一種用于測定煙用紙張中4種異噻唑啉酮類物質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于煙用紙張中相關(guān)殺菌劑殘留的理化檢驗技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及煙用紙張 中4種異嚷挫嘟酬類物質(zhì)殘留量的測定技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002] 殺菌劑是在紙張生產(chǎn)過程中為防止?jié){料腐敗、變質(zhì)而必須使用的一類殺菌劑，常 用的有5-氯-2-甲基-2H異嚷挫-3-酬（CMI)、2-甲基-3(2H)異嚷挫嘟酬（MI)和1,2-苯 并異嚷挫基-3 (2H)-酬（BIT)等異嚷挫嘟酬類物質(zhì)，其相關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式、CAS號等信息見 表1。目前有大量研究結(jié)果表明，該類物質(zhì)具有細(xì)胞毒性與神經(jīng)毒性，一定濃度下與皮膚接 觸會產(chǎn)生過敏反應(yīng)，吸入或不慎吞咽更會對人或動物造成不可逆的損害。因此，國內(nèi)外相關(guān) 與食品接觸的紙和紙板法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)中異嚷挫嘟酬類殺菌劑的最大使用量、殘留量和特定遷 移量均有嚴(yán)格要求，如我國GB9685-2008《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》要 求食品包裝紙中MI、CMI和BIT的最大使用量不超過50mg/kg、50mg/kg和0. 16mg/血2。同 時，國內(nèi)外化妝品等日用品行業(yè)對此類物質(zhì)的使用也有嚴(yán)格限量規(guī)定，例如我國和歐盟化 妝品法規(guī)對MI和CMI的限量均分別為0. 01%和0. 0015%，歐盟玩具標(biāo)準(zhǔn)EN71-9-2005規(guī)定 了CMI、MI和BIT在玩具皮革、水狀液體、造型黏±、含黏合劑貼紙類等玩具中的限量均分別 為 10mg/kg、10mg/kg和 5mg/kg。
[0003] 目前報道的有關(guān)異嚷挫嘟酬類殺菌劑的檢測方法主要有氣相色譜法、高效液相色 譜法，其中最常用的是高效液相色譜法，分別使用紫外、巧光、二極管陣列檢測器和質(zhì)譜檢 測器，主要用于檢測化妝品和玩具中的異嚷挫嘟酬類殺菌劑。
[0004] 雖然在國內(nèi)包裝紙領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)中已規(guī)定最大使用量，但相關(guān)分析方法研究文獻 較少，使用液相色譜的僅有一篇{化〇€1 Additives and Contaminants,21, W). \2, December2010，1775 - 1781)，該文獻建立了檢測食品包裝紙中異嚷挫嘟酬殺菌劑的超高 效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS)，但樣品前處理采用甲醇多次超聲萃取和蒸干濃縮 的方法，操作步驟較繁瑣，且基質(zhì)效應(yīng)可能影響結(jié)果準(zhǔn)確性，該法對復(fù)雜印刷的煙用紙張樣 品不一定能適用。
[0005] 因此，現(xiàn)階段有必要建立相應(yīng)的分析方法，對與口腔直接接觸的煙用接裝紙、內(nèi)襯 紙和成形紙，W及對參與煙支燃燒的卷煙紙中異嚷挫嘟酬類殺菌劑殘留量進行分析，掌握 殘留量的普遍狀況和水平，將對進一步規(guī)范煙用紙張中異嚷挫嘟酬類殺菌劑的使用、保障 卷煙產(chǎn)品的安全性具有重要意義。
[0006] 表1 四種異嚷挫嘟酬的基本信息



【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的正是為了解決上述問題而開發(fā)的一種用于測定煙用紙張中4種異 嚷挫嘟酬類物質(zhì)的方法。
[0008] 本發(fā)明的目的是通過W下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：一種用于測定煙用紙張中4種異嚷 挫嘟酬類物質(zhì)的方法，用甲醇對樣品進行超聲浸提，離屯、后取上清液經(jīng)吸附劑凈化后，用液 相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜直接測定煙用紙張中4種異嚷挫嘟酬類物質(zhì)，具體步驟如下： 1、提取 稱取〇.5g剪碎后的試樣(約0.5cmX0.5cm)置于具塞塑料離屯、管（15血）中，加入 8血含內(nèi)標(biāo)的甲醇萃取液，旋緊蓋后超聲提取30min,然后5000r/min離屯、20min。
[0009] 2、凈化 移取提取后的上清液1.8血于2.0血離屯、管中，加入150mg無水硫酸儀及50mgPSA和50mgCis吸附劑，于縱滿混合振蕩儀上W2000Hz速率振蕩5min,再W10000巧m速 率離屯、lOmin，收集上清液備用。
[0010] 3、稀釋 移取200iiL上清液，加入600iiL去離子水，經(jīng)0.22ym有機相濾膜過濾，待檢測分 析。
[0011] 4、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液制備 分別稱取0. 〇5g每種異嚷挫嘟酬標(biāo)準(zhǔn)品到不同的50mL容量瓶中，用甲醇定容制得1. 0mg/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)儲備液，然后移取各單一標(biāo)準(zhǔn)儲備液200yL至50mL容量瓶中，用甲醇定 容制得4. 0mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液。
[0012] 分別稱取 5mg、Img和 2. 5mgCMI-d3、BIT-"C6 和（HT-dl7S種內(nèi)標(biāo)于S個lOmL容 量瓶中，用甲醇定容制得500mg/L、100mg/L和250mg/L的單一內(nèi)標(biāo)儲備液，然后分別移 取各單一內(nèi)標(biāo)儲備液lmL、5mL、2mL至50mL容量瓶中，用甲醇定容制得10. 0mg/L的混合 內(nèi)標(biāo)儲備液。
[0013]分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液30yL60yL155yL315yL，625yL1250yL 及2500yL到7個25血容量瓶中，并各加入250yL混合內(nèi)標(biāo)儲備液，用甲醇定容，各標(biāo) 準(zhǔn)工作溶液的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度分別為5iig/l，lOiig/l，25iig/l，50yg/1，lOOiig/l， 200yg/L和 400yg/l，內(nèi)標(biāo)濃度均為 100yg/L; 分別移取上述標(biāo)準(zhǔn)工作溶液200yL和600yL去離子水，待上機測定； 5、測定 吸取w上配制好的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和試樣溶液，注入液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 儀； 采用的液相色譜條件為： a) 色譜柱：甜ridgeC18,4. 6X100mm, 3. 5Mm; b) 流動相：甲醇和水，梯度洗脫，梯度見表2 ; C)流速：0. 6mL/min； d) 進樣量：5yL; e) 柱溫：40°C; 表2梯度洗脫程序
采用的質(zhì)譜條件為：電噴霧電離的正離子模式（ESI+)，質(zhì)譜掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM)，電噴霧電壓為5500V，離子源溫度為600°C，離子對、去簇電壓和碰撞能量見表3。
[0014] 表3 離子對、去簇電壓（DP)和碰撞能量（CV)
*定量離子 6、結(jié)果的計算 對混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進行高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜分析，得到各定量離子的峰面積， 然后計算各目標(biāo)化合物與對應(yīng)內(nèi)標(biāo)的峰面積之比（MI與CMI-d3相比、CMI與CMI-d3相比、 BIT與BIT-"C6相比、OIT和0IT-dl7相比)，擬合峰面積比與濃度成線性，且要求線性相 關(guān)系數(shù)R2> 0. 99。對試樣萃取液進行分析，依據(jù)內(nèi)標(biāo)法由混合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線計算得到測定 值。
[0015] 本發(fā)明的方法克服了現(xiàn)有技術(shù)樣品處理方法的不足，針對煙用紙張樣品優(yōu)化了樣 品前處理方法和儀器檢測條件，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)良效果： 本發(fā)明選擇LC-MS/MS作為檢測手段，相對一級質(zhì)譜（MS)其抗干擾能力更強，具有更高 的靈敏度和選擇性，可W大大減少假陽性的檢測結(jié)果，對樣品前處理的要求更低。
[0016] 通過凈化和稀釋，減少了LC-MS/MS基質(zhì)效應(yīng)，同時稀釋還可W消除溶劑效應(yīng)。通 過內(nèi)標(biāo)法，可提高方法的回收率，實現(xiàn)復(fù)雜印刷背景的煙用紙張基質(zhì)的準(zhǔn)確定量，本發(fā)明方 法首次基于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)分析印刷煙用紙張中4種異嚷挫嘟酬類物質(zhì)。
[0017] 本發(fā)明方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確可靠及重復(fù)性好的優(yōu)點。
[001引①本發(fā)明方法的檢測限： 將不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液加入3倍的去離子水稀釋后注入LC-MS/MS，W3倍信噪比 (S/N=3 )計算檢測限（L0D)，檢測限在 0. 92yg/kg-22. 83yg/kg之間。
[0019] 表4 方法的線性范圍、線性相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限
②本發(fā)明方法的重復(fù)性和加標(biāo)回收率： 在紙張樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，然后進行前處理和LC-MS/MS分析，并按照加標(biāo) 量和測定值計算其回收率，結(jié)果見表5。由表5可W看出，4種異嚷挫嘟酬類物質(zhì)的回收率 在85. 0% - 136. 7%之間，平均相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)小于8%，說明本發(fā)明方法的回收率高，重 復(fù)性好。

【附圖說明】
[0020] 圖1為本發(fā)明測定方法流程圖。
【具體實施方式】
[0021] 本發(fā)明結(jié)合W下實例做進一步描述，但并不是限制本發(fā)明。
[0022] 實例： 1.試劑與儀器： 試劑：2-甲基-4-異嚷挫嘟-3-酬（MI)、5-氯-2-甲基-4-異嚷挫嘟-3-酬（CMI)、 1，2-苯并異嚷挫嘟-3-酬（B口）、2-辛基-4-異嚷挫嘟-3-酬（0口）、CMI