(SCION 456GC-TQ，Bruker 公司）；移液槍（Tripette 公司）。
[0065](二）試樣的制備及特征物質(zhì)的測定：
[0066] (I) HS-GC-MS/MS法測定8種特征物質(zhì)
[0067] A、樣品制備：將成品卷煙A除去濾嘴，剝除接裝紙，按照《YC/T 31煙草及煙草制 品試樣的制備和水分測定烘箱法》進行水分測定；使用分析天平稱取1.0 OOg煙絲（精確至 0.1 mg)于20mL頂空瓶中，加入ImL內(nèi)標溶液，迅速壓緊瓶蓋，適當振搖使煙絲均勻而松散的 平鋪于瓶底。
[0068] B、靜態(tài)頂空條件為：頂空瓶容量：20mL，樣品環(huán)容量：3mL，樣品平衡溫度：100°C， 樣品環(huán)溫度：120°C，傳輸線溫度：160°C，樣品平衡時間：45min，GC循環(huán)時間：42min，樣品瓶 加壓壓力：138KPa，加壓時間：0. 20min，充氣時間：0. 20min，樣品環(huán)平衡時間：0. 05min，進 樣時間：0.50min;可以根據(jù)所選擇的程序升溫條件，適當調(diào)整GC循環(huán)時間；
[0069] C、在GC-MS/MS測定時，采用的色譜條件具體如下：
[0070] a)色譜柱：DB-5MS彈性石英毛細管色譜柱（30mX0. 25mmX0. 25 μπι，美國Agilent 公司）；或其他等效色譜柱，如HP-5MS彈性石英毛細管色譜柱（30mX0. 25mmX0. 25 μπι)、 Rxi'-5Si I MS (30mX 0.25mmX 0.25 μ m)等；
[0071] b)進樣口溫度：250°C ;
[0072] c)程序升溫條件：初始溫度80°C，保持lmin，，以8°C /min的速率升溫至150°C， 保持3min，；再以15°C/min的速率升溫至250°C，保持20min，；可以根據(jù)樣品的具體情況， 選擇其他合適的程序升溫條件；
[0073] d)載氣：He (純度彡99. 99% ) ;Q2碰撞氣：氬氣（純度99. 999% );
[0074] e)電離方式：EI源；電離能70ev ;燈絲電流：80μΑ ;離子源溫度：170°C;傳輸線溫 度：250°C ;
[0075] f)掃描方式：多反應監(jiān)測MRM模式，CID氣體壓力為I. 5mtorr ;對每個離子的檢測 時間為150ms。
[0076] D、測定結果的計算：用HS-GC-MS/MS法測定一系列特征物質(zhì)標準溶液，用特征物 質(zhì)與內(nèi)標峰面積的比值作為縱坐標，特征物質(zhì)的濃度與內(nèi)標濃度的比值作為橫坐標，分別 建立8種特征物質(zhì)的標準工作曲線，曲線強制歸零。對校正數(shù)據(jù)進行線性回歸，線性相關系 數(shù)R 2須大于0.999。
[0077] 測定樣品，根據(jù)樣品中的峰面積計算8種特征物質(zhì)的含量，計算其中某一種特征 物質(zhì)的含量：
[0079] 其中，C1表示檢測分析得到的香味特征物質(zhì)的含量，單位為ug/g ;
[0080] A1為試樣中香味特征物質(zhì)的峰面積，單位為U (積分單位）；
[0081 ] As為內(nèi)標物質(zhì)的峰面積，單位為U (積分單位）；
[0082] ms為加入內(nèi)標物質(zhì)的量，單位為Ug ;
[0083] m為稱取煙絲質(zhì)量，單位為g ;
[0084] w為待測煙絲水分含量，單位為％ ;
[0085] 心為各特征物質(zhì)的標準工作曲線斜率；
[0086] E、測定結果：
[0087] (1)某品牌煙絲樣品A按照所述的方法進行樣品制備，用HS-GC-MS/MS法測定其8 種特征物質(zhì)含量。結果見表4:
[0088] 表4 HS-GC-MS/MS法測定A品牌卷煙中8種特征物質(zhì)（ug/g)的結果
[0089]

[0090] (2) A品牌卷煙烘焙香香韻指數(shù)（Ra)的計算：
[0091] 基于上述測定結果，帶入下面的公式：
[0092]
[0093] 式中：(^為i種香味特征物質(zhì)的含量；t i種特征物質(zhì)的香氣閾值；0 i種香 味特征物質(zhì)的OAV值，即η為香味特征物質(zhì)的數(shù)目；為便于和感官評價結果比較，將各 個特征物質(zhì)的OAV值乘以一個系數(shù)，A為各物質(zhì)的
[0094] OAV修正系數(shù)。8種特征物質(zhì)的氣味活度值如表5所示。
[0095] 表5 A品牌卷煙煙絲中8種特征物質(zhì)的氣味活度值（O1.)
[0097] A品牌卷煙烘焙香香韻指數(shù)（Ra) = 3. 16,表明該品牌卷煙烘焙香香氣風格較強。
[0098] 實施例2 :
[0099] 重復實施例1的過程，選擇另一品牌卷煙Β，用HS-GC-MS/MS法測定其8種特征物 質(zhì)含量，測定值如表6所示，8種特征物質(zhì)的氣味活度值如表7所示。
[0100] 表6 HS-GC-MS/MS法測定B品牌卷煙中8種特征物質(zhì)（ug/g)的結果
[0101]

[0105] B品牌卷煙烘焙香香韻指數(shù)（Rb) = 2. 19。表明該品牌卷煙具有烘焙香香氣風格， 但未達到較強的程度，相比A品牌卷煙，該品牌卷煙烘焙香香氣風格較弱。
[0106] 實施例3 :
[0107] 組織14名具有全國卷煙感官評吸資格證書的技術人員對A、B兩品牌卷煙樣品的 香氣風格指標（烤煙煙香、晾曬煙煙香、清香、果香、辛香、木香、青滋香、花香、藥草香等）進 行評價，得到烘焙香指標評判分值。結果如表8所示。
[0108] 表8 A和B兩個品牌卷煙的烘焙香香韻指數(shù)和感官評價值對比

[0111] 從表8可知，實施例1-2所得出的烘焙香香韻指數(shù)與烘焙香指標感官評價分值沒 有顯著差異，證明了本發(fā)明所提出的表征和評價卷煙香氣中烘焙香特征的方法的準確可行 性。而且在實施過程中，可以避免常規(guī)感官評價方法的主觀性，能更客觀的對卷煙烘焙香香 氣風格進行表征和評判。
【主權項】
1. 一種準確表征和評價卷煙香氣中烘焙香特征的方法，包括以下步驟： (1) 以2-乙?；秽?、2-乙?；拎ぁ?-乙?；谅?、2, 3-二甲基吡嗪、面包酮、呋喃 酮、2-甲基吡嗪和4-乙烯基愈創(chuàng)木酚作為顯著影響卷煙烘焙香香氣風格的8種特征物質(zhì)； (2) 特征物質(zhì)標準工作曲線的建立： ① 標準儲備液：每一種特征物質(zhì)分別準確稱取10.Omg的標準品，置于同一個IOOmL容 量瓶中，用二氯甲烷溶解并稀釋定容，配制成質(zhì)量濃度為100yg/mL的標準儲備液，貯存在 4 °C冰箱中備用； ② 內(nèi)標物萘溶于無水乙醇，濃度為100yg/mL; ③ 分別移?、偎脴藴蕛湟憨?lmL、0. 5mL、lmL、5mL、10mL，分別置于5個IOOmL容 量瓶中，分別加入ImL內(nèi)標溶液，用二氯甲烷稀釋得到濃度依次為0.Iyg/mL、0. 5yg/mL、 Iyg/mL、5yg/mL、10yg/mL的化合物溶液，其中內(nèi)標萘濃度為Iyg/mL，作為工作標準溶 液； ④ 分別用8個特征物質(zhì)的標準樣品及內(nèi)標的響應值比值與其濃度比值進行線性回歸， 得到每一種特征物質(zhì)的標準工作曲線，曲線強制歸零，線性相關系數(shù)R2須大于0. 999 ; (3) 待測樣品的前處理： a、 取待測樣品的煙絲，按照《YC/T31煙草及煙草制品試樣的制備和水分測定烘箱法》 進行水分測定； b、 稱取I.OOOg待測樣品的煙絲，置于20mL頂空瓶中，加入ImL內(nèi)標溶液，迅速壓緊瓶 蓋，振搖使煙絲均勻而松散地平鋪于瓶底； (4) 用HS-GC-MS/MS法對待測樣品進行分析與測定，儀器分析條件如下： ① 頂空儀分析條件： 頂空瓶容量：20mL，樣品環(huán)容量：3mL，樣品平衡溫度：100°C，樣品環(huán)溫度：120°C，傳輸 線溫度：160°C，樣品平衡時間：45min，GC循環(huán)時間：42min，樣品瓶加壓壓力：138KPa，加壓 時間：0. 20min，充氣時間：0. 20min，樣品環(huán)平衡時間：0. 05min，進樣時間：0. 50min; ② 色譜分析條件： DB-5MS毛細管柱；進樣口溫度：250°C;恒流模式，柱流量lmL/min;分流比：20:1 ;升溫 程序：初始溫度80°C，保持lmin，以8°C/min的速率升溫至150°C，保持3min;再以15°C/ min的速率升溫至250°C，保持20min; ③ 質(zhì)譜分析條件： EI電離模式，電離能70ev;燈絲電流：80yA;離子源溫度：170°C;傳輸線溫度：250°C;Q2碰撞氣：氬氣純度99. 999%，CID氣體壓力為I. 5mtorr;掃描方式：多反應監(jiān)測MRM模式， 對每個離子的檢測時間為150ms; 有關定性離子對、定量離子對以及優(yōu)化后的碰撞能量（CE)值如表1所示： 表1 :(5)讀取待測樣品各特征物質(zhì)的響應值，用步驟（2)所建立的標準曲線對待測樣品中 各特征物質(zhì)初始數(shù)據(jù)進行校正，即得到待測樣品中某一種特征物質(zhì)的含量C1:其中，C1表示待測樣品中某一種特征物質(zhì)的含量，單位為ug/g; A1為待測樣品中某一種特征物質(zhì)的峰面積，單位為U(積分單位）； As為內(nèi)標物質(zhì)的峰面積，單位為U(積分單位）； ms為加入內(nèi)標物質(zhì)的量，單位為ug;m為稱取煙絲質(zhì)量，單位為g; w為待測煙絲水分含量，單位為％ ; 1為各特征物質(zhì)的標準工作曲線斜率； (6) 卷煙烘焙香香韻指數(shù)R的計算： 8種特征物質(zhì)對卷煙煙氣烘焙香均有貢獻，通過氣味活度值OAV來評價某一特征物質(zhì) 對卷煙烘焙香的貢獻程度，卷煙烘焙香香韻指數(shù)是8種特征物質(zhì)氣味活度值的加和：式中：C1為待測樣品中i種特征物質(zhì)的含量；ti種特征物質(zhì)的香氣閾值；0i種比較，將各個特征物質(zhì)的OAV值乘以一個系數(shù)，匕為各個特征物質(zhì)的修正系數(shù)，具體如表2 所示；(7) 卷煙烘焙香香氣風格特征評判： 按照表3的評分標準對卷煙香氣進行評判； 表3卷煙烘焙香香氣風格評判標準卷煙香氣中的烘焙香特征與卷煙烘焙香香韻指數(shù)R呈正相關關系，即卷煙烘焙香香韻 指數(shù)R值越高，則表明該卷煙的烘焙香香氣風格越顯著。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種準確表征和評價卷煙香氣中烘焙香特征的方法。通過HS-GC-MS/MS檢測方法來獲取致香物質(zhì)定量數(shù)據(jù)，并通過相應致香物質(zhì)的閾值來計算并構建得到卷煙烘焙香香韻指數(shù)R。本發(fā)明操作簡便、不易受雜質(zhì)干擾、檢測結果準確。GC-MS/MS的選擇性和靈敏度比GC-MS高，避免了GC-MS靈敏度低、分辨率不足、選擇性差、易產(chǎn)生假陽性結果、且不能給出足夠的定性/定量信息等問題。本發(fā)明從物質(zhì)基礎的角度對卷煙烘焙香特征進行了相應描述和表達，避免了感官評吸的主觀性，客觀綜合表征及評價卷煙產(chǎn)品的烘焙香香氣風格。
【IPC分類】G01N30/88
【公開號】CN105044264
【申請?zhí)枴緾N201510404876
【發(fā)明人】陳章玉, 張承明, 吳億勤, 許 永, 李超, 鄒楠, 蔣薇, 蔣茨清, 楊光宇, 秦云華, 繆明明, 張建華, 李勁竹, 魯媛
【申請人】云南中煙工業(yè)有限責任公司
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年7月10日