表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮?dú)獯蹈桑瑢⒉Ｌ茧姌O放入含γ—甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷質(zhì)量百分濃度為15%的乙醇溶液中，溫度升至45±2°C，浸泡12 h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮?dú)獯蹈?，即得預(yù)處理玻碳電極；
(2)氧化石墨的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，濃硫酸:32mL，石墨烯:3g，高錳酸鉀:5g，超聲分散30min，再加入去離子水:32mL，溫度升至65±2°C攪拌反應(yīng)10h，冷卻至室溫，過濾，用去離子水反復(fù)洗滌至濾液為中性，真空干燥，得到氧化石墨烯；
(3 )印跡溶膠的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，N，N-二甲基甲酰胺:8.5mL，氧化石墨烯:0.2g，丙烯酸:0.Sg，三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯:0.6g，偶氮二異庚腈:0.2g，氯金酸:0.lg，攪拌40 min，再加入喜樹堿:0.lg，溫度升至60±2°C攪拌反應(yīng)6 h，即得印跡溶膠；
(4)喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法:取步驟(3)的印跡溶膠于1yL滴加到步驟(I)制備的預(yù)處理玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，將其用乙醇與鹽酸(體積比為乙醇:乙酸為8:1)混合溶液浸泡8h，除去電極上的模板分子，即得喜樹堿分子印跡傳感器。
[0015]實(shí)施例4
(I)玻碳電極預(yù)處理:將玻碳電極依次用0.1ymAl2O3粉末進(jìn)行表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮?dú)獯蹈?，將玻碳電極放入含γ—甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷質(zhì)量百分濃度為13%的乙醇溶液中，溫度升至45 ± 2 °C，浸泡11.5 h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮?dú)獯蹈?，即得預(yù)處理玻碳電極；
(2)氧化石墨的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，濃硫酸:29mL，石墨烯:4g，高錳酸鉀:Ig，超聲分散22min，再加入去離子水:42mL，溫度升至65 ± 2°C攪拌反應(yīng)8.5h，冷卻至室溫，過濾，用去離子水反復(fù)洗滌至濾液為中性，真空干燥，得到氧化石墨烯；
(3 )印跡溶膠的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，N，N-二甲基甲酰胺:7.6mL，氧化石墨烯:0.4g，丙烯酸:1.2g，三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯:1.lg，偶氮二異庚腈:0.lg，氯金酸:0.04g，攪拌32 11^11，再加入喜樹堿:0.068，溫度升至60±2°(:攪拌反應(yīng)5.5 h，即得印跡溶膠；
(4)喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法:取步驟(3)的印跡溶膠于1yL滴加到步驟(I)制備的預(yù)處理玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，將其用乙醇與鹽酸(體積比為乙醇:乙酸為8:1)混合溶液浸泡6.5h，除去電極上的模板分子，即得喜樹堿分子印跡傳感器。
[0016]實(shí)施例5
(1)玻碳電極預(yù)處理:將玻碳電極依次用0.1ymAl2O3粉末進(jìn)行表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮?dú)獯蹈?，將玻碳電極放入含γ—甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷質(zhì)量百分濃度為14%的乙醇溶液中，溫度升至45 ± 2 °C，浸泡10.5 h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮?dú)獯蹈桑吹妙A(yù)處理玻碳電極；
(2)氧化石墨的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，濃硫酸:30mL，石墨烯:6g，高錳酸鉀:3g，超聲分散28min，再加入去離子水:35mL，溫度升至65 ± 2°C攪拌反應(yīng)9.5 h，冷卻至室溫，過濾，用去離子水反復(fù)洗滌至濾液為中性，真空干燥，得到氧化石墨烯；
(3 )印跡溶膠的制備:在反應(yīng)器中，分別加入，N，N-二甲基甲酰胺:7.6mL，氧化石墨烯:
0.3g，丙烯酸:1.5g，三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯:0.4g，偶氮二異庚腈:0.15g，氯金酸:
0.02g，攪拌38 11^11，再加入喜樹堿:0.038，溫度升至60±2°(:攪拌反應(yīng)4.5 h，即得印跡溶膠；
(4)喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法:取步驟(3)的印跡溶膠于1yL滴加到步驟(I)制備的預(yù)處理玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，將其用乙醇與鹽酸(體積比為乙醇:乙酸為8:1)混合溶液浸泡7.5h，除去電極上的模板分子，即得喜樹堿分子印跡傳感器。
[0017]實(shí)施例6
將上述實(shí)施例1?5所制備的喜樹堿分子印跡傳感器，用于喜樹堿的檢測，步驟如下:
(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:配制一組包括空白標(biāo)樣在內(nèi)的不同濃度的喜樹堿標(biāo)準(zhǔn)溶液，底液為pH 7.0的磷酸鹽緩沖溶液；
(2)工作曲線繪制:將Ag/AgCl為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，本申請(qǐng)實(shí)施例1~5所制備的喜樹堿分子印跡傳感器電極為工作電極組成三電極系統(tǒng)，連接CHI660B電化學(xué)工作站，在K3[Fe(CN)6]溶液中，采用循環(huán)伏安法在-0.30-0.3V電位范圍內(nèi)進(jìn)行檢測，空白標(biāo)樣的響應(yīng)電流記為1，含有不同濃度的喜樹堿標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)電流即為I1，響應(yīng)電流降低的差值為Λ I=1-1i，ΔI與喜樹堿標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度c之間呈線性關(guān)系，繪制ΛI(xiàn) 工作曲線；
(3)喜樹堿的檢測:用待測樣品代替步驟(I)中的喜樹堿標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照步驟(2)的方法進(jìn)行檢測，根據(jù)響應(yīng)電流降低的差值ΛΙ和工作曲線，得到待測樣品中喜樹堿的含量； 所述K3 [Fe(CN)6]溶液的濃度為5mmo I/L;
所述pH 7.0的磷酸鹽緩沖溶液的濃度在80 mmol/Lo
[0018]響應(yīng)電流與喜樹堿的濃度在1.0 X 10—7?7.0X10—5mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢測限為1.42X10—Vol/L將本發(fā)明制備的喜樹堿分子印跡傳感器成功用于藥品、生物樣品中喜樹堿的檢測中，回收率在96.12-104.8%之間，因此本發(fā)明制備的分子印跡傳感器可廣泛應(yīng)用于化工、生物醫(yī)藥、食品、環(huán)保檢測等相關(guān)領(lǐng)域。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種檢測喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，該方法具有以下工藝步驟: (1)玻碳電極預(yù)處理:將玻碳電極依次用0.1ymAl2O3粉末進(jìn)行表面拋光，然后用高純水超聲清洗，用氮?dú)獯蹈?，將玻碳電極放入含γ—甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷質(zhì)量百分濃度為10?15%的乙醇溶液中，溫度升至45 ± 2°C，浸泡10?12 h，取出用無水乙醇充分洗滌，用氮?dú)獯蹈?，即得預(yù)處理玻碳電極； (2)氧化石墨的制備:在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入，濃硫酸:50?60%，石墨烯:3-8%，高錳酸鉀:1.0~5%，超聲分散20?30min，再加入32?42%去離子水，各組分含量之和為百分之百，溫度升至65±2°C攪拌反應(yīng)8?10 h，冷卻至室溫，過濾，用去離子水反復(fù)洗滌至濾液為中性，真空干燥，得到氧化石墨烯； (3)印跡溶膠的制備:在反應(yīng)器中，按如下組成質(zhì)量百分濃度加入，N，N-二甲基甲酰胺:70?80%，氧化石墨烯:2~5%，丙烯酸:8?18%，三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯:4?12%，偶氮二異庚腈:0.5-2.0%，氯金酸:0.1-1.0%，攪拌30?40 min，再加入喜樹堿:0.I?I.0%，各組分含量之和為百分之百，溫度升至60±2°C攪拌反應(yīng)4?6 h，即得印跡溶膠； (4)喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法:取步驟(3)的印跡溶膠于1yL滴加到步驟(I)制備的預(yù)處理玻碳電極上，置于紅外燈下，揮發(fā)干溶劑后，將其用乙醇與乙酸混合溶液浸泡6~8h，除去電極上的模板分子，即得喜樹堿分子印跡傳感器。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(3 )中所述的喜樹堿與氯金酸的摩爾比為1:1最優(yōu)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述乙醇與鹽酸混合溶液的體積比為乙醇:乙酸=8:1。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法所制備的檢測喜樹堿分子印跡傳感器。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測喜樹堿分子印跡傳感器的制備方法，其特征在于，首先將玻碳電極用γ―甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅修飾，然后溶膠-凝膠印跡技術(shù)、納米金粒子、層層自組裝法和滴涂法相結(jié)合，在修飾玻碳電極表面成功地研制了一種具有特異選擇性的印跡電化學(xué)傳感器，本發(fā)明制備的喜樹堿分子印跡傳感器的響應(yīng)大大提高。該印跡傳感器對(duì)喜樹堿表現(xiàn)出較高的親和性和選擇性。該喜樹堿分子印跡傳感器與電化學(xué)工作站連接構(gòu)成能夠?qū)Ｒ荒０宸肿幼R(shí)別傳感器。本發(fā)明制得的傳感器成本低、靈敏度高、特異性好、檢測快速，可反復(fù)使用。
【IPC分類】G01N27/48
【公開號(hào)】CN105628778
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610087750
【發(fā)明人】李慧芝, 翟玉博, 趙淑英
【申請(qǐng)人】濟(jì)南大學(xué)
【公開日】2016年6月1日
【申請(qǐng)日】2016年2月17日