標實際樣品中15min，然后取出后再放入含有PBS電解質(zhì)溶液中，所述電解質(zhì)溶液為pH =7的0.1M的PBS電解質(zhì)溶液。以飽和甘汞電極為參比電極，鉑電極為對電極，修飾后的玻碳電極為工作電極。采用電化學交流阻抗譜法(EIS)，振幅10mV，確定頻率為0.1HZ時Z"值。根據(jù)公式C =-1/(2 31 f Z〃)，計算求得C值。將該電容值與未經(jīng)實際樣品溶液浸泡電容值C。進行比較，計算得到相對電容變化量，相對電容變化量=(C-C 0)/C0o再根據(jù)圖7的線性方程計算出對應溶液卡那霉素的濃度，最后計算回收率和相對標準偏差，結(jié)果如圖8，卡那霉素的回收率在96.38%至107.9%之間，相對標準偏差在1.01%至3.3%之間，這表明該方法可運用于實際檢測。
[0055]實施例2
[0056]電紡納米纖維殼聚糖檢測卡那霉素電容型傳感器制備，制備步驟包括:
[0057](1)參考實施例1的步驟1)和步驟2)中制備表面覆有絕緣膜層的玻碳電極。
[0058](2)印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖的制備:0.6g殼聚糖溶解在15mL TFA和DCM(V/V = 7:3)溶液中，再加入0.3g卡那霉素，攪拌過夜，得到靜電紡絲液，用注射栗(LSP-1B)將靜電紡絲液以速度lmL/h從注射器中連續(xù)注出進行紡絲，注射器的針頭是20號，實驗所用電壓為16KV，高壓發(fā)生器的陽極與注射器末端連接，陰極與帶有鋁箔的收集板相連。收集的靜電紡絲纖維室溫干燥一夜，待干燥完全后，將其放在飽和的碳酸鈉溶液中浸泡過夜。最后用5%鹽酸溶液和水對模板分子進行反復洗脫，干燥待用。
[0059]將步驟3)的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖經(jīng)SEM和IR表征表明本實施例成功合成了印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖。
[0060](3)將制備的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖，配成分散液涂覆在分子印跡CS/聚O-PD/GCE表面，在室溫下干燥即得到基于分子印跡的納米纖維分子印跡殼聚糖電極，記為CS/聚o-PD/GCE，將電極密封保存以供后來使用。該傳感器對卡那霉素的回收率在91.38%至105.1%之間，相對標準偏差在1.51%至3.42%之間，這表明該方法可運用于實際檢測。
【主權(quán)項】
1.用于檢測卡那霉素的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器，其特征在于:它由表面覆有絕緣膜層的玻碳電極和涂覆在玻碳電極表面的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖膜層組成，所述的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖是將模板分子卡那霉素和殼聚糖混合攪拌溶解在有機溶劑中，靜電紡絲制備納米纖維殼聚糖，然后洗脫脫除模板分子卡那霉素，干燥得到的。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測卡那霉素的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器，其特征在于:所述模板分子卡那霉素和殼聚糖的質(zhì)量比為1:2-1:4。3.權(quán)利要求1所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)電極絕緣膜構(gòu)建:在潔凈的玻碳電極表面電鍍鄰苯二胺，得到聚o-PD/GCE; 2)將模板分子卡那霉素和殼聚糖混合攪拌溶解在有機溶劑中，靜電紡絲制備納米纖維殼聚糖，然后洗脫脫除模板分子卡那霉素，干燥得到印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖，將印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖配成分散液，涂覆在聚o-PD/GCE表面，在室溫下干燥，即得到基于分子印跡的電紡納米纖維殼聚糖玻碳電極，記為分子印跡CS/聚o-ro/GCE。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:所述的步驟1)為將o-PD和電解質(zhì)KC1溶解在PBS溶液中配制成o-PD的PBS溶液，然后以此作電解液，利用循環(huán)伏安法，將聚鄰苯二胺電鍍到玻碳電極表面，即得聚o-PD/GCE ; 所述的步驟2)中印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖配成分散液的濃度為0.8-1.2mg/mL。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:所述的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖玻碳電極的制備方法為:將殼聚糖溶解在TFA和DCM溶液中，再加入卡那霉素，攪拌過夜，得到靜電紡絲液，然后用注射栗將靜電紡絲液從注射器中注出進行靜電紡絲，高壓發(fā)生器的陽極與注射器末端連接，陰極與帶有鋁箔的收集板相連，收集的靜電紡絲纖維室溫干燥過夜以除去TFA及紡絲后可能含有的水分，待干燥完全后，將其放在飽和的碳酸鈉溶液中浸泡過夜，中和過量的酸，最后用5%稀鹽酸溶液和水對模板分子進行反復洗脫，干燥而得。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:所述TFA和DCM的體積比為7:3，靜電紡絲電壓為15-18KV，注射器的針頭是20-22號，靜電紡絲液的流速為1-1.2mL/h。7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:靜電紡絲體系中殼聚糖的質(zhì)量體積濃度為0.02-0.04g/mL。8.權(quán)利要求1所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器在卡那霉素含量檢測中的應用，其特征在于:應用方法: (1)將電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器即分子印跡CS/聚o-PD/GCE電極浸泡在含有目標卡那霉素分子的待測溶液中一段時間，然后取出后再放入含有PBS電解質(zhì)溶液中，以飽和甘汞電極為參比電極，鉑電極為對電極，修飾后的玻碳電極為工作電極，采用電化學交流阻抗譜法(EIS)，振幅10mV，確定頻率為0.1HZ時Z"值，根據(jù)公式C = -1/ (2 π f Z〃)，計算求得C值，將該電容值與未經(jīng)卡那霉素待測溶液浸泡電容值C。進行比較，計算得到此卡那霉素分子印跡CS/聚O-PD/GCE的相對電容變化量，相對電容變化量=(C-C0)/C0； (2)基于預先獲得的相對電容變化量與卡那霉素濃度值的標準曲線，計算求得待測樣品溶液中卡那霉素的含量。9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:所述PBS電解質(zhì)溶液為pH = 7的0.1M的PBS電解質(zhì)溶液； 所述分子印跡CS/聚o-PD/GCE在含有目標分子卡那霉素的待測溶液中浸泡時間至少為 15min ； 相對電容變化量與卡那霉素濃度值的標準曲線的獲得方法:配制一系列濃度的卡那霉素溶液，將分子印跡CS/聚o-PD/GCE放在各濃度的卡那霉素溶液中浸泡一段時間，然后取出后再放入含有PBS電解質(zhì)溶液中，以飽和甘汞電極為參比電極，鉑電極為對電極，采用電化學交流阻抗譜法，振幅10mV，確定頻率為0.1HZ時，測定其Z"，根據(jù)公式C = -1/ (2 π fZ〃)，計算求得C值，將該電容值與未經(jīng)卡那霉素待測溶液浸泡的電容值C。進行比較，計算得到不同濃度的卡那霉素溶液的相對電容變化量，相對電容變化量=(C-C。) /C。； 擬合獲得相對電容變化量與卡那霉素溶液濃度值的標準曲線c(x，y)—X為卡那霉素濃度，y為相對電容變化量。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器的制備方法，其特征在于:所述擬合為分段擬合，分別得到小濃度時相對電容變化量與卡那霉素溶液濃度值的線性關(guān)系曲線Cl(Xl，yi)—一那霉素濃度，0.l_100ng/ml，y i為相對電容變化量，和大濃度時相對電容變化量與卡那霉素溶液濃度值的線性關(guān)系曲線c2(x2，y2)——工2卡那霉素濃度，100-500ng/ml，y2為相對電容變化量； 相應地，在求算待測樣品中卡那霉素濃度時，根據(jù)待測樣品溶液中相對電容變化量確定選用小濃度時相對電容變化量與卡那霉素溶液濃度值的線性關(guān)系曲線Cl (Xl，yi)，還是大濃度時相對電容變化量與卡那霉素溶液濃度值的線性關(guān)系曲線c2(x2，y2)，然后結(jié)合該待測樣品溶液的相對電容變化量計算待測樣品中卡那霉素濃度。
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于檢測卡那霉素的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器，它由表面覆有絕緣膜層的玻碳電極和涂覆在玻碳電極表面的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖膜層組成。所述的印跡有卡那霉素分子的納米纖維殼聚糖是將模板分子卡那霉素和殼聚糖混合攪拌溶解在有機溶劑中，靜電紡絲制備納米纖維殼聚糖，然后洗脫脫除模板分子卡那霉素，干燥得到的。本發(fā)明的電紡納米纖維殼聚糖電容型傳感器可實現(xiàn)卡那霉素的高靈敏、高選擇性檢測。整個發(fā)明過程操作簡單，成本低廉，檢測時間短，具有良好穩(wěn)定性，符合實際需要，成功應用于實際樣品檢測，環(huán)境友好，便于擴大生產(chǎn)。
【IPC分類】G01N27/22
【公開號】CN105301066
【申請?zhí)枴緾N201510848676
【發(fā)明人】龔靜鳴, 江敏
【申請人】華中師范大學
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年11月27日