r 公司）；移液槍（Tripette 公司）。
[0066](二）試樣的制備及特征物質(zhì)的測定：
[0067] (1) HS-GC-MS/MS法測定7種特征物質(zhì)
[0068] A、樣品制備：將成品卷煙A除去濾嘴，剝除接裝紙，按照《YC/T 31煙草及煙草制 品試樣的制備和水分測定烘箱法》進(jìn)行水分測定；使用分析天平稱取1. OOOg煙絲（精確至 0. lmg)于20mL頂空瓶中，加入lmL內(nèi)標(biāo)溶液，迅速壓緊瓶蓋，適當(dāng)振搖使煙絲均勻而松散的 平鋪于瓶底。
[0069] B、靜態(tài)頂空條件為：頂空瓶容量：20mL，樣品環(huán)容量：3mL，樣品平衡溫度：100°C， 樣品環(huán)溫度：120°C，傳輸線溫度：160°C，樣品平衡時間：45min，GC循環(huán)時間：42min，樣品瓶 加壓壓力：138KPa，加壓時間：0. 20min，充氣時間：0. 20min，樣品環(huán)平衡時間：0. 05min，進(jìn) 樣時間：0.50min;可以根據(jù)所選擇的程序升溫條件，適當(dāng)調(diào)整GC循環(huán)時間；
[0070] C、在GC-MS/MS測定時，采用的色譜條件具體如下：
[0071] a)色譜柱：DB-5MS彈性石英毛細(xì)管色譜柱（30mX0. 25mmX0. 25ym，美國Agilent 公司）；或其他等效色譜柱，如HP-5MS彈性石英毛細(xì)管色譜柱（30mX0. 25mmX0. 25 ym)、 Rxi'K-5SiiMS(30mX0. 25mmX0. 25 ym)等；
[0072] b)進(jìn)樣 口溫度：250°C ;
[0073]c)程序升溫條件：初始溫度80°C，保持lmin，以8°C /min的速率升溫至150°C，保 持3min;再以15°C /min的速率升溫至250°C，保持20min;可以根據(jù)樣品的具體情況，選擇 其他合適的程序升溫條件；
[0074] d)載氣：He (純度彡99. 99% ) ;Q2碰撞氣：氬氣（純度99. 999% );
[0075] e)電離方式：EI源；電離能70ev ;燈絲電流：80yA ;離子源溫度：170°C;傳輸線溫 度：250°C ;
[0076] f)掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測MRM模式，CID氣體壓力為1. 5mtorr;對每個離子的檢測 時間為150ms。
[0077] D、測定結(jié)果的計算：用HS-GC-MS/MS法測定一系列特征物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，用特征物 質(zhì)與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值作為縱坐標(biāo)，特征物質(zhì)的濃度與內(nèi)標(biāo)濃度的比值作為橫坐標(biāo)，分別 建立7種特征物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，曲線強(qiáng)制歸零。對校正數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，線性相關(guān)系 數(shù)R 2須大于0.999。
[0078] 測定樣品，根據(jù)樣品中的峰面積計算7種特征物質(zhì)的含量，計算其中某一種特征 物質(zhì)的含量：
[0079]
[0080] 其中，Q表示檢測分析得到的香味特征物質(zhì)的含量，單位為ug/g ;
[0081] Ai為試樣中香味特征物質(zhì)的峰面積，單位為U (積分單位）；
[0082] As為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積，單位為U (積分單位）；
[0083]ms為加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的量，單位為ug ;
[0084] m為稱取煙絲質(zhì)量，單位為g ;
[0085] w為待測煙絲水分含量，單位為％;
[0086]心為各特征物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率；
[0087] E、測定結(jié)果：
[0088] (1)某品牌煙絲樣品A按照所述的方法進(jìn)行樣品制備，用HS-GC-MS/MS法測定其7 種特征物質(zhì)含量。結(jié)果見表4:
[0089]表4 HS-GC-MS/MS法測定A品牌卷煙中7種特征物質(zhì)（ug/g)的結(jié)果
[0090]
[0091] (2) A品牌卷煙辛香香韻指數(shù)（SA)的計算: '
[0092] 基于上述測定結(jié)果，帶入下面的公式：
[0093]
[0094] 式中：(^為i種香味特征物質(zhì)的含量；t i種特征物質(zhì)的香氣閾值；0 i種香 味特征物質(zhì)的0AV值，即n為香味特征物質(zhì)的數(shù)目；為便于和感官評價結(jié)果比較，將各個 h 特征物質(zhì)的0AV值乘以一個系數(shù)，匕為各物質(zhì)的0AV修正系數(shù)。7種特征物質(zhì)的氣味活度 值如表5所不。
[0095] 表5 A品牌卷煙煙絲中7種特征物質(zhì)的氣味活度值（0J
[0098] A品牌卷煙辛香香韻指數(shù)（SA) = 4. 16,表明該品牌卷煙辛香香氣風(fēng)格較強(qiáng)，但并 未達(dá)到強(qiáng)烈的程度。
[0099] 實施例2 :
[0100] 重復(fù)實施例1的過程，選擇另一品牌卷煙B，用HS-GC-MS/MS法測定其7種特征物 質(zhì)含量，測定值如表6所示，7種特征物質(zhì)的氣味活度值如表7所示。
[0101] 表6 HS-GC-MS/MS法測定B品牌卷煙中7種特征物質(zhì)（ug/g)的結(jié)果
[0102]
[0103] 表7 B品牌卷煙煙絲中7種特征物質(zhì)的氣味活度值（0J
[0104]
[0106]B品牌卷煙辛香香韻指數(shù)（SB) = 3. 52。表明該品牌卷煙卷煙辛香香氣風(fēng)格較強(qiáng)， 但比A品牌卷煙辛香香氣風(fēng)格較弱。
[0107] 實施例3 :
[0108] 組織14名具有全國卷煙感官評吸資格證書的技術(shù)人員對A、B兩品牌卷煙樣品的 香氣風(fēng)格指標(biāo)（烤煙煙香、晾曬煙煙香、清香、果香、辛香、木香、青滋香、花香、藥草香等）進(jìn) 行評價，得到辛香指標(biāo)評判分值。結(jié)果如表8所示。
[0109] 表8A和B兩個品牌卷煙的辛香香韻指數(shù)和感官評價值對比
[0110]
[0111] 從表8可知，實施例1-2所得出的辛杳杳韻指數(shù)與辛杳指標(biāo)感官評價分值沒有顯 著差異，證明了本發(fā)明所提出的表征和評價卷煙香氣中辛香特征的方法的準(zhǔn)確可行性。而 且在實施過程中，可以避免常規(guī)感官評價方法的主觀性，能更客觀的對卷煙辛香香氣風(fēng)格 進(jìn)行表征和評判。
【主權(quán)項】
1. 一種準(zhǔn)確表征和評價卷煙香氣中辛香特征的方法，包括w下步驟： (1) W丫-己內(nèi)醋、肉桂酸肉桂醋、洋萊莉醒、4-乙締基愈創(chuàng)木酪、下香酪、3, 4-二氨香 豆素和異下香酪作為顯著影響卷煙辛香香氣風(fēng)格的7種特征物質(zhì)； (2) 特征物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立： ① 標(biāo)準(zhǔn)儲備液：每一種特征物質(zhì)分別準(zhǔn)確稱取10.Omg的標(biāo)準(zhǔn)品，置于同一個lOOmL容 量瓶中，用二氯甲燒溶解并稀釋定容，配制成質(zhì)量濃度為100yg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，膽存在 4°C冰箱中備用； ② 內(nèi)標(biāo)物糞溶于無水乙醇，濃度為100yg/mL; ③ 分別移?、偎脴?biāo)準(zhǔn)儲備液0. 1血、0. 5血、1血、5血、10血，分別置于5個100血容 量瓶中，分別加入1血內(nèi)標(biāo)溶液，用二氯甲燒稀釋得到濃度依次為0. 1yg/mL、0. 5yg/mL、 1yg/mL、5yg/mL、10yg/mL的化合物溶液，其中內(nèi)標(biāo)糞濃度為1yg/mU作為工作標(biāo)準(zhǔn)溶 液； ④ 分別用7個特征物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)樣品及內(nèi)標(biāo)的響應(yīng)值比值與其濃度比值進(jìn)行線性回歸， 得到每一種特征物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，曲線強(qiáng)制歸零，線性相關(guān)系數(shù)R2須大于0. 999 ; (3) 待測樣品的前處理： 曰、取待測樣品的煙絲，按照《YC/T31煙草及煙草制品試樣的制備和水分測定烘箱法》 進(jìn)行水分測定； b、稱取1.OOOg待測樣品的煙絲，置于20mL頂空瓶中，加入ImL內(nèi)標(biāo)溶液，迅速壓緊瓶 蓋，振搖使煙絲均勻而松散地平鋪于瓶底； (4) 用服-GC-MS/MS法對待測樣品進(jìn)行分析與測定，儀器分析條件如下： ① 頂空儀分析條件： 頂空瓶容量：20血，樣品環(huán)容量：3血，樣品平衡溫度：100°C，樣品環(huán)溫度：120°C，傳輸 線溫度：160°C，樣品平衡時間：45min，GC循環(huán)時間：42min，樣品瓶加壓壓力：138KPa，加壓 時間：〇. 20min，充氣時間：0. 20min，樣品環(huán)平衡時間：0. 05min，進(jìn)樣時間：0. 50min; ② 色譜分析條件： DB-5MS毛細(xì)管柱；進(jìn)樣口溫度：250°C;恒流模式，柱流量1血/min;分流比：20:1 ;升溫 程序：初始溫度80°C，保持Imin，W8°C/min的速率升溫至150°C，保持3min;再W15°C/ min的速率升溫至250°C，保持20min; ③ 質(zhì)譜分析條件： EI電離模式，電離能70ev;燈絲電流：80iiA;離子源溫度：170°C;傳輸線溫度：250°C;Q2碰撞氣：氣氣純度99. 999%，CID氣體壓力為1. 5mtorr;掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測MRM模式， 對每個離子的檢測時間為150ms; 有關(guān)定性離子對、定量離子對W及優(yōu)化后的碰撞能量CE值如表1所示： 表1 :(5)讀取待測樣品各特征物質(zhì)的響應(yīng)值，用步驟（2)所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線對待測樣品中 各特征物質(zhì)初始數(shù)據(jù)進(jìn)行校正，即得到待測樣品中某一種特征物質(zhì)的含量其中，Ci表示待測樣品中某一種特征物質(zhì)的含量，單位為ug/g; Ai為待測樣品中某一種特征物質(zhì)的峰面積，單位為U(積分單位）； A.為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積，單位為U(積分單位）；m,為加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的量，單位為ug; m為稱取煙絲質(zhì)量，單位為g; W為待測煙絲水分含量，單位為％ ; Ki為各特征物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率； (6) 卷煙辛香香韻指數(shù)S的計算： 7種特征物質(zhì)對卷煙煙氣辛香均有貢獻(xiàn)，通過氣味活度值OAV來評價某一特征物質(zhì)對 卷煙辛香的貢獻(xiàn)程度，卷煙辛香香韻指數(shù)是7種特征物質(zhì)氣味活度值的加和： 卷煙辛香香韻指i) 式中：Ci為待測樣品中i種特征物質(zhì)的含量；11為i種特征物質(zhì)的香氣闊值；0 1為i種 特征物質(zhì)的〇4￥值，即^ 5n為特征物質(zhì)的數(shù)目；因香味闊值很低，為便于和感官評價結(jié)果比 較，將各個特征物質(zhì)的OAV值乘W-個系數(shù)，為各個特征物質(zhì)的修正系數(shù)，具體如表2所 示； 表2(7) 卷煙辛香香氣風(fēng)格特征評判： 按照表3的評分標(biāo)準(zhǔn)對卷煙辛香香氣風(fēng)格進(jìn)行評判； 表3卷煙辛香香氣風(fēng)格評判標(biāo)準(zhǔn)卷煙香氣中的辛香特征與卷煙辛香香韻指數(shù)S呈正相關(guān)關(guān)系，即卷煙辛香香韻指數(shù)S值越高，則表明該卷煙的辛香香氣風(fēng)格越顯著。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種準(zhǔn)確表征和評價卷煙香氣中辛香特征的方法。通過HS-GC-MS/MS檢測方法來獲取致香物質(zhì)定量數(shù)據(jù)，并通過相應(yīng)致香物質(zhì)的閾值來計算并構(gòu)建得到卷煙辛香香韻指數(shù)S。本發(fā)明操作簡便、不易受雜質(zhì)干擾、檢測結(jié)果準(zhǔn)確。GC-MS/MS的選擇性和靈敏度比GC-MS高，避免了GC-MS靈敏度低、分辨率不足、選擇性差、易產(chǎn)生假陽性結(jié)果、且不能給出足夠的定性/定量信息等問題。本發(fā)明從物質(zhì)基礎(chǔ)的角度對卷煙辛香特征進(jìn)行了相應(yīng)描述和表達(dá)，避免了感官評吸的主觀性，客觀綜合表征及評價卷煙產(chǎn)品的辛香香氣風(fēng)格。
【IPC分類】G01N30/88
【公開號】CN105004827
【申請?zhí)枴緾N201510404205
【發(fā)明人】李超, 張承明, 吳億勤, 許 永, 鄒楠, 蔣薇, 蔣茨清, 秦云華, 楊光宇, 繆明明, 陳章玉, 張建華, 李勁竹, 魯媛
【申請人】云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年7月10日