一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng) 化樣品前處理和檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 茶葉中農(nóng)藥殘留檢測(cè)樣品前處理方法主要包括提取、濃縮、凈化等=個(gè)環(huán)節(jié)，提取 環(huán)節(jié)主要采用有機(jī)溶劑浸泡、均質(zhì)提取、索氏提取、超聲輔助萃取、或加速溶劑萃取等方式 下提取目標(biāo)化合物，提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或氮吹儀濃縮近干，有機(jī)溶劑溶解殘?jiān)?，待進(jìn)一步 凈化處理。與其它農(nóng)產(chǎn)品或食品相比，茶葉提取液中的組分復(fù)雜且含量高，容易對(duì)目標(biāo)農(nóng)藥 造成干擾，導(dǎo)致定性定量偏差，甚至產(chǎn)生錯(cuò)誤結(jié)果。因此，茶葉農(nóng)藥殘留檢測(cè)凈化處理的要 求也相對(duì)較高，通常采用固相萃取、凝膠凈化處理等凈化技術(shù)。我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)推薦的茶 葉農(nóng)藥殘留檢測(cè)前處理方法主要步驟為：5~10g茶葉加入30~60mL乙臘后，采用均質(zhì) 儀在12000rpm下均質(zhì)提取，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮近干后，2血體積比為3:1的乙臘/甲苯 溶解殘?jiān)?次，并轉(zhuǎn)移到TPT(茶葉農(nóng)藥殘留檢測(cè)專用凈化小柱)凈化小柱，25mL體積比為 3:1的乙臘/甲苯洗脫目標(biāo)化合物，洗脫液濃縮近干后，采用體積比為1:1的甲醇/水溶解 殘?jiān)^0. 22ym有機(jī)濾膜，用于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析；或洗脫液濃縮近干后，采用丙 酬溶解殘?jiān)?，過0. 22ym有機(jī)濾膜，用于氣相色譜-質(zhì)譜分析。
[0003] 目前茶葉中農(nóng)藥殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)存在的主要不足包括：自動(dòng)化程度低、 勞動(dòng)強(qiáng)度大、操作復(fù)雜、時(shí)間長(zhǎng)、效率低。W現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T23204-2008為例，樣品前 處理所需有機(jī)溶劑包括乙臘、甲苯、丙酬等累計(jì)約90-100mL有機(jī)溶劑，單個(gè)樣品的處理時(shí) 間在50-60min，而且每個(gè)環(huán)節(jié)均需操作人員手動(dòng)處理。
[0004]隨著分析儀器的發(fā)展和農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求的不斷提高，越來越多的前處理設(shè)備應(yīng) 用到農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)樣品前處理方法中，大大提升了樣品前處理自動(dòng)化程度。自動(dòng)化 前處理設(shè)備不僅提高了工作效率，而且減少了有機(jī)溶劑的用量。其中在提取環(huán)節(jié)的自動(dòng)化 前處理設(shè)備主要包括加速溶劑萃取儀、微波儀、超聲波儀等。加速溶劑萃取儀的特點(diǎn)是有機(jī) 試劑用量小、提取效率高。全自動(dòng)定量濃縮儀與全自動(dòng)固相萃取儀解決了目前凈化處理過 程中操作繁瑣、運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng)等缺陷。
[0005] 目前，加速溶劑萃取儀、全自動(dòng)定量濃縮儀、全自動(dòng)固相萃取儀等前處理設(shè)備在農(nóng) 藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用已有報(bào)道。我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)"GB/T23376茶葉中農(nóng)藥多殘留檢測(cè) 氣相色譜-質(zhì)譜法"中采用了加速溶劑萃取儀提取茶葉中農(nóng)藥殘留。但迄今為止茶葉中農(nóng) 藥殘留檢測(cè)樣品前處理方法中尚未將加速溶劑萃取儀、全自動(dòng)定量濃縮儀與全自動(dòng)固相萃 取儀有效的銜接，因此茶葉中農(nóng)藥殘留樣品前處理自動(dòng)化程序低的缺陷始終未解決。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)提供一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留 檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法的技術(shù)方案。
[0007] 所述的一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法，其特征在于 包括W下步驟： 1) 稱取茶葉粉末2. 0~5.Og加入到34mL的加速溶劑萃取儀樣品池中，加入5mL去離 子水，靜置5min后將樣品池放到加速溶劑萃取儀中進(jìn)行提??； 2) 將步驟1)得到的提取液經(jīng)無水硫酸鋼過濾到全自動(dòng)定量濃縮儀自動(dòng)進(jìn)樣瓶中后濃 縮至干，乙臘溶解殘?jiān)?3) 將步驟2)得到的提取液轉(zhuǎn)移到全自動(dòng)固相萃取儀樣品瓶中，采用GCB/PSA小柱凈 化； 4) 將步驟3)得到的洗脫液轉(zhuǎn)移到全自動(dòng)定量濃縮儀樣品瓶中，濃縮至干后用體積比為 1:1的甲醇/水溶液溶解殘?jiān)?5) 將步驟4)得到的樣品液經(jīng)0. 22ym有機(jī)濾膜轉(zhuǎn)移到液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜自動(dòng)進(jìn)樣 瓶中； 6) 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參數(shù)包括液相色譜條件和質(zhì)譜條件，所述的液相色譜條件：HSS C18柱50mmX2.Imma.SMm;流動(dòng)相0. 1〇/〇甲酸（A相）和甲醇(含0. 1〇/〇甲酸）（B相）;梯 度洗脫程序：〇min90%A，12. 0min5%A，15. 0min5%A，17.Omin90%A，20min90%A;流 速：0. 25ml/min;柱溫：30°C;進(jìn)樣量：5化； 所述的質(zhì)譜條件：電噴霧電離源，正離子掃描方式，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)；離子源溫度550°C; 霧化氣：氮?dú)?5mL/min;氣簾氣：氮?dú)?5mL/min;駐留時(shí)間采用sMRM模式。
[0008] 所述的一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法，其特征在于 所述的步驟1)中加速溶劑萃取儀條件為：提取溶劑為二氯甲燒，提取溫度95~100°C，靜態(tài) 壓力1450~1500psi，靜態(tài)時(shí)間4. 5~5. 5min，沖洗溶劑為35~45%，灌注時(shí)間50~60s， 循環(huán)2~3次。
[0009] 所述的一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法，其特征在于 所述的步驟2)中所述的全自動(dòng)定量濃縮儀的條件為：3~5mL丙酬預(yù)清洗2次，將提取液全 部轉(zhuǎn)移到濃縮池中，濃縮池壓力為180~220mbar，溫度為75~85°C，最后用4~5血乙 臘洗涂濃縮池。
[0010] 所述的一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法，其特征在于 所述的步驟3)中所述的全自動(dòng)固相萃取儀條件為：凈化小柱用4~6mL體積比為3:1的乙 臘/甲苯溶液預(yù)淋洗，上樣量為2~3mL，洗脫液為20~25mL體積比為3:1的乙臘/甲苯 溶液，洗脫液流速為5mL/min。
[0011] 所述的一種茶葉中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)自動(dòng)化樣品前處理和檢測(cè)方法，其特征在于 所述的步驟4)中所述的全自動(dòng)定量濃縮儀條件為：3~5mL甲醇預(yù)清洗2次，將提取液全 部轉(zhuǎn)移到濃縮池中，濃縮池壓力為180~220mbar，溫度為75~85°C，最后用2~3mL體積 比1:1的甲醇/水溶液洗涂濃縮池。
[0012]本發(fā)明在茶葉農(nóng)藥殘留檢測(cè)樣品前處理和檢測(cè)方法方面具有自動(dòng)化程序高、操作 簡(jiǎn)單、工作效率高等特點(diǎn)，滿足茶葉中多種農(nóng)藥殘留的要求，適用于我國(guó)茶葉質(zhì)檢機(jī)構(gòu)日常 檢測(cè)。
【附圖說明】
[0013]圖1為30種農(nóng)藥的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜總離子流圖。
【具體實(shí)施方式】
[0014] W下結(jié)合實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明。
[0015] 取50~lOOg的干茶經(jīng)粉碎器磨成粉，用感量0.0001g的電子天平稱取2.0~ 5.0g加入到34mL的加速溶劑萃取儀樣品池中，加入5mL去離子水，靜置5min后將樣品 池放到加速溶劑萃取儀中。加速溶劑萃取儀參數(shù)為：提取溶劑為二氯甲燒，提取溫度95~ 100 °C，靜態(tài)壓力1450~1500psi，靜態(tài)時(shí)間4. 5~5. 5min,沖洗溶劑為35~45%