二對(duì)甲苯磺酸拉帕替尼原料藥中雜質(zhì)的分析檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中雜 質(zhì)的分析檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼是一種能夠同時(shí)祀向人表皮生長(zhǎng)因子受體巧GFR)和人表 皮生長(zhǎng)因子受體-2 (肥R2)的小分子激酶抑制劑，由英國(guó)葛蘭素史克公司開發(fā)，于2007年3 月獲得美國(guó)抑A批準(zhǔn)，用于聯(lián)合用藥；合用卡培他濱治療過度表達(dá)HER2的晚期或轉(zhuǎn)移性乳 腺癌，合用來曲哇治療過度表達(dá)肥R2、激素受體陽性的轉(zhuǎn)移性乳腺癌絕經(jīng)期婦女。
[0003] 然而，目前二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中雜質(zhì)（或者說是有關(guān)物質(zhì)）的分析檢 測(cè)方法仍有待改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明的 一個(gè)目的在于提出一種靈敏度高、專屬性強(qiáng)的針對(duì)二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中雜質(zhì)的 分析檢測(cè)方法。
[0005] 本發(fā)明的目的是根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中 雜質(zhì)的分析檢測(cè)方法。采用本發(fā)明的方法，可W很好地分離二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼與其合 成過程引入的雜質(zhì)和降解雜質(zhì)，靈敏度高，專屬性強(qiáng)。
[0006] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中雜質(zhì)的分析檢測(cè)方法 是利用結(jié)合紫外檢測(cè)器的高效液相色譜法進(jìn)行的，其中，采用十八烷基娃焼鍵合硅膠柱；流 動(dòng)相由流動(dòng)相A和流動(dòng)相B組成；采用緩沖鹽溶液作為所述流動(dòng)相A，所述緩沖鹽溶液為用 冰醋酸調(diào)節(jié)抑的磯酸鹽溶液或醋酸鹽溶液；采用有機(jī)溶劑作為所述流動(dòng)相B，所述有機(jī)溶 劑為選自甲醇、己臘、己醇中的至少一種；洗脫方式為線性梯度洗脫。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，利用本發(fā) 明的該方法可W很好的分離二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼與其合成過程中引入的雜質(zhì)和降解雜 質(zhì)，且靈敏度高，專屬性強(qiáng)。
[0007] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為262±2nm。由此，二對(duì)甲苯礙 酸拉帕替尼在波長(zhǎng)為262nm處具有最大吸收。
[0008] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述高效液相色譜法的柱溫為25~35攝氏度。由此，有利 于二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)進(jìn)行分離，如果溫度過高或過低，分離效果均不理想。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述高效液相色譜法的流速為0. 8~1. 2ml/min。由此，有 利于二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)進(jìn)行分離，如果流速過快或過慢，分離效果均不理想。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述緩沖鹽溶液為磯酸鹽或醋酸鹽溶液，優(yōu)選所述緩沖鹽 為醋酸倭溶液。由此，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)進(jìn)行分離的效果理想。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述用冰醋酸調(diào)節(jié)抑的磯酸鹽或醋酸鹽緩沖溶液的抑為 4. 0-5. 0,優(yōu)選抑為4. 3-4. 8,更優(yōu)選抑為4. 4~4. 6。由此，有利于二對(duì)甲苯礙酸拉帕替 尼和雜質(zhì)進(jìn)行分離，如果抑過高或過低，分離效果均不理想。
[0012] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，優(yōu)選所述有機(jī)溶劑為己臘。由此，分離二對(duì)甲苯礙酸拉帕替 尼和雜質(zhì)的效果好。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，本發(fā)明所述線性梯度洗脫的條件，包括流動(dòng)相A和B的比 例、洗脫時(shí)間如下：
[0014]
陽015] 由此，能夠獲得較理想的分離效果。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，本發(fā)明可W通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)；利用結(jié)合紫外檢測(cè) 器的高效液相色譜（HPLC)分析檢測(cè)二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中的雜質(zhì)，其中所述高 效液相色譜的所采用的色譜柱為十八烷基鍵合硅膠柱，柱溫；25-35°C，流速；0. 8-1. 2ml/ min ;紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)262±2nm，流動(dòng)相為緩沖鹽溶液和有機(jī)溶劑的混合液，所述緩 沖鹽溶液為磯酸鹽溶液或醋酸鹽溶液，所述緩沖鹽溶液的抑為4. 0-5. 0,所述有機(jī)溶劑為 甲醇、己臘、己醇中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選己臘。洗脫方式為線性梯度洗脫。利用 該分析檢測(cè)方法，能夠快速有效地將二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)分離，且分離度高、專屬 性強(qiáng)。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中雜質(zhì)的分析檢測(cè)方法包括 W下步驟：
[001引 （1)取二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥，用體積比為；1的己臘-水混合溶劑超聲溶 解，配制成每1ml含二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼0. Smg的供試品溶液（即；二對(duì)甲苯礙酸拉帕替 尼供試品溶液的濃度為0. 8mg/ml);
[0019] (2)色譜條件：儀器采用高效液相色譜儀配備紫外檢測(cè)器；采用十八烷基娃焼鍵 合硅膠柱，W用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至4. 5的濃度為50mmol/L的緩沖鹽溶液為流動(dòng)相A，W己臘 為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為262 + 2皿，流速為0. 8-1. 2ml/min，柱溫為25-35攝氏度，按下表所 示條件進(jìn)行線性梯度洗脫，流動(dòng)相A和B的比例、洗脫時(shí)間如下：
[0020]
陽021] (3)取所述供試品溶液15 y 1，按照上述色譜條件，注入高效液相色譜儀，記錄色 譜圖。由此，能夠快速有效地將二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)分離，且分離度高、專屬性強(qiáng)。 [0022] 本發(fā)明的目的是提供二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥雜質(zhì)的高效液相色譜（HPLC) 分析方法。所采用的色譜柱為十八烷基鍵合硅膠柱，柱溫；25-35°C，流速；0. 8-1. 2ml/min ; 檢測(cè)波長(zhǎng)為262 +2nm ;流動(dòng)相；醋酸鹽緩沖液-己臘混合溶液，醋酸鹽緩沖液的抑為4. 0~ 5.0。洗脫方式為采用線性梯度洗脫。由此，能夠快速有效地將二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜 質(zhì)分離，且分離度高、專屬性強(qiáng)。
[002引根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，所述色譜條件為；采用100mmX4. 6mm，3y m的 Phenmonex Luna Cis柱，W用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至4. 0的濃度為50mmol/L的醋酸倭緩沖溶液為 流動(dòng)相A，W己臘為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為262nm，流速為0. 8ml/min，柱溫為25攝氏度。由 此，能夠快速有效地將二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)分離，且分離度高、專屬性強(qiáng)。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，流動(dòng)性A的配制，是通過將3. 85g醋酸倭溶于990ml水中， 并用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至4. 0,然后用水稀釋至1000 ml而獲得的醋酸倭緩沖溶液。
[00幼根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，所述色譜條件為；采用100mmX4. 6mm，3y m的 Phenmonex Luna Cis柱，W用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至4. 5的濃度為50mmol/L的醋酸倭緩沖溶液為 流動(dòng)相A，W己臘為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為262nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30攝氏度。由 此，能夠快速有效地將二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)分離，且分離度高、專屬性強(qiáng)。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，流動(dòng)相A的配制，是通過將3. 85g醋酸倭溶于990ml水中， 并用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至4. 5,然后用水稀釋至1000 ml而獲得的醋酸倭緩沖溶液。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體示例，所述色譜條件為；采用100mmX4. 6mm，3y m的 Phenmonex Luna Cis柱，W用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至5. O的濃度為50mmol/L的醋酸倭緩沖溶液為 流動(dòng)相A，W己臘為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為262nm，流速為1. 2ml/min，柱溫為35攝氏度。由 此，能夠快速有效地將二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼和雜質(zhì)分離，且分離度高、專屬性強(qiáng)。
[002引根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，流動(dòng)性A的配制，是通過將3. 85g醋酸倭溶于990ml水中， 并用冰醋酸調(diào)節(jié)抑至5. 0,然后用水稀釋至1000 ml而獲得的醋酸倭緩沖溶液。
[0029] 本發(fā)明的檢測(cè)二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥雜質(zhì)的方法可W很好地分離二對(duì)甲 苯礙酸拉帕替尼與其合成過程引入的雜質(zhì)和降解雜質(zhì)，分離度好，靈敏度高，專屬性強(qiáng)。
【附圖說明】
[0030] 圖1顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼的紫外掃描圖；
[0031] 圖2顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼中有關(guān)物質(zhì)色譜 圖；
[0032] 圖3顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼供試品溶液的色譜 圖；
[0033] 圖4顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼供試品溶液的色譜 圖；
[0034] 圖5顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥中可能存在 的雜質(zhì)與二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼在同一色譜條件下的分離色譜圖；
[0035] 圖6顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥氧化破壞圖 譜；
[0036] 圖7顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥熱破壞圖 譜；
[0037] 圖8顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥酸破壞圖 譜；
[0038] 圖9顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥堿破壞圖 譜擬及
[0039] 圖10顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，二對(duì)甲苯礙酸拉帕替尼原料藥光照破壞 圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0040] 下面詳細(xì)描