一種果蔬中三硫磷殘留快速檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及果蔬農(nóng)藥殘留檢測，尤其是涉及一種果蔬中三硫磷殘留快速檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]有機磷農(nóng)藥種類繁多，毒性較大，主要是通過皮膚接觸、呼吸和直接食用等方式進入人體。目前在全球注冊的有機磷農(nóng)藥達上百種，在我國大量使用的有機磷農(nóng)藥也多達數(shù)十種。有機磷農(nóng)藥的結(jié)構(gòu)通式為X = PZ(Rl) (R2)，其中X表示=0或= S，Z表示鹵基、烷氧基或其他取代基等，R1、R2表示甲氧基(CH3(T)或乙氧基(C2H5(T)。有機磷農(nóng)藥的分子結(jié)構(gòu)分為兩類:一類是P = 0，如敵敵畏、氧化樂果等;另一類是P = S，如甲拌磷、甲基嘧啶磷等。有機磷農(nóng)藥在結(jié)構(gòu)上含有p=o、p=s、c-p、c-o-p、c-n-p、c-s-p鍵，除敵百蟲和樂果外大多數(shù)不溶于水，溶于有機溶劑，在堿性條件下易水解。有機磷農(nóng)藥可通過呼吸、接觸等方式進入人體，經(jīng)血液和淋巴循環(huán)到全身各器官和組織。有機磷農(nóng)藥進入神經(jīng)系統(tǒng)后與乙酰膽堿酯酶活性中心結(jié)合生成磷酸化膽堿酯酶，磷酸化膽堿酯酶較難水解，破壞了膽堿酯酶的活性，使得乙酰膽堿在神經(jīng)突觸上大積累，干擾了神經(jīng)沖動的正常傳導(dǎo)，最后導(dǎo)致動物體的死亡。有機磷農(nóng)藥具有廣譜高效、易降解、價格低廉等優(yōu)點，是我國防治多種害蟲害的首選農(nóng)藥品種。但是由于有機磷農(nóng)藥的大量使用使得農(nóng)作物和果蔬表面存在有機磷農(nóng)藥殘留，對人民群眾的生活和生命安全造成嚴(yán)重的威脅。所以，長期食用利用SO2漂白的食品對人體有巨大的危害。由此，在國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2763-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中沒有對三硫磷進行規(guī)定，即三硫磷不能在食品中殘留。
[0003]目前我國果蔬中有機磷殘留量的檢測主要標(biāo)準(zhǔn)有NYT761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》、GBT 19648-2006《水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜法》、SNT0148-2011《進出口水果蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量檢測方法氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜法》以及GBT 5009.218-2008《水果和蔬菜中多種農(nóng)藥殘留量的測定》，這些標(biāo)準(zhǔn)都是采用有機溶劑進行勻漿提取，結(jié)合液液萃取或固相萃取進行除雜，最后用色譜進行檢測。這些標(biāo)準(zhǔn)的方案都需要對樣品進行復(fù)雜的前處理，測定時間均較長，需要專業(yè)技術(shù)人員在實驗室完成。
[0004]另外，QuEChERS和色譜結(jié)合檢測有機磷在實驗室應(yīng)用廣泛，其采用醋酸酸化的乙腈提取，采用分散固相萃取的方式凈化。與國內(nèi)現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)相比，雖然簡化了前處理過程，不需要專業(yè)技術(shù)人員，但其仍采用色譜進行檢測，終端測試還是需要專業(yè)人員，無法離開實驗室。
[0005]目前，市面上也有有機磷農(nóng)藥快速檢測卡，其是利用對有機磷高度敏感的膽堿酯酶和顯色劑做成酶試紙，此方法雖然操作簡便，但其易出現(xiàn)假陽性，并且只能測定對膽堿酯酶高度敏感的有機磷，無法鑒別具體是哪種有機磷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種果蔬中三硫磷殘留快速檢測方法。
[0007]本發(fā)明包括以下步驟:
[0008]I)將果蔬樣品放入容器中，加入提取劑、儲水劑，超聲提取，得提取液；
[0009]在步驟I)中，所述果蔬樣品可采用2g;所述果蔬包括青菜、包菜、梨、蘋果、橘子等；所述提取劑與儲水劑的配比可為5?1ml: 0.5?2g，優(yōu)選8ml:1g，其中提取劑以體積計算，儲水劑以質(zhì)量計算;所述提取劑可采用乙腈或乙腈和乙酸，所述乙酸按體積百分比可為乙腈的0.1 %?I % ;所述儲水劑可選自無水硫酸鎂、無水硫酸鈉等中的一種;所述超聲提取的時間可為2?10111；[11，優(yōu)選51]1；[11。
[0010]2)將步驟I)得到的提取液放入帶蓋容器中，加入無水硫酸鎂、石墨化碳和鍵合硅膠PSA，振蕩后靜置，將上清液放入另一帶蓋容器中，加入低極性有機溶劑，第二次振蕩后第二次靜置，取0.5?4ml放入試管中，氮氣吹干，再加入洗脫劑，第三次振蕩，取洗脫液于檢測池中，然后加入金屬溶膠和無機鹽絮凝劑混勻，放入拉曼光譜儀檢測室內(nèi)進行檢測。
[0011]在步驟2)中，所述提取液、無水硫酸鎂、石墨化碳、鍵合硅膠PSA和低極性有機溶劑的配比可為3?8ml:0.05?0.2g: 5?50mg: 0.02?0.2g: 2?5ml，所述提取液、無水硫酸鎂、石墨化碳、鍵合娃膠PSA和低極性有機溶劑的配比可優(yōu)選為5ml:0.lg:20mg:0.lg: 3ml，其中，提取液、低極性有機溶劑以體積計算，無水硫酸鎂、石墨化碳和鍵合硅膠PSA以質(zhì)量計算;所述振蕩的時間可為5?30s，優(yōu)選20s;所述靜置的時間可為0.5?5min，優(yōu)選Imin;所述低極性有機溶劑可選自石油醚、正己烷、環(huán)己烷、庚烷等中的一種;所述第二次振蕩的時間可為5?30s，優(yōu)選1s;所述第二次靜置的時間可為0.5?5min，優(yōu)選Imin;所述洗脫劑、洗脫液、金屬溶膠和無機鹽絮凝劑的體積比可為200?1000: 200: 10?100: 10，所述洗脫劑、洗脫液、金屬溶膠和無機鹽絮凝劑的體積比可優(yōu)選為400: 200:10:10;所述洗脫劑可采用與水互溶的有機溶劑水溶液，所述與水互溶的有機溶劑可選自乙腈、乙醇、甲醇、丙酮、二甲亞砜等中的一種;所述與水互溶的有機溶劑的質(zhì)量百分濃度可為10%?30%，優(yōu)選20%;所述第三次振蕩的時間可為5?30s，優(yōu)選1s ;所述金屬溶膠可選自55nm Au、55nm Ag、55nm有針孔SHINERS、120nm Au、120nm有針孔SHINERS等中的一種；所述無機鹽絮凝劑的摩爾比可為0.0I?5M，優(yōu)選0.08M;所述無機鹽絮凝劑可選自氯化鋇、碘化鉀、碘化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、氯化鋁、硫酸鉀、硫酸鈉、硫酸鎂、磷酸鉀、磷酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈉等中的一種;所述拉曼光譜儀的功率可為280mW，激光波長可為785nm，掃描范圍可為200?2000nm。
[0012]與現(xiàn)有的果蔬中三硫磷殘留檢測方法相比，本發(fā)明具有以下突出優(yōu)點:
[0013]I)操作簡便、無需專業(yè)人員即可實現(xiàn)檢測；
[0014]2)檢測時間短、可實現(xiàn)大批量樣品的快速篩選；
[0015]3)準(zhǔn)確度高，無假陽性現(xiàn)象發(fā)生；
[0016]4)采用簡單的吸附劑和液液萃取對三硫磷進行提取和、提純和富集，使用金屬溶膠進行檢測，不會用到大量的有機溶劑及有毒試劑，對于檢測人員的身體健康及環(huán)境都不會照成危害，對環(huán)境友好。
【附圖說明】
[0017]圖1為實施例1的包菜中三硫磷測試曲線。樣品來源:市售包菜加標(biāo)三硫磷樣品，拉曼光譜儀功率280mW，激光波長785nm，積分時間5s。
[0018]圖2為實施例2的小白菜中三硫磷測試曲線。樣品來源:市售小白菜加標(biāo)三硫磷樣品，拉曼光譜儀功率280mW，激光波長785nm，積分時間5s。
[0019]圖3為實施例3的橘子中三硫磷測試曲線。樣品來源:市售橘子皮加標(biāo)三硫磷樣品，拉曼光譜儀功率180mW，激光波長785nm，積分時間5s。
[0020]圖4為實施例4的蘋果中三硫磷測試曲線。樣品來源:市售蘋果加標(biāo)三硫磷樣品，拉曼光譜儀功率280mW，激光波長785nm，積分時間5s。
【具體實施方式】
[0021 ]以下實施例將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步的說明。
[0022]實施例1
[0023]本實施例包括以下步驟:
[0024]I)將包菜樣品放入容器中，加入提取劑、儲水劑，超聲提取，得提取液;所述包菜樣品采用2g;所述提取劑與儲水劑的配比可為5?1ml:0.5?2g，優(yōu)選8ml: lg，其中提取劑以體積計算，儲水劑以質(zhì)量計算;所述提取劑可采用乙腈或乙腈和乙酸，所述乙酸按體積百分比可為乙腈的0.1%?1%;所述儲水劑可選自無水硫酸鎂、無水硫酸鈉等中的一種;所述超聲提取的時間可為2?I Omin，優(yōu)選5min。包菜樣品來源:市售包菜加標(biāo)三硫磷樣品。
[0025]2)將步驟I)得到的提取液放入帶蓋容器中，加入無水硫酸鎂、石墨化碳和鍵合硅膠PSA，振蕩后靜置，將上清液放入另一帶蓋容器中，加入低極性有機溶劑，第二次振蕩后第二次靜置，取0.5?4ml放入試管中，氮氣吹干，再加入洗脫劑，第三次振蕩，取洗脫液于檢測池中，然后加入金屬溶膠和無機鹽絮凝劑混勻，放入拉曼光譜儀檢測室內(nèi)進行檢測。所述提取液、無