在層析膜的另一端貼上吸水墊，各個(gè)墊和膜之間 相互之間重疊 2mm，試紙條組裝完成。
[0077] (2)用自動(dòng)切膜機(jī)將完成組裝的試紙條進(jìn)行切割，寬度約為4_，并將其裝入塑料 板中，最后將做好的試紙條與干燥劑一起裝入鋁箱袋內(nèi)密封儲(chǔ)存。
[0078] 4.樣品的測試和結(jié)果判讀
[0079] (1)定性檢測：用于激發(fā)量子點(diǎn)的紫外燈波長范圍為320nm~420nm的普通紫外 燈即可；根據(jù)雙抗夾心的原理，當(dāng)待測樣本中含有前列腺特異性抗原時(shí)，復(fù)合物將同時(shí)被T 線和C線捕獲，紫外燈照射下出現(xiàn)兩條熒光條帶，檢測結(jié)果為陽性；反之，檢測樣本中不含 前列腺特異性抗原時(shí)，則只在C線位置出現(xiàn)熒光條帶，檢測結(jié)果為陰性；如果T線和C線都 不出熒光現(xiàn)條帶則說明檢測無效。
[0080] (2)定量檢測：通過一系列濃度梯度的前列腺特異性抗原標(biāo)準(zhǔn)液滴加到免疫層析 試紙條上，20分鐘后用檢測儀讀取T線和C線的熒光強(qiáng)度數(shù)值，并建立Log (T/C)與前列腺 特意性抗原濃度的相對應(yīng)關(guān)聯(lián)公式，將待測樣本檢測獲得的T線與C線數(shù)值通過公式，計(jì)算 出其前列腺特異性抗原的濃度。數(shù)據(jù)如下，擬合曲線（圖6):
[0081]
[0082] 實(shí)施例3:
[0083] 1.量子點(diǎn)偶聯(lián)前列腺特異性抗體
[0084] (1)將水溶性量子點(diǎn)、1-(3-二甲氨基丙基）-3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽（EDC)水溶 液按照原料質(zhì)量比為1:10000比例混合于磷酸緩沖液（PBS緩沖液）中，渦旋儀上低速旋轉(zhuǎn) 使其混勻，然后將上述混合溶液置于旋轉(zhuǎn)混合架上，室溫下反應(yīng)30分鐘；
[0085] (2)反應(yīng)結(jié)束后，采用離心分離進(jìn)行純化，用PBS緩沖液至少清洗三次以除去未反 應(yīng)的1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（EDC)，得到活化的水溶性量子點(diǎn)；
[0086] (3)將活化的水溶性量子點(diǎn)與α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體（ab63590)按 照摩爾比為1:40比例混合于磷酸緩沖液（PBS緩沖液）中，渦旋儀上低速旋轉(zhuǎn)使其混勻，將 上述混合溶液置于旋轉(zhuǎn)混合架上，室溫下反應(yīng)4小時(shí)；
[0087] (4)反應(yīng)結(jié)束后，采用離心分離進(jìn)行純化，用PBS緩沖液至少清洗三次以除去未反 應(yīng)的抗體，最后將產(chǎn)物分散在含有5%牛血清白蛋白（BSA)的PBS緩沖液中，4°C靜置過夜或 恒溫培養(yǎng)37度1小時(shí)后，獲得封閉后的水溶性量子點(diǎn)-α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗 體混合液，置于4°C保存。
[0088] 2.層析膜、樣品墊以及結(jié)合物釋放墊的預(yù)處理
[0089] (1)將β -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體（此處所指的β -前列腺癌抗原特異 性單克隆抗體與本文提到的α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體，為針對前列腺癌抗原上 不同結(jié)合位點(diǎn)的兩種不同的特異性單克隆抗體）以及羊抗鼠二抗（與α-前列腺癌抗原特 異性單克隆抗體特異性結(jié)合的抗體）用PBS緩沖液稀釋到2mg/mL，用點(diǎn)樣儀噴于硝酸纖維 素膜上以形成T線和C線，然后置于37°C恒溫干燥箱中至完全干燥，獲得預(yù)處理后的層析 膜。
[0090] (2)將聚酯纖維浸入含2%的聚乙烯吡咯烷酮（PVP-55000)的Tris-HCl緩沖液中 靜置10分鐘，然后放入37°C恒溫干燥箱中至完全干燥，獲得預(yù)處理的樣品墊，封袋置于4°C 保存?zhèn)溆谩?br>[0091] (3)將聚酯纖維浸入含5%的牛血清白蛋白（BSA)、5%的聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、 5%的蔗糖的PBS緩沖液中，靜置至聚酯纖維充分吸收含5%的牛血清白蛋白（BSA)、5%的 聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、5%的蔗糖的PBS緩沖液，然后置于37°C恒溫干燥箱中至完全干燥， 獲得預(yù)處理的結(jié)合物釋放墊，封袋置于4°C保存?zhèn)溆谩?br>[0092] (4)用含 5%的 BSA、5%的 PEG-4000、2%的 Tween-20、5%的蔗糖的 PBS 緩沖液作 為稀釋液，對封閉后的水溶性量子點(diǎn)-α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體混合液進(jìn)行稀 釋，稀釋倍數(shù)為10倍，并將稀釋后的溶液均勻滴加在預(yù)處理后的結(jié)合物釋放墊上，靜置至 預(yù)處理后的結(jié)合物釋放墊充分吸收該溶液，并隨后于37°C恒溫干燥箱中至完全干燥，得到 終處理的結(jié)合墊，封袋置于4°C保存?zhèn)溆谩?br>[0093] 3.試紙條的組裝
[0094] (1)所得預(yù)處理的層析膜固定于單面塑膠板上，所得預(yù)處理的樣品墊及終處理的 結(jié)合物釋放墊按順序貼在層析膜上，最后在層析膜的另一端貼上吸水墊，各個(gè)墊和膜之間 相互之間重疊 2mm，試紙條組裝完成。
[0095] (2)用自動(dòng)切膜機(jī)將完成組裝的試紙條進(jìn)行切割，寬度約為4_，并將其裝入塑料 板中，最后將做好的試紙條與干燥劑一起裝入鋁箱袋內(nèi)密封儲(chǔ)存。
[0096] 4.樣品的測試和結(jié)果判讀
[0097] (1)定性檢測：用于激發(fā)量子點(diǎn)的紫外燈波長范圍為320nm~420nm的普通紫外 燈即可；根據(jù)雙抗夾心的原理，當(dāng)待測樣本中含有前列腺特異性抗原時(shí)，復(fù)合物將同時(shí)被T 線和C線捕獲，紫外燈照射下出現(xiàn)兩條熒光條帶，檢測結(jié)果為陽性；反之，檢測樣本中不含 前列腺特異性抗原時(shí)，則只在C線位置出現(xiàn)熒光條帶，檢測結(jié)果為陰性；如果T線和C線都 不出熒光現(xiàn)條帶則說明檢測無效。
[0098] (2)定量檢測：通過一系列濃度梯度的前列腺特異性抗原標(biāo)準(zhǔn)液滴加到免疫層析 試紙條上，20分鐘后用檢測儀讀取T線和C線的熒光強(qiáng)度數(shù)值，并建立Log (T/C)與前列腺 特意性抗原濃度的相對應(yīng)關(guān)聯(lián)公式，將待測樣本檢測獲得的T線與C線數(shù)值通過公式，計(jì)算 出其前列腺特異性抗原的濃度。數(shù)據(jù)如下，擬合曲線（圖7):
[0099]
[0100] 實(shí)施例4:
[0101] 1.量子點(diǎn)偶聯(lián)前列腺特異性抗體
[0102] (1)將水溶性量子點(diǎn)、1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（EDC)水溶 液按照原料質(zhì)量比為1:8000比例混合于磷酸緩沖液（PBS緩沖液）中，渦旋儀上低速旋轉(zhuǎn) 使其混勻，然后將上述混合溶液置于旋轉(zhuǎn)混合架上，室溫下反應(yīng)30分鐘；
[0103] (2)反應(yīng)結(jié)束后，采用離心分離進(jìn)行純化，用PBS緩沖液至少清洗三次以除去未反 應(yīng)的1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（EDC)，得到活化的水溶性量子點(diǎn)；
[0104] (3)將活化的水溶性量子點(diǎn)與α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體（ab0187)按照 摩爾比為1:25比例混合于磷酸緩沖液（PBS緩沖液）中，渦旋儀上低速旋轉(zhuǎn)使其混勻，將上 述混合溶液置于旋轉(zhuǎn)混合架上，室溫下反應(yīng)2-4小時(shí)；
[0105] (4)反應(yīng)結(jié)束后，采用離心分離進(jìn)行純化，用PBS緩沖液至少清洗三次以除去未反 應(yīng)的抗體，最后將產(chǎn)物分散在含有5%牛血清白蛋白（BSA)的PBS緩沖液中，4°C靜置過夜或 恒溫培養(yǎng)37度1小時(shí)后，獲得封閉后的水溶性量子點(diǎn)-α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗 體混合液，置于4°C保存。
[0106] 2.層析膜、樣品墊以及結(jié)合物釋放墊的預(yù)處理
[0107] (1)將β -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體（此處所指的β -前列腺癌抗原特異 性單克隆抗體與本文提到的α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體，為針對前列腺癌抗原上 不同結(jié)合位點(diǎn)的兩種不同的特異性單克隆抗體）以及羊抗鼠二抗（與α-前列腺癌抗原特 異性單克隆抗體特異性結(jié)合的抗體）用PBS緩沖液稀釋到2mg/mL，用點(diǎn)樣儀噴于硝酸纖維 素膜上以形成T線和C線，然后置于37°C恒溫干燥箱中至完全干燥，獲得預(yù)處理后的層析 膜。
[0108] (2)將聚酯纖維浸入含2%的聚乙烯吡咯烷酮（PVP-10000)的Tris-HCl緩沖液中 靜置10分鐘，然后放入37°C恒溫干燥箱中至完全干燥，獲得預(yù)處理的樣品墊，封袋置于4°C 保存?zhèn)溆谩?br>[0109] (3)將聚酯纖維浸入含5%的牛血清白蛋白（BSA)、5%的聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、 5%的蔗糖的PBS緩沖液中，靜置至聚酯纖維充分吸收含5%的牛血清白蛋白（BSA)、5%的 聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、5%的蔗糖的PBS緩沖液，然后置于37°C恒溫干燥箱中至完全干燥， 獲得預(yù)處理的結(jié)合物釋放墊，封袋置于4°C保存?zhèn)溆谩?br>[0110] (4)用 5%的 BSA、5%的 PEG-4000、2%的 Tween-20、5%的蔗糖的 PBS 緩沖液作為 稀釋液，對封閉后的水溶性量子點(diǎn)-α -前列腺癌抗原特異性單克隆抗體混合液進(jìn)行稀釋， 稀釋倍數(shù)為10倍，并將稀釋后的溶液均勻滴加在預(yù)處理后的結(jié)合物釋放墊上，靜置至預(yù)處 理后的結(jié)合物釋放墊充分吸收該溶液，并隨后于37°C恒溫干燥箱中至完全干燥，得到終處 理的結(jié)合墊，封袋置于4°C保存?zhèn)溆谩?br>[0111] 3.試紙條的組裝
[0112] (1)所得預(yù)處理的層析膜固定于單面塑膠板上，所得預(yù)處理的樣品墊及終處理的 結(jié)合物釋放墊按順序貼在層析膜上，最后在層析膜的另一端貼上吸水墊，各個(gè)墊和膜之間 相互之間重疊 2mm，試紙條組裝完成。
[0113] (2)用自動(dòng)切膜機(jī)將完成組裝的試紙條進(jìn)行切割，寬度約為4_，并將其裝入塑料 板
[0114] 中，最后將做好的試紙條與干燥劑一起裝入鋁箱袋內(nèi)密封儲(chǔ)存。
[0115] 4.樣品的測試和結(jié)果判讀
[0116] (1)定性檢測：用于激發(fā)量子點(diǎn)的紫外燈波長范圍為320nm~420nm的普通紫外 燈即可；根據(jù)雙抗夾心的原理，當(dāng)待測樣本中含有前列腺特異性抗原時(shí)，復(fù)合物將同時(shí)被T 線和C線捕獲，紫外燈照射下出現(xiàn)兩條熒光條帶，檢測結(jié)果為陽性；反之，檢測樣