一種用于尿蛋白檢測試紙的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種尿液檢測領域，特別涉及一種用于尿蛋白檢測試紙的制備方法及 其應用。屬于分析化學領域。
【背景技術】
[0002] 許多人類疾病除非到了很晚的時期，否則不容易被診斷出，因為其生理癥狀不明 顯。體液組分的輕微變化可意味著體內出現問題，因此，檢測體液成份是尤其重要。尿通 常被用作診斷學和臨床研究中的生物標志，因為其是可以從非侵害性方式容易地獲得的體 液。尿液中的蛋白質和肽的復雜混合物可反映血清組成和腎功能。尿液中出現過量的蛋白 質警示出現了慢性病，例如糖尿病、高血壓和腎臟炎癥相關的問題等。
[0003] 尿內出現蛋白稱為蛋白尿，也即尿蛋白。正常尿液中含少量小分子蛋白，普通尿常 規(guī)檢查測不出，當尿中蛋白增加，尿常規(guī)檢查可以測出即為蛋白尿。
[0004] 可以導致蛋白尿的原因很多，它們包括：功能性蛋白尿、體位性蛋白尿或病理性蛋 白尿。常見有：劇烈運動后，發(fā)熱的極期，進食高蛋白飲食；胡桃夾現象；各種腎臟病和腎血 管病等。不同病因引起的腰疼臨床表現也不相同，例如： 1.功能性蛋白尿 功能性蛋白尿是一種輕度（24小時尿蛋白定量一般不超過0.5~1克)、暫時性蛋白尿， 原因去除后蛋白尿迅速消失。
[0005] 2.病理性蛋白尿 蛋白尿持續(xù)存在，尿中蛋白含量較多，尿常規(guī)檢查常合并有血尿、白細胞尿和管型尿。 并可伴有其他腎臟病表現，如高血壓、水腫等。病理性蛋白尿主要見于各種腎小球、腎小管 間質疾病、遺傳性腎病、腎血管疾病和其他腎臟病。常見的如： (1)原發(fā)性腎小球疾病24小時尿蛋白定量大于或等于3. 5克，蛋白尿為腎臟損害的表 現；（2)繼發(fā)性腎小球疾病24小時尿蛋白定量一般不超過1. 5~2克；（3)腎小管間質疾 病，24小時尿蛋白定量多< 2克；（4)遺傳性腎病尿蛋白陽性，定量> 400毫克/24小時。
[0006] 因此，我們要提倡廣大群眾能學會一種簡單、方便的、靈敏的在家庭中就能自我定 期跟蹤檢測，帶有體溫的新鮮尿液中蛋白質檢測技術。推廣普及后可從健康人群中，篩查出 患有腎疾病傾向群體。隨著人們對健康意識的不斷提高，對人體生理或病理狀況的動態(tài)跟 蹤監(jiān)控，實現預警信號提示、提高慢性病或隱性病的早期檢出率，并通過積極的早期治療提 高康復率意義重大。
[0007] 因此，制備一種檢測尿蛋白的試紙使人們能簡單、方便的在家自我檢測尿液中蛋 白的變化情況，對低濃度的尿蛋白進行定性和定量檢測具有十分重要的價值。

【發(fā)明內容】

[0008] 本發(fā)明的目是提供一種用于尿蛋白檢測試紙的制備方法，且使用簡單、靈敏度高、 選擇性較好的檢測尿液中蛋白質試紙的制備方法，該方法不僅可以定性地檢測尿液中蛋白 質，而且可以定量地檢測尿液中蛋白質，也就是測定出蛋白質的含量范圍，本發(fā)明的目的通 過以下技術方案實現。
[0009] 本發(fā)明尿蛋白檢測試紙是由浸漬了水溶性聚噻吩、四水氯金酸、磷酸二氫鈉、氫氧 化鈉、疏基蛋白酶、聚乙稀醇和濾紙構成，在每平方厘米濾紙中含水溶性聚噻吩0. 2~1. Omg， 四水氯金酸0. 4~2. Omg，磷酸二氫鈉0. 2~2. Omg，氫氧化鈉0. 04~1. Omg，疏基蛋白酶 0. 01~0. 05mg，聚乙稀醇0. 5~3. 0 mg。所用的濾紙可以是定量濾紙。
[0010] -種用于尿蛋白檢測試紙的制備方法，其特征在于，該方法具有以下工藝步驟： (1) 配制溶液A :在反應器中，配制含各組分摩爾濃度為，水溶性聚噻吩： L 0X10 3~4· 0X10 3mol/L，四水氯金酸：1· 0X10 3~4· 0X10 3mol/L，磷酸二氫鈉：0· 2~0· 3 mol/L，氫氧化鈉：0. 1~0. 2 mol/L，水溶液，攪拌均勻，得到溶液A ; (2) 配制溶液B :在反應器中，按如下組成質量百分比加入，去離子水：95~97%，聚乙烯 醇：2~5%，加熱溶解，冷卻至室溫，再加入巰基蛋白酶：0. 1~1. 0%，各組分之和為百分之百， 攪拌溶解，得到溶液B ; (3) 尿蛋白檢測試紙浸漬：將溶液A與溶液B按體積比為2 :1混合均勻，將濾紙定量濾 紙全部浸入溶液A和溶液B混合溶液中60~120s ; (4) 尿蛋白檢測試紙成型：取出浸吸溶液的濾紙，在室溫下晾干，或在低于50°C的溫度 下烘干，將此銨試紙裁成0. 2 cmX 5cm長方形小塊，塑封備用，得到淺黃色的尿蛋白檢測試 紙。
[0011] 所述的水溶性聚噻吩的結構式：
[0012] 所述的水溶性聚噻吩與四水氯金酸的摩爾比為1 :1 ; 所述的巰基蛋白酶為巰基蛋白酶EC3. 4. 22 標準色卡的制作：準確稱取牛血清蛋白溶于蒸餾水中，配制一系列準確濃度的含牛血 清蛋白的溶液，牛血清蛋白的濃度從〇到2. 0mg/mL。將尿蛋白檢測試紙分別浸入各種濃度 的溶液中，6~8s后取出，平放6min后用光譜光度計或光電積分測色儀測得色度。按次值調 制油墨、涂于銅版紙，即制得標準色卡。蛋白質的每一濃度對應于標準色卡上一種顏色。 使用方法：將尿蛋白檢測試紙浸入新鮮尿液中，6~8s后取出，平放6min后。將該試紙 上所顯的顏色與標準色卡相比較，即可判斷出被測尿液中蛋白質的濃度，試紙上顯出的顏 色隨著蛋白質濃度的增加而加深，所顯顏色從淺粉色到紅色。
[0013] 本發(fā)明的優(yōu)點： (1) 本發(fā)明獲得的尿蛋白檢測試紙，具有攜帶方便，操作簡便、快速，檢測直觀，選擇性 好，準確度和靈敏度較高檢測； (2) 通過目視比較顯色后的尿蛋白檢測試紙與標準色卡的顏色便可判斷尿液中蛋白的 含量，非專業(yè)人員就可以進行測試，是居家自測的理想選擇； (3) 本發(fā)明制備尿蛋白檢測試紙，所使用的試劑都是普通的化學試劑無毒、安全可靠， 試紙應用范圍廣； (4)制備尿蛋白檢測試紙的過程要求的條件容易控制，能耗低，操作簡單，屬于清潔生 產工藝，易于大量生產。
【具體實施方式】
[0014] 實施例1 (1) 配制溶液A :在燒杯中，分別準確稱取水溶性聚噻吩：0. 5g，四水氯金酸：0. 8g，磷酸 二氫鈉：30g，氫氧化鈉：6g，加去離子水1000 mL，攪拌溶解，得到溶液A ; (2) 配制溶液B :在燒杯中，按如下組成質量百分比加入，去離子水：960