利用檢測(cè)用工具來(lái)確認(rèn)所標(biāo)記的位置的物質(zhì)。在本發(fā)明的目的 上，上述生物組織染色用色素可以成為能夠以結(jié)合于癌癥組織來(lái)標(biāo)記癌癥發(fā)生部位的用途 使用的標(biāo)記物質(zhì)，優(yōu)選地，可單獨(dú)或組合使用可通過肉眼確認(rèn)的色素、可在結(jié)合部位產(chǎn)生熒 光，從而利用熒光攝像機(jī)等的設(shè)備來(lái)檢測(cè)的熒光色素等，但并不特別局限于此。
[0015] 在本說明書中，"可通過肉眼確認(rèn)的色素"是指與生物組織相結(jié)合的標(biāo)記物質(zhì)呈可 見光區(qū)域的顏色，從而可通過肉眼確認(rèn)所標(biāo)記的部位的色素的一種。在本發(fā)明的目的上，可 通過肉眼確認(rèn)的上述色素在注射于發(fā)生癌癥的部位，并以外科手術(shù)的方法切除癌癥的情況 下，可明確地確認(rèn)要切除的癌癥病變，從而執(zhí)行提高癌癥手術(shù)的成功率的作用。優(yōu)選地，可 通過肉眼確認(rèn)的上述標(biāo)記物質(zhì)可單獨(dú)或混合使用中性紅、尼羅藍(lán)、俾斯麥棕、鋰卡紅、臺(tái)盼 藍(lán)、詹納斯綠、甲基紫、金胺、孔雀綠、番紅、曙紅、剛果紅、赤蘚紅、苯胺黑、阿爾新藍(lán)蘇木精、 苯胺藍(lán)、淡綠等，但只要能實(shí)現(xiàn)可確認(rèn)癌癥病變組織的目的，就并不特別局限于此。
[0016] 在本說明書中，"熒光色素"是指吸收規(guī)定波長(zhǎng)的光來(lái)形成激發(fā)狀態(tài)之后，產(chǎn)生可 使透光距離最大，并將由水分導(dǎo)致的錯(cuò)誤信號(hào)最小化的熒光的有機(jī)化合物，優(yōu)選地，可以成 為產(chǎn)生700nm至3000nm，優(yōu)選地750nm至900nm的近紅外線波長(zhǎng)的熒光的有機(jī)化合物，即， 近紅外線熒光色素?？衫脽晒鈹z像機(jī)、熒光傳感探頭（PCT/KR2011/009271)等的設(shè)備，來(lái) 將從上述近紅外線熒光色素產(chǎn)生的近紅外線波長(zhǎng)的熒光拍攝為照片形態(tài)或進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控。 本發(fā)明的近紅外線波長(zhǎng)的熒光在生物體內(nèi)的吸收比其他波長(zhǎng)帶相對(duì)更少，從而也可在生物 體外部檢測(cè)生物體內(nèi)的較深的部位中所產(chǎn)生的近紅外線。在本發(fā)明的目的上，上述近紅外 線區(qū)域熒光色素在注射于發(fā)生癌癥的部位，并以外科手術(shù)的方法切除癌癥的情況下，在切 開之前可準(zhǔn)確地確認(rèn)癌癥的病變部位，從而執(zhí)行提高癌癥手術(shù)的成功率的作用。尤其，與可 通過肉眼確認(rèn)的上述色素不同，在進(jìn)行切開并確認(rèn)直接病變之前，也可在體外檢測(cè)病變的 位置，因而可迅速且準(zhǔn)確地執(zhí)行癌癥手術(shù)。優(yōu)選地，作為上述近紅外線熒光色素可使用吲哚 菁綠等，只要是可使用于人體的近紅外線熒光色素，就可以包含于本發(fā)明的范圍。
[0017] 在大顆粒聚合白蛋白結(jié)合有上述近紅外線熒光色素的復(fù)合體具有與在已知累積 于腫瘤的其他物質(zhì)結(jié)合有近紅外線熒光色素的復(fù)合體相比，所檢測(cè)的熒光信號(hào)的穩(wěn)定性及 準(zhǔn)確性優(yōu)秀的優(yōu)點(diǎn)，因而可發(fā)現(xiàn)微小病變的比率高，且可提高病變切除準(zhǔn)確度。
[0018] 在本說明書中，"吲噪菁綠（ICG，indocyanine green) "是指在生物學(xué)或醫(yī)學(xué) 領(lǐng)域中廣泛使用的近紅外線區(qū)域的熒光影像用染料，具有注入于人體之后過1小時(shí)左 右，就分解而消失或以大小便的方式被排出的特性，從而作為可使用于人體的熒光染料 有利于臨床適用。實(shí)際上，利用吲哚菁綠來(lái)適用于人體的事例在多篇論文中曾報(bào)告過， 作為一例，據(jù)報(bào)告在18名乳腺癌患者中在臨床上安全地使用（T.Kitai，et al.，Breast Cancer, 12:211-215, 2005)。并且，使上述近紅外線熒光色素吸附并結(jié)合可通過使近紅外線 熒光色素混合于本發(fā)明的大顆粒聚合白蛋白的步驟來(lái)實(shí)現(xiàn)。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的一實(shí)施例，當(dāng)制備在大顆粒聚合白蛋白結(jié)合有吲哚菁綠的復(fù)合體 (吲哚菁綠-大顆粒聚合白蛋白）時(shí)，適合制備表示高水平