一種化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種化學物質的檢測方法，特別是涉及一種化妝品中尿刊酸及其乙酯 的測定方法。
【背景技術】
[0002] 尿刊酸相對分子質量：138. 12,分子式=C6H6N2O2，溶于甲醇和水，不溶于乙腈。結構 式如下：
[0003]
[0004] 尿刊酸乙酯相對分子質量：166. 17,分子式：CsH1(]N202，溶解性為醇溶性。結構式如 下：
[0005]
[0006] 尿刊酸及其乙酯作為一種抗紫外線的吸收劑，廣泛應用于化妝品及其它透光防日 曬工業(yè)品中。但尿刊酸及其乙酯會減低生物的免疫力，引發(fā)過敏反應，而且可能是致癌物 質，我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007年版）中明確規(guī)定化妝品中不得添加尿刊酸及其乙酯，國 內外對化妝品中尿刊酸及其乙酯的檢測方法未見報道。

【發(fā)明內容】

[0007] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種方法準確、快速、靈敏度高的化妝品中尿刊 酸及其乙酯的測定方法。
[0008] -種化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法，包括如下步驟：
[0009] (1)樣品前處理：對化妝品樣品進行前處理，得到濾液；
[0010] (2)將得到的濾液采用高效液相色譜法進行測定；
[0011] ⑶繪制標準曲線，計算樣品中尿刊酸及其乙酯的含量；
[0012] (4)對于采用高效液相色譜法檢出陽性的樣品，進一步采用高效液相色譜-質譜/ 質譜法進行確證。
[0013] 本發(fā)明所述的化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法，其中，步驟（2)中的高效液 相色譜條件為：
[0014] 色譜柱：XTerra C18 (4. 6mmX 250mm, 5 μ m);流速：1.0 mT,/miη ；
[0015] 流動相：體積比為7:3的甲醇和5mmol/L四丁基溴化銨溶液，等度洗脫；
[0016] 檢測波長：285nm;
[0017] 柱溫：35°C;
[0018] 進樣量：10 μ L。
[0019] 本發(fā)明所述的化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法，其中，所述步驟（4)中的高 效液相色譜-質譜/質譜法條件如下：
[0020] 高效液相色譜條件：
[0021] 色譜柱：HSS T3 色譜柱（100mmX2. lmm, 1. 8 μπι);
[0022] 流動相：體積比為95:5的0.1 %甲酸水溶液和甲醇；
[0023] 流速：0· 4mL/min ；
[0024] 柱溫：30°C ;
[0025] 進樣量：5 μ L ;
[0026] 質譜條件：
[0027] 離子源：電噴霧離子源；
[0028] 離子化模式：正離子模式；
[0029] 毛細管電壓：0.6kV;
[0030] 萃取電壓：2.9V;
[0031] 離子源溫度：150°C;
[0032] 脫溶劑氣溫度：350 °C ;
[0033] 數(shù)據(jù)采集方式：選擇離子監(jiān)測；
[0034] 確證原則：
[0035] 進行試樣測定時，將樣液適當稀釋，按高效液相色譜-質譜/質譜法條件測定樣液 和標準工作溶液，如果所選擇的離子均出現(xiàn)，而且所選擇的離子比與標準物質的相對豐度 一致，允許偏差不超過表1規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中含有尿刊酸及其乙酯。
[0036] 表1尿刊酸及其乙酯質譜分析參數(shù)
[0037]
[0038] 本發(fā)明所述的化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法，其中，所述化妝品為膏霜類、 水劑類、散粉類及香波類化妝品，樣品前處理包括如下步驟：取〇. 2g樣品置于IOmL比色管 中，加入甲醇至刻度，充分混勻，超聲輔助提取20min，將其轉移至離心管中，以8000r/min 轉速離心15min后，取上清液置于氮吹管中，氮吹至lmL，加入9mL水，經0. 45 μ m微孔濾膜， 濾液上機測定。
[0039] 所述化妝品為唇膏類化妝品，樣品前處理包括如下步驟：取0. 2g樣品置于IOmL 比色管中，加入〇.5mL四氫呋喃，加入甲醇至刻度，充分混勻，超聲輔助提取20min，將其轉 移至離心管中，以8000r/min轉速離心15min后，取上清液置于氮吹管中，氮吹至lmL，加入 9mL水，經0. 45 μ m微孔濾膜，濾液上機測定。
[0040] 本發(fā)明化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法與現(xiàn)有技術不同之處在于：本發(fā)明化 妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法采用高效液相色譜法測定化妝品中尿刊酸及其乙酯，方 法準確、快速、靈敏度高，檢測限、回收率和精密度均符合要求，對于化妝品的安全監(jiān)測具有 重要意義。
[0041] 下面結合附圖對本發(fā)明的化妝品中尿刊酸及其乙酯的測定方法作進一步說明。
【附圖說明】
[0042] 圖1為本發(fā)明中尿刊酸及其乙酯紫外吸收光譜圖；其中：1為尿刊酸，2為尿刊酸 乙醋；
[0043] 圖2為本發(fā)明中尿刊酸及其乙酯的高效液相色譜圖；其中：1為尿刊酸，2為尿刊 酸乙酯；
[0044] 圖3為本發(fā)明確證試驗中尿刊酸及其乙酯高效液相色譜-質譜/質譜圖；其中1 為尿刊酸，2為尿刊酸乙酯。
[0045] 本發(fā)明附圖中出現(xiàn)的所有的英文的中文對照如下：
[0046] Abs :吸收度；wavelength/nm:波長/納米；mAU :毫吸收度；Time/min :時間/分 鐘；Response :響應值。
【具體實施方式】
[0047] -、試劑和材料
[0048] 甲醇：色譜純。
[0049] 四氫呋喃：色譜純。
[0050] 氯化鈉。
[0051] 四丁基溴化銨：離子對試劑。
[0052] 尿刊酸標準品。
[0053] 尿刊酸乙酯標準品。
[0054] 10%甲醇溶液：取IOmL甲醇和90mL水，混合后備用。
[0055] 5mmol/L四丁基溴化銨溶液：準確稱取0. 805g四丁基溴化銨，溶于500mL水中。
[0056] 尿刊酸及其乙酯混合標準儲備液：分別稱取適量尿刊酸及尿刊酸乙酯標準品（精 確至0.0 OOlg)，用10%甲醇水溶液配制成含1000mg/L的單標儲備液，再用10%甲醇水溶液 配制成100mg/L的混合標準儲備液。
[0057] 尿刊酸及其乙酯混合標準工作溶液：用10%甲醇水溶液將尿刊酸及其乙酯混合 標準儲備液配制成濃度為0. 2、0. 5、1、2、5、10mg/L混合標準工作溶液。
[0058] 二、儀器和設備
[0059] 高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。
[0060] 分析天平：感量為0· 0001g。
[0061] 離心機：轉速不低于8000r/min。
[0062] 超聲波水浴。
[0063] 氮吹儀。
[0064] 微孔濾膜：0· 45 μ m，有機系濾膜。
[0065] 高效液相色譜-質譜/質譜儀。
[0066] 三、分析步驟
[0067] 1、樣品處理
[0068] (1)膏霜類、水劑類、散粉類及香波類化妝品樣品前處理
[0069] 取0.2g樣品置于IOmL比色管中，加入甲醇至刻度，充分混勻，超聲輔助提取 20min，將其轉移至離心管中，以8000r/min轉速離心15min后，取上清液置于氮吹管中，氮 吹至lmL，加入9mL水，經0. 45 μ m微孔濾膜，濾液上機測定。
[0070] (2)唇膏類樣品前處理。
[0071] 取0· 2g樣品置于IOmL比色管中，加入0· 5mL四氫呋喃，加入甲醇至刻度，充分混 勻，超聲輔助提取20min，將其轉移至離心管中，以8000r/min轉速離心15min后，取上清液 置于氮吹管中，氮吹至lmL，加入9mL水，經0. 45 μ m微孔濾膜，濾液上機測定。
[0072] 2、測定條件
[0073] 高效液相色譜參考條件：
[0074] 色譜柱：XTerra C18 (4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0075] 流速：1· OmT,/mi η ；
[0076] 流動相：甲醇+5mmol/L四丁基溴化銨溶液=70+30 (V+V)，等度洗脫；
[0077] 檢測波長：285nm ;
[0078] 柱溫：35 Γ ;
[0079] 進樣量：10 μ L。
[0080] 3、標準曲線的繪制
[0081] 尿刊酸及其乙酯混合標準工作液按測定條件依次由低向高進樣測定，以峰面 積-濃度作圖，得到標準回歸方程，繪制標準工作曲線。
[0082] 4、測定
[0083] 對待測樣品進行測定，用外標法定量。待測樣液中尿刊酸及其乙酯含量應該標準 曲線之內，超出線性范圍則應稀釋后在進行分析。對于采用高效液相色譜法檢出陽性的樣 品，進一步采用高效液相色譜-質譜/質譜法進行確證。
[0084] 5、空白試驗
[0085] 除不稱取樣品外，均按上述測定條件和步驟進行。
[0086] 6、結果計算
[0087]
山
[0088] 式中：
[0089] W---樣品中尿刊酸及其乙酯的含量，mg/kg ;
[0090] C---從標準工作曲線上查出的試樣溶液中尿刊酸及其乙酯的濃度，mg/L ;
[0091] V 樣液最終定容體積，mL ;
[0092] m---試樣的質量，g。
[0093] 7、檢出限和定量限
[0094] 尿刊酸及其乙酯的檢出限為2mg/kg，定量限為5mg/kg。
[0095] 8、回收率
[0096] 在添加濃度511^/1^~25〇11^/1^濃度范圍內，測得回收率80.1%~103.8%，相對 標準偏差為1. 26 %~6. 96%。
[0097] 9、允許差
[0098] 在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過算術平均值的 10%〇
[0099] 10、確證試驗
[0100] 對于采用高效液相色譜法檢出陽性的樣品，進一步采用高效液相色譜-質譜/質 譜法進行確證。
[0101] 高效液相色譜-質譜/質譜法條件如下：
[0102] 高效液相色譜條件：
[0103] 色譜柱：HSS T3 色譜柱（100mmX2. lmm, 1. 8 μπι);
[0104] 流動相：體積比為95:5的0.1%甲酸水溶液和甲醇；
[0105] 流速：0· 4mL/min ；
[0106] 柱溫：30 cC ;
[0107]進樣量：5yL;
[0108] 質譜條件：
[0109] 離子源：電噴霧離子源；
[0110] 咼子化模式：正咼子模式；
[0111] 毛細管電壓：0.6kV;
[0112] 萃取電壓：2. 9V;
[0113] 離子源溫度：150°C;
[0114] 脫溶劑氣溫度：350 °C ;
[0115] 數(shù)據(jù)采集方式：選擇離子監(jiān)測。
[0116] 確證原則：
[0117] 進行試樣測定時，將樣液適當稀釋，按高效液相色譜-質譜/質譜法條件測定樣液 和標準工作溶液，如果所選擇的離子均出現(xiàn)，而且所選擇的離子比與標準物質的相對豐度 一致，允許偏差不超過表1規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中含有尿刊酸及其乙酯。
[0118] 表1尿刊酸及其乙酯質譜分析參數(shù)
[0119]
[0120] 四、結果與分析