一種穩(wěn)定、抗干擾能力強(qiáng)的血清鋅檢測試劑及檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及血清鋅檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種血清鋅檢測試劑，還涉及使用此檢測試劑的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鋅是人類維持生命所必需的微量元素之一，它在腸道被腸粘膜細(xì)胞吸收后與白蛋白結(jié)合進(jìn)入血液。鋅主要由糞便中排出。鋅的重要生理功能是維持人體內(nèi)多種酶的輔因子，約有90種以上的金屬酶必須有鋅才能發(fā)揮正常的功能，例如紅細(xì)胞的碳酸酐酶、堿性磷酸酶以及與DNA、RNA合成有關(guān)的多種酶等。鋅對維持酶的結(jié)構(gòu)起著重要作用，與膜蛋白結(jié)合后可穩(wěn)定膜的結(jié)構(gòu)，防止膜脂類過氧化。
[0003]鋅在食物中尤其在魚、蛋類和乳酪中含量非常豐富。鋅是人體重要的營養(yǎng)素，其英文縮寫為:Zn。正常人血液中的鋅含量相對恒定，含量約為0.6?1.2mg / L。血清鋅降低見于急性心肌梗死、急性組織燒傷、肝臟病、腎臟病、糖尿病等。血清鋅升高見于甲狀腺功能亢進(jìn)、垂體及腎上腺皮質(zhì)功能減退、真性紅細(xì)胞增多癥、嗜酸粒細(xì)胞增多癥，高血壓患者。
[0004]目前，血清鋅常用的檢測方法有絡(luò)合滴定法、熒光光度法、比色法、原子吸收分光光度法等，絡(luò)合滴定法樣本用量大，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，特異性低。熒光光度法雖然操作簡單，但需要特定的儀器一焚光光度計(jì)。而
原子吸收分光光度法特異性高，操作簡單，但儀器非常昂貴，在基層醫(yī)院很難普及。
[0005]鑒于此，本發(fā)明采用比色法，該法操作簡單、快速、靈敏度高，適用于自動(dòng)化分析。通過優(yōu)化反應(yīng)體系，可有效避免鐵、銅、鈣、鎂等離子的干擾。添加穩(wěn)定劑聚乙二醇6000、乙二醇、NaCl等可有效提高試劑的穩(wěn)定性；并且優(yōu)選的非離子型氟碳表面活性劑FS0-300的加入可促進(jìn)血清鋅的裂解，可防止反應(yīng)體系渾濁，增強(qiáng)顯色物質(zhì)的穩(wěn)定性，避免了除蛋白等預(yù)處理步驟。顯著提高了試劑的靈敏度，操作簡便快速，適用于自動(dòng)化分析，是一種更加穩(wěn)定、抗干擾能力強(qiáng)的血清鋅(Zn)試劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種用于檢測血清鋅(Zn)的試劑及使用該試劑檢測血清鋅含量的方法。該試劑盒采用比色法，可以有效檢測血清鋅的含量，抗干擾能力強(qiáng)，穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。
[0007]基本原理:
硝基-PAPS在堿性溶液中與Zn反應(yīng)，生成紫色的復(fù)合物，在570nm處有最大的吸收峰。銅離子的干擾可以通過添加優(yōu)選的新銅試劑一2，9- 二甲基-1，10-菲咯啉去除；鐵離子的干擾可以通過添加抗壞血酸和亞鐵氰化鉀等消除；而鈣、鎂等堿土金屬可以通過添加檸檬酸三鈉等消除其干擾。
[0008]本發(fā)明是通過以下步驟得到的:
一種血清鋅檢測試劑，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1和試劑R2的組成如下: 試劑R1的組分為:
緩沖液...........................................................................200mm
ol/L，
7K楊酉簽月虧........................................................................5mmo 1 /
L，
丁二酮肟鹽....................................................................2mmol/
L，
氟碳表面活性劑FS0-300................................................10ml/
L，
2，9- 二甲基-1，10-菲咯啉..............................................3mmol/
L，
抗壞血酉愛.........................................................................5mm
ol/L,
亞鐵氰化鉀.....................................................................lmmol/
L，
聚乙二醇 6000................................................................10g/
L，
&二醇..............................................................................5
ml/L，
檸檬酸三鈉.......................................................................12g/
L，
NaCl...................................................................................9g/L，
_齊丨J............................................................................0.5g/L ；
試劑R2的組分為:
緩沖液...........................................................................200mm
ol/L,
二申基亞砜......................................................................5ml/
L，
-PAPS........................................................................0.5mm
ol/L,
氟碳表面活性劑FS0-300...............................................10ml/
L，
抗壞血酉愛.........................................................................5mm
ol/L,
亞鐵氰化鉀.....................................................................lmmol/
L，
聚乙二醇 6000................................................................10g/L，
&二醇..............................................................................5
ml/L,
檸檬酸三鈉.......................................................................12g/
L，
NaCl...................................................................................9g/L，
_齊丨J..............................................................................0.5g/Lo
[0009]所述的血清鋅檢測試劑，試劑R1中緩沖液為25°C，pH為8.2的Tris緩沖液。
[0010]所述的血清鋅檢測試劑，試劑R2中緩沖液為25°C，pH為8.2的Tris緩沖液。
[0011]所述的血清鋅檢測試劑，所述防腐劑為NaN3。
[0012]所述的血清鋅檢測試劑來檢測血清鋅含量的檢測方法，使用全自動(dòng)生化分析儀利用終點(diǎn)法進(jìn)行測定，檢測主波長為570nm。
[0013]所述的檢測方法，R1試劑和R2試劑的比例為4:1。
[0014]本發(fā)明的有益效果:
1)采用新的緩沖體系和穩(wěn)定劑并添加多種抗干擾劑，可以有效去除銅、鐵以及鈣、鎂等離子的干擾，顯著改善了試劑的穩(wěn)定性；
2)采用新型非離子型氟碳表面活性劑FS0-300，可促進(jìn)血清鋅的裂解，可防止反應(yīng)體系渾濁，增強(qiáng)顯色物質(zhì)的穩(wěn)定性，避免了除蛋白等預(yù)處理步驟，顯著提高了試劑的靈敏度和穩(wěn)定性;
3)試劑的準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性良好，價(jià)格便宜，使用方便，完全可以滿足臨床需要。
【附圖說明】
[0015]
圖1為兩種試劑的相關(guān)性曲線圖；
圖2為兩種試劑效期穩(wěn)定性曲線圖；
圖3實(shí)施例1試劑檢測方法；
圖4實(shí)施例1試劑抗干擾性能比較；
圖5實(shí)施例1試劑與市場常見并得到認(rèn)可的血清鋅測定試劑盒對比檢測結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明。
[0017]實(shí)施例1
血清鋅的檢測試劑，包試劑R1和試劑R2:
1)其R1的組成為:
Tris (三羥甲基氨基甲烷)緩沖液(ρΗ=8.2，25°C )..........................lOOmmol/
L
7jC楊酉簽月虧..................................................................................................5mmol/L,
T 二酉同月虧ik...............................................................................................2mm
ol/L,
氟碳表面活性劑FS0-300...........................................................................10
ml/L,
2,9- 二甲基-1, 10-菲略啉...........................................................................3mm
ol/L,
抗壞血酉愛......................................................................................................5mm
ol/L,
亞鐵氰化鉀...................................................................................................1mm
ol/L,
聚乙二醇6000..............................................................................................10
g/L，
&二 I1...........................................................................................................5
ml/L,