利用雙波長分光光度法測定耗制品中鋅含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測食品耗制品中鋅含量的方法，特別是涉及一種利用雙波長分 光光度法測定耗制品中鋅含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 鋅是人體內(nèi)80多種酶的組成成分，與300多種酶的活性有關(guān)，影響很多生理功能 的發(fā)揮，因此食用適量含鋅食物非常重要。耗制品中富含鋅元素，經(jīng)常食用耗制品對人體非 常有益。但過度攝入鋅，會對人體帶來危害，因此檢測耗制品中鋅含量非常有實(shí)際意義。目 前檢測鋅含量的方法有原子吸收法、原子發(fā)射法、質(zhì)譜法、伏安法、分光光度法。由于分光光 度法的分析結(jié)果具備精密度高、準(zhǔn)確度高且分析成本低、速度快的特點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用。 目前在各種方法中，檢測耗制品中鋅含量的方法很少，尤其采用雙波長分光光度法檢測耗 制品中鋅含量的方法未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種利用雙波長分光光度法測定耗制品中鋅含量的方法， 該方法實(shí)現(xiàn)操作簡單、結(jié)果準(zhǔn)確、分析速度快、測定靈敏度高、分析成本低、所用藥品無毒且 常見。
[0004] 本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 一種雙波長分光光度法測定耗制品中鋅含量的方法，如下：在25毫升比色管中加入3 毫升濃度為〇. 4克/升的二甲酚橙溶液、6毫升pH值為5. 9的HAc-NaAc緩沖溶液、1毫 升濃度為3%酒石酸鈉溶液、5. 00毫升的樣品溶液。用去離子水定容至25毫升并搖勻，室 溫放置5分鐘。用1厘米比色皿，以試劑空白為參比，分別測定波長為434納米、573納米 處吸光度A434、A573，再計算AA=A573-A434。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線，查出被測試液中鋅的含量（微克/ 毫升），計算樣品中鋅含量。
[0005] 所述的0. 4克/升的二甲酚橙溶液是稱0. 2克二甲酚橙溶于500毫升去離子水中 制得。
[0006] 所述的pH值為5. 9的HAc-NaAc緩沖溶液是稱取82克無水NaAc于250毫升 燒杯中，加200毫升去離子水溶解，加入4. 1毫升冰醋酸，再加去離子水至500毫升，攪勻 后，經(jīng)pH計校正到pH值為5. 9制得。
[0007] 所述的3%酒石酸鈉溶液是將6克酒石酸鈉溶于100毫升去離子水中，再用去離子 水稀釋到200毫升制得。
[0008] 所述的樣品溶液可以是兩種溶液。其中一種是：準(zhǔn)確稱取經(jīng)粉碎的干牡蠣0. 5克， 置于瓷坩堝中，在可調(diào)電爐上炭化至不冒煙。移入馬弗爐中，在500°C灰化5小時，至呈白色 為止。從馬弗爐中取出瓷坩堝，冷卻至室溫后，加入10毫升鹽酸（1:1)，置于電爐上微沸至 溶液近干，再加入15毫升去離子水后完全移入250毫升容量瓶中，用去離子水定容，得到樣 品溶液。另一種是：準(zhǔn)確稱取5克蠔油，置于瓷坩堝中，在可調(diào)電爐上炭化至不冒煙。移入 馬弗爐中，在700°C灰化4~6小時，至呈白色為止。從馬弗爐中取出瓷坩堝，冷卻至室溫后， 加入5毫升鹽酸（1:1)，置于電爐上微沸至溶液近干，再加入15毫升去離子水后完全移入 250mL容量瓶中，用去離子水定容，得到樣品溶液。 所述的標(biāo)準(zhǔn)曲線是：在8只25毫升的比色管中，均加入3毫升濃度為0. 4克/升的二 甲酸橙溶液、6毫升pH值為5. 9的HAc-NaAc緩沖溶液、1毫升濃度為3%酒石酸鈉溶液； 在上述8只25毫升的比色管中，再分別加入0. 00毫升、0. 50毫升、1. 00毫升、1. 50毫升、 2. 00毫升、2. 50毫升、3. 00毫升、3. 25毫升濃度為10微克/毫升的Zn2+標(biāo)準(zhǔn)工作液，用去 離子水定容至25毫升并搖勻，室溫放置5分鐘。用1厘米比色皿，以試劑空白為參比，分別 測定各溶液在波長為434納米、573納米處吸光度A434、A573，再計算AA=A573-A434。以各溶液 鋅含量（微克/毫升）為橫坐標(biāo)，AA為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0009] 所述的10微克/毫升的Zn2+標(biāo)準(zhǔn)工作液是準(zhǔn)確稱取0. 4398克含量大于99. 5%的 ZnS04*7H20于50毫升燒杯中，用20毫升去離子水溶解并定容至100毫升容量瓶中配制成 1. 〇毫克/毫升Zn2 +標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（冰箱4°C保存），使用時取1. 00毫升1. 0毫克/毫升 的Zn2 +標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，定容于100毫升容量瓶中得到10微克/毫升的Zn2+標(biāo)準(zhǔn)工作液。
[0010] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)與效果是： 通過測定原理可以看出：本發(fā)明方法采用以二甲酚橙為顯色劑、采用雙波長分光光度 法測定鋅的含量，達(dá)到了有效提高測定鋅含量的靈敏度目的且操作簡單，測定中使用的儀 器及試劑均常用且無污染，可以滿足普通實(shí)驗(yàn)室的分析測試需要。
【附圖說明】
[0011] 圖1為干牡蠣中微量鋅含量的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0013] 實(shí)施例1 干牡蠣中微量鋅含量的測定 分別準(zhǔn)確稱取三種經(jīng)粉碎的干牡蠣〇. 5克，每種稱取6份，置于瓷坩堝中，在可調(diào)電爐 上炭化至不冒煙。移入馬弗爐中，在500°C灰化5小時，至呈白色為止。從馬弗爐中取出瓷 坩堝，冷卻至室溫后，加入10毫升鹽酸（1:1)，置于電爐上微沸至溶液近干，再加入15毫升 去離子水后完全移入250毫升容量瓶中，用去離子水定容，得到樣品溶液。
[0014] 在8只25毫升的比色管中，均加入3毫升濃度為0. 4克/升的二甲酚橙溶液、6 毫升pH值為5. 9的HAc-NaAc緩沖溶液、1毫升濃度為3%酒石酸鈉溶液；在上述8只25 毫升的比色管中，再分別加入〇? 〇〇毫升、〇? 50毫升、1. 00毫升、1. 50毫升、2. 00毫升、2. 50 毫升、3. 00毫升、3. 25毫升濃度為10微克/毫升的Zn2+標(biāo)準(zhǔn)工作液，用去尚子水定容至 25毫升并搖勻，室溫放置5分鐘。用1厘米比色皿，以試劑空白為參比，分別測定各溶液在 波長為434納米、573納米處吸光度A434、A573，再計算AA=A573-A434。以各溶液鋅含量（微 克/毫升）為橫坐標(biāo)，AA為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。對測定數(shù)據(jù)做回歸分析，回歸方程為： AA=0. 8439PZn2+ (微克/毫升）+0. 0054,相關(guān)系數(shù)R2=0. 9996，線性范圍為0~1. 3微克/毫 升的Zn2+，結(jié)果見表1、圖1。
[0015] 表1測定標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)
在25毫升比色管中加入3毫升濃度為0. 4克/升的二甲酚橙溶液、6毫升pH值為5. 9 的HAc-NaAc緩沖溶液、1毫升濃度為3%酒石酸鈉溶液、5. 00毫升的樣品溶液。用去離子 水定容至25毫升并搖勻，室溫放置5分鐘。用1厘米比色皿，以試劑空白為參比，分別測定 波長為434納米、573納米處吸光度A434、A573，再計算AA=A573-A434。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線，查出被 測試液中鋅的含量（微克/毫升），計算樣品中鋅含量及RSD，結(jié)果見表2。
[0016] 在25毫升比色管中加入3毫升濃度為0. 4克/升的二甲酚橙溶液、6毫升pH值 為5. 9的HAc-NaAc緩沖溶液、1毫升濃度為3%酒石酸鈉溶液、5. 00毫升的樣品溶液及 0.50毫升濃度為10微克/毫升的Zn2+標(biāo)準(zhǔn)工作液。用去離子水定容至25毫升并搖勻，室 溫放置5分鐘。用1厘米比色皿，以試劑空白為參比，分別測定波長為434納米、573納米