[0044] 液晶傳感器采用如下方法制備：
[0045] a、將載玻片浸泡于60mL載玻片洗液中，75°C條件下浸泡30min，然后分別采用水、 無水乙醇、甲醇各洗滌3次，氮?dú)獯蹈?，?10°C條件下干燥過夜，置于濃度為5mM的十八烷 基三氯硅烷-庚烷溶液中處理30min，二氯甲烷沖洗，氮?dú)獯蹈?，制得處理后基底?br>[0046] b、將步驟a制得的處理后基底的上表面滴加體積分?jǐn)?shù)為1%的液晶-庚烷溶液，隔 氧條件下，待庚烷揮發(fā)后，制得液晶傳感器。
[0047] 液晶傳感器在檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的應(yīng)用，步驟如下：
[0048] (1)將仲丁威采用超聲波溶解于磷酸緩沖溶液中30~40min，分別配制成濃度為 0. 00001-1μg/mL的仲丁威濃度梯度溶液；
[0049] 所述磷酸緩沖液組分如下：10mM磷酸，138mMNaCl，2. 7mMKC1;pH= 7. 4 ;
[0050] (2)向步驟⑴制得的待檢測溶液中加入乙酰膽堿酯酶，乙酰膽堿酯酶的加入量 為0. 01mg/mL，經(jīng)37°C反應(yīng)15min，制得酶抑制溶液；
[0051] (3)向步驟⑵制得的酶抑制溶液中加入氯化十四酰膽堿，使氯化十四酰膽堿的 濃度為〇.ImM，經(jīng)37°C反應(yīng)15min，制得酶反應(yīng)溶液；
[0052] (4)將步驟（3)制得的酶反應(yīng)溶液1μL滴于液晶傳感器上，使用偏光顯微鏡進(jìn)行 觀察，結(jié)果如圖2所示。
[0053]采用磷酸緩沖溶液作為空白，按照上述步驟（2)、（3)和（4)依次操作，結(jié)果如圖3 所示。
[0054] 實(shí)施例2
[0055] 液晶傳感器的制備方法如實(shí)施例1所述。
[0056] 液晶傳感器在檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的應(yīng)用，步驟如下：
[0057] (1)將樂果采用超聲波溶解于磷酸緩沖溶液中30~40min，分別配制成濃度為 0. 00001-1μg/mL的樂果濃度梯度溶液；
[0058] 所述磷酸緩沖液組分如下：10mM磷酸，138mMNaCl，2. 7mMKC1;pH= 7. 4 ;
[0059] (2)向步驟⑴制得的待檢測溶液中加入乙酰膽堿酯酶，乙酰膽堿酯酶的加入量 為0. 01mg/mL，經(jīng)37°C反應(yīng)15min，制得酶抑制溶液；
[0060] (3)向步驟（2)制得的酶抑制溶液中加入氯化十四酰膽堿，使氯化十四酰膽堿的 濃度為〇.ImM，經(jīng)37°C反應(yīng)15min，制得酶反應(yīng)溶液；
[0061] (4)將步驟（3)制得的酶反應(yīng)溶液lyL滴于液晶傳感器上，使用偏光顯微鏡進(jìn)行 觀察，結(jié)果如圖4所示。
[0062] 實(shí)施例3
[0063] 液晶傳感器的制備方法如實(shí)施例1所述。
[0064] 液晶傳感器在檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的應(yīng)用，步驟如下：
[0065] (1)將樂果采用超聲波溶解于湖水中30~40min，分別配制成濃度為 0. 00001-1μg/mL的樂果濃度梯度溶液；
[0066] (2)向步驟⑴制得的待檢測溶液中加入乙酰膽堿酯酶，乙酰膽堿酯酶的加入量 為0.Olmg/mL，經(jīng)37°C反應(yīng)15min，制得酶抑制溶液；
[0067] (3)向步驟⑵制得的酶抑制溶液中加入氯化十四酰膽堿，使氯化十四酰膽堿的 濃度為〇.ImM，經(jīng)37°C反應(yīng)15min，制得酶反應(yīng)溶液；
[0068] (4)將步驟（3)制得的酶反應(yīng)溶液1μL滴于液晶傳感器上，使用偏光顯微鏡進(jìn)行 觀察。
[0069] 此結(jié)果表明該液晶傳感器能夠有效地檢測液相中對乙酰膽堿酯酶有抑制作用的 有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，利用該方法能夠快速、靈敏地對水體中的微量農(nóng)藥進(jìn)行 有效檢測。
[0070] 以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟 悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵 蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求所界定的保護(hù)范圍 為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 液晶傳感器在檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的應(yīng)用，其特征在于，步驟如 下： (1) 將待檢測樣品溶解于磷酸緩沖溶液中，制得待檢測溶液； (2) 向步驟（1)制得的待檢測溶液中加入乙酰膽堿酯酶，乙酰膽堿酯酶的加入量為 0. 005~0. 02mg/mL，經(jīng)反應(yīng)，制得酶抑制溶液； (3) 向步驟（2)制得的酶抑制溶液中加入氯化十四酰膽堿，使氯化十四酰膽堿的濃度 為0. 05~0. 2mM，經(jīng)反應(yīng)，制得酶反應(yīng)溶液； (4) 將步驟（3)制得的酶反應(yīng)溶液滴于液晶傳感器上，使用偏光顯微鏡進(jìn)行觀察，當(dāng) 液晶呈現(xiàn)"馬耳他十字"形貌時(shí)，待檢測樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥多0.001 yg/mL或氨基甲酸 酯類農(nóng)藥濃度多0.0001 yg/mL;當(dāng)液晶呈現(xiàn)"扇形"形貌時(shí)，待檢測樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥 < 0. 001 y g/mL或氨基甲酸酯類農(nóng)藥濃度< 0. 0001 y g/mL。2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟（1)中，所述磷酸緩沖液組分如 下： IOmM 磷酸，138mM NaCl，2. 7mM KCl ;pH = 7. 4。3. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟（I)中，待檢測溶液中的待檢測樣 品濃度為〇? 0001~10 y g/mL ; 優(yōu)選的，所述步驟（1)中，溶解為采用超聲波溶解30~40min。4. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟（2)中，反應(yīng)條件為35~38°C反 應(yīng) 10 ~30min。5. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟（3)中，反應(yīng)條件為35~38°C反 應(yīng) 10 ~30min。6. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟⑷中，液晶傳感器采用如下方法 制備： a、 清洗玻璃基底，隔氧干燥后，置于十八烷基三氯硅烷-庚烷溶液中處理20~40min， 二氯甲烷沖洗，氮?dú)獯蹈桑频锰幚砗蠡祝? b、 將步驟a制得的處理后基底的上表面滴加體積分?jǐn)?shù)為0. 5~2%的液晶-庚烷溶液， 隔氧條件下，待庚烷揮發(fā)后，制得液晶傳感器。7. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟a中的玻璃基底為載玻片； 優(yōu)選的，所述步驟a中的清洗玻璃基底步驟為：先浸泡于載玻片洗液中，70~80°C條件 下浸泡30~60min，然后分別采用水、無水乙醇、甲醇各洗滌2~3次； 進(jìn)一步優(yōu)選的，所述的載玻片洗液為"食人魚"洗液，采用質(zhì)量濃度98%的濃硫酸和質(zhì) 量濃度30%雙氧水按體積比為7:3的比例配制而成。8. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟a中的隔氧干燥步驟為：氮?dú)獯?干，在100~120°C條件下干燥過夜； 優(yōu)選的，所述步驟a中的十八烷基三氯硅烷-庚烷溶液濃度為1~10mM。9. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟b中液晶-庚烷溶液的體積分?jǐn)?shù)為 1%〇10. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述有機(jī)磷農(nóng)藥為樂果、甲胺磷、對硫磷和 乙酰甲胺磷；所述氨基甲酸酯類農(nóng)藥為仲丁威、速滅威和西維因。
【專利摘要】本發(fā)明涉及液晶傳感器在檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的應(yīng)用，步驟如下：(1)將待檢測樣品溶解于磷酸緩沖溶液中，制得待檢測溶液；(2)向待檢測溶液中加入乙酰膽堿酯酶，經(jīng)反應(yīng)，制得酶抑制溶液；(3)向酶抑制溶液中加入氯化十四酰膽堿，經(jīng)反應(yīng)，制得酶反應(yīng)溶液；(4)將酶反應(yīng)溶液滴于液晶傳感器上，使用偏光顯微鏡進(jìn)行觀察。本發(fā)明涉及的利用液晶傳感器檢測液相中有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的方法，具有檢測限低，檢測儀器易得，檢測方法簡單、快速、靈敏，試劑消耗少，樣品處理時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，解決了現(xiàn)有檢測方法復(fù)雜、成本高的問題。
【IPC分類】G01N21/84, G01N1/28
【公開號】CN105241882
【申請?zhí)枴緾N201510613597
【發(fā)明人】于麗, 王毅, 趙英淵, 田彤彤, 郭永先
【申請人】山東大學(xué)
【公開日】2016年1月13日
【申請日】2015年9月23日