相對較高的原則，選擇8個峰作為特征峰，建立膽舒滴丸特征圖譜的對照圖 譜，與薄荷腦相應(yīng)的峰為對照峰（S); 其中，相對保留時間規(guī)定值為；峰1為0. 37,峰2為0. 73,峰3為0. 78,峰4為0. 87， 峰5為0. 90,峰6為0. 92,峰S為1. 00,峰8為1. 05; (5) 檢測時，吸取供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖，供試品特征圖譜中 呈現(xiàn)8個特征峰，分別計(jì)算各特征峰與S峰的相對保留時間，在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi)則 為合格質(zhì)量的產(chǎn)品。
[0034]實(shí)施例2 其它內(nèi)容如實(shí)施例1，其中： 氣相色譜儀中W聚己二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱（柱長為30m，內(nèi)徑為0. 53mm， 膜厚度為1ym);柱溫為程序升溫：初始溫度60°C，保持4分鐘，W每分鐘3°C的速率升溫至 200°C，保持3分鐘；進(jìn)樣口溫度230°C;檢測器溫度230°C;分流進(jìn)樣，分流比20 ;1;載氣流 量2ml/min;理論板數(shù)按薄荷腦峰計(jì)算應(yīng)不低于50000。
[00對 實(shí)施例3 其它內(nèi)容如實(shí)施例1，其中： 氣相色譜儀中W聚己二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱（柱長為30m，內(nèi)徑為0. 53mm，膜 厚度為1ym);柱溫為程序升溫：初始溫度80°C，保持4分鐘，W每分鐘3. 5°C的速率升溫至 200°C，保持2分鐘；進(jìn)樣口溫度230°C;檢測器溫度230°C;分流進(jìn)樣，分流比15 ;1 ;載氣流 量Iml/min;理論板數(shù)按薄荷腦峰計(jì)算應(yīng)不低于50000。
[003引 實(shí)施例4 其它內(nèi)容如實(shí)施例1，其中氣相色譜儀中W聚己二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱（柱長 為30m，內(nèi)徑為0. 53mm，膜厚度為1ym);柱溫為程序升溫：初始溫度100。保持5分鐘，W 每分鐘2. 5°C的速率升溫至200。保持3分鐘進(jìn)樣口溫度230°C;檢測器溫度230°C;分 流進(jìn)樣，分流比12 ;1 ;載氣流量2ml/min;理論板數(shù)按薄荷腦峰計(jì)算應(yīng)不低于50000。
[0037] 實(shí)施例5 其它內(nèi)容如實(shí)施例1，其中氣相色譜儀中W聚己二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱（柱長 為30m，內(nèi)徑為0. 53mm，膜厚度為1ym);柱溫為程序升溫：初始溫度115°C，保持5分鐘，W 每分鐘4°C的速率升溫至200°C，保持3分鐘；進(jìn)樣口溫度230°C;檢測器溫度230°C;分流 進(jìn)樣，分流比10 ;1 ;載氣流量2ml/min;理論板數(shù)按薄荷腦峰計(jì)算應(yīng)不低于50000。
[0038] 特征峰的確定： 采用按油精，（-)-薄荷酬，薄荷腦，胡薄荷酬等對照品進(jìn)行定位，結(jié)果表明；峰1為按油 精，峰2為（一)-薄荷酬，峰7為薄荷腦，峰8為胡薄荷酬。見圖1。
[003引對照圖譜的建立： 對本品9批樣品進(jìn)行特征圖譜的測定，根據(jù)相對保留時間穩(wěn)定及各批次樣品均能檢出 且峰相對較高的原則，共選擇了 8個重復(fù)性較好的峰作為特征峰。最終規(guī)定；供試品特征 圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)8個特征峰，與參照物峰相應(yīng)的峰為峰S，計(jì)算各特征峰與峰S的相對保留時 間，應(yīng)在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi)。相對保留時間規(guī)定值為；0. 37 (峰?。?，0. 73 (峰2)，0. 78 (峰 3)，0.87 (峰 4)，0.90 (峰 5)，0.92 (峰 6)，1.00 (峰S)，1.05 (峰 8)，見表 1; 表1 9批膽舒滴丸相對保留時間
采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（2012版）對9批樣品(進(jìn)行合成，建立了膽舒 滴丸特征圖譜的對照圖譜。見圖2、3。
[0040] 試驗(yàn)一：溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 操作步驟如實(shí)施例5,取已制備好的同一批供試品溶液，分別于0,4,8,12,2化測定，檢 測70min內(nèi)的色譜圖，對其中的特征峰進(jìn)行分析，其相對應(yīng)的色譜峰相對保留時間均小于 0. 3%，特征峰的相對峰面積的RSD均小于2. 0%，結(jié)果表明供試品溶液在2化內(nèi)穩(wěn)定。見表 2、3。
[0041] 表2穩(wěn)定性考察一特征峰相對保留時間
試驗(yàn)二：進(jìn)樣精密度實(shí)驗(yàn) 操作步驟如實(shí)施例5,取膽舒滴丸(批號；1312001)供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次lyl，W峰1 (按油精)、峰2 ((-)-薄荷酬)、峰8 (胡薄荷酬）作為指標(biāo)峰，計(jì)算同峰S(薄 荷腦）的相對保留時間及相對峰面積，結(jié)果相對保留時間及相對峰面積的RSD均小于2. 0%， 表明該方法進(jìn)樣精密度良好。見表4、5: 表4進(jìn)樣精密度考察一特征峰相對保留時間比值
表5進(jìn)樣精密度考察一特征峰相對峰面積比值
試驗(yàn)重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 操作步驟如實(shí)施例5,精密稱取膽舒滴丸(批號為1312001) 6份，按照擬定方法進(jìn)行制 備及測定，結(jié)果各指標(biāo)特征峰的相對保留時間及相對峰面積的RSD均小于2. 0%，表明該方 法重復(fù)性好。見表6、7。
[0042] 表6重復(fù)性考察一特征峰相對保留時間比值
試驗(yàn)四：耐用性實(shí)驗(yàn) 操作步驟如實(shí)施例5,采用兩臺儀器島津GC-14B及Agilent7890B進(jìn)行檢測，結(jié)果各特 征峰的相對保留時間均在規(guī)定范圍內(nèi)，結(jié)果表明本方法對儀器的耐用性良好，結(jié)果見表8。
[0043] 表8耐用性實(shí)驗(yàn)--特征峰相對保留時間比值
本發(fā)明中的檢測方法，在現(xiàn)有儀器條件下，簡化操作流程，用外標(biāo)法對薄荷腦等成份進(jìn) 行測定，結(jié)果外表法在最終與用傳統(tǒng)方法的內(nèi)標(biāo)法檢測在檢查結(jié)果上無差異。本發(fā)明中用 氣相色譜儀檢測膽舒滴丸質(zhì)量，為全自動進(jìn)樣，進(jìn)樣體積重現(xiàn)性很好，不用內(nèi)標(biāo)法也具有很 好的分析精密度，且操作簡單，成本低，重復(fù)性，穩(wěn)定性高。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在于：包括以下步驟： (1) 制備對照品洛液： 取桉油精對照品、（一）-薄荷酮對照品、薄荷腦、胡薄荷酮對照品，稱定，分別加乙醇制 成溶液，即得； (2) 制備供試品溶液： 取N個批次的供試品，分別稱定后置不同的量瓶中，加水和無水乙醇、過濾后取濾液， 即得； (3) 特征峰的確定： 吸取桉油精對照品溶液、（一）_薄荷酮對照品溶液、薄荷腦溶液、胡薄荷酮對照品溶 液，分別注入氣相色譜儀進(jìn)行測定，確定峰1為桉油精，峰2為（一）-薄荷酮，峰7為薄荷 腦，峰8為胡薄荷酮； (4) 對照圖譜的建立： 分別吸取供試品溶液，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評 價系統(tǒng)對各個供試品色譜圖進(jìn)行合成，根據(jù)相對保留時間穩(wěn)定及各批次樣品均能檢出且峰 相對較高的原則，選擇8個峰作為特征峰，建立膽舒滴丸特征圖譜的對照圖譜，薄荷腦的峰 為對照峰（S); 其中，相對保留時間規(guī)定值為：峰1為〇. 37,峰2為0. 73,峰3為0. 78,峰4為0. 87， 峰5為0? 90,峰6為0? 92,峰S為L 00,峰8為L 05 ; (5) 檢測時，吸取供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖，供試品特征圖譜中 呈現(xiàn)8個特征峰，分別計(jì)算各特征峰與S峰的相對保留時間，若在規(guī)定值的±5%范圍之內(nèi) 則為合格質(zhì)量的產(chǎn)品。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述氣相色譜儀中以聚乙二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱；分流進(jìn)樣，分流比10-20 : 1 ;柱溫為程序升溫，初始溫度50-115 °C，保持4-5分鐘，以每分鐘1. 5-4 °C的速率升溫至 200°C，保持2-3分鐘；進(jìn)樣口溫度230°C ;檢測器溫度230°C ;載氣流量l_2ml/min。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述超聲處理中超聲功率200W，頻率40kHz。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述毛細(xì)管柱柱長為30m，內(nèi)徑為0. 53mm，膜厚度為I ym。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述分流比為10:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述載氣流量2ml/min。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述柱溫為程序升溫：初始溫度80-115°C，保持4-5分鐘，以每分鐘3-4°C的速率升溫 至200 °C，保持3分鐘；進(jìn)樣口溫度230 °C。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述柱溫為程序升溫：初始溫度115°C，保持5分鐘，以每分鐘4°C的速率升溫至200°C， 保持3分鐘；進(jìn)樣口溫度230 °C。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征在 于：所述檢測方法中按薄荷腦峰計(jì)算，理論板塔數(shù)不低于50000。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，其特征 在于：所述N彡3。
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物質(zhì)量測定方法技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸質(zhì)量的方法，包括制備參照物溶液、制備供試品溶液、分別吸取參照物溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定相對保留時間，特征峰的確定和對照圖譜的建立，供試品特征圖譜中呈現(xiàn)8個特征峰，計(jì)算各特征峰與S峰的相對保留時間，若在規(guī)定值的±5％范圍之內(nèi)則為合格質(zhì)量的產(chǎn)品；其中氣相色譜儀中以聚乙二醇20000為固定相的毛細(xì)管柱；分流比10-20：1；柱溫初始溫度50-115℃，保持4-5分鐘，以每分鐘1.5-4℃的速率升溫至200℃，保持2-3分鐘；進(jìn)樣口溫度230℃；檢測器溫度230℃；載氣流量1-2ml/min。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN104950052
【申請?zhí)枴緾N201510395106
【發(fā)明人】周厚成, 胡昌江, 周維, 馮健, 李文兵
【申請人】四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展股份有限公司
【公開日】2015年9月30日
【申請日】2015年6月30日