一種β-興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及食品安全檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡。
【背景技術(shù)】
[0002]β -興奮劑是由兒茶酚胺類(lèi)化學(xué)合成的衍生物，在藥理效應(yīng)上屬于擬腎上腺素藥物，其具有苯乙醇胺結(jié)構(gòu)母核，苯環(huán)上連接有堿性的β-羥胺側(cè)鏈。這類(lèi)藥物主要包括克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、妥布特羅、溴布特羅、馬布特羅、西布特羅、特布他林、馬噴特羅、卡布特羅、西馬特羅、班布特羅等。
[0003]興奮劑能促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，減少脂肪率，使胴體瘦肉率增加10%以上，因此，常作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑被廣泛應(yīng)用于畜禽生長(zhǎng)中。實(shí)際上，其作為飼料添加劑的用量是治療劑量的5-10倍，消費(fèi)者因食用β -興奮劑殘留食品而中毒的事件，國(guó)內(nèi)外已發(fā)生多起，并且基本都是由克倫特羅造成的。由此，各國(guó)均加強(qiáng)了對(duì)克倫特羅的監(jiān)管，從而使克倫特羅的非法使用受到極大限制，不法分子開(kāi)始尋找新的替代品，結(jié)構(gòu)略有差異但生物活性相似的新的同系物被不斷使用。
[0004]目前，國(guó)內(nèi)外β-興奮劑的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法、液/質(zhì)聯(lián)用分析法、氣/質(zhì)聯(lián)用分析法、酶聯(lián)免疫吸附法和膠體金免疫層析法等。利用色譜/質(zhì)譜技術(shù)原理的幾大檢測(cè)方法具有靈敏度高、重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)，但操作繁瑣、所需儀器昂貴、操作人員需要專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)；酶聯(lián)免疫吸附法具有成本低、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，但檢測(cè)步驟多，需要適宜的實(shí)驗(yàn)環(huán)境及配備一些相關(guān)儀器，對(duì)操作人員有一定的要求；膠體金免疫層析法因其具備操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速、成本低，能實(shí)現(xiàn)高通量現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等特點(diǎn)而得到廣泛應(yīng)用，然而，現(xiàn)有的膠體金檢測(cè)卡主要針對(duì)于克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇，檢測(cè)項(xiàng)目有限，其已經(jīng)不能夠滿足檢測(cè)需求。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0005]本實(shí)用新型的目的在于針對(duì)上述問(wèn)題，提供一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡，其能同時(shí)檢測(cè)豬尿中克倫特羅、沙丁胺醇、妥布特羅、溴布特羅、西布特羅、馬布特羅、特布他林七種常見(jiàn)β -興奮劑藥物的殘留，且檢測(cè)靈敏度高。
[0006]本實(shí)用新型的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn):
[0007]一種興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡，包括卡殼及設(shè)置于卡殼內(nèi)的檢測(cè)底板，所述檢測(cè)底板上沿液體流動(dòng)方向依次設(shè)置有樣品墊Α、結(jié)合物墊、樣品墊B、硝酸纖維素膜及吸水墊，所述硝酸纖維素膜上鄰近樣品墊B的一端設(shè)置有檢測(cè)線，且硝酸纖維素膜上鄰近吸水墊的一端設(shè)置有質(zhì)控線，所述檢測(cè)線上包被有溴布特羅-載體蛋白偶聯(lián)物，所述質(zhì)控線上包被有羊抗鼠IgG抗體，所述結(jié)合物墊上包被有抗克倫特羅鼠單抗-膠體金結(jié)合物。
[0008]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述卡殼上開(kāi)有加樣孔，所述加樣孔位于樣品墊A的上方。
[0009]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述卡殼上開(kāi)有觀察窗，所述觀察窗位于硝酸纖維素膜的上方。
[0010]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述溴布特羅-載體蛋白偶聯(lián)物中的載體蛋白為牛血清白蛋白或雞卵白蛋白或血藍(lán)蛋白。
[0011]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述抗克倫特羅鼠單抗-膠體金結(jié)合物中膠體金顆粒的大小為20nm-40nmo
[0012]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述樣品墊A的長(zhǎng)度為12_，所述結(jié)合物墊的長(zhǎng)度為8mm，所述樣品墊B的長(zhǎng)度為7mm，所述硝酸纖維素膜的長(zhǎng)度為25mm，所述吸水墊的長(zhǎng)度為17mm,所述硝酸纖維素膜與樣品墊B交疊2_，且硝酸纖維素膜與吸水墊交疊2_，所述結(jié)合物墊與樣品墊A交疊3mm，且結(jié)合物墊與樣品墊B交疊2mm。
[0013]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述卡殼由塑料材料制成，所述檢測(cè)底板由聚氯乙稀材料制成。
[0014]作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案，所述的吸水墊為濾紙。
[0015]本實(shí)用新型的有益效果為，所述一種興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)單，成本低，通過(guò)增設(shè)樣品墊B，可有效控制流速，提高檢測(cè)靈敏度，且本實(shí)用新型可用于豬尿中克倫特羅、沙丁胺醇、妥布特羅、溴布特羅、西布特羅、馬布特羅、特布他林殘留量的高通量在線定性檢測(cè)，檢測(cè)項(xiàng)目多，能滿足檢測(cè)需求。
【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0017]圖2為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的檢測(cè)底板的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖3為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的陰性狀態(tài)示意圖；
[0019]圖4為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的陽(yáng)性狀態(tài)示意圖；
[0020]圖5為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的一種失效狀態(tài)示意圖；
[0021]圖6為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的另一種失效狀態(tài)示意圖。
[0022]圖中:
[0023]1、卡殼；11、觀察窗；12、加樣孔；2、檢測(cè)底板；21、樣品墊A ;22、結(jié)合物墊；23、樣品墊B ;24、硝酸纖維素膜；25、吸水墊；26、檢測(cè)線；27、質(zhì)控線。
【具體實(shí)施方式】
[0024]下面結(jié)合附圖并通過(guò)【具體實(shí)施方式】來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本實(shí)用新型的技術(shù)方案?？梢岳斫獾氖?，此處所描述的實(shí)施例僅僅用于解釋本實(shí)用新型，而非對(duì)本實(shí)用新型的限定。
[0025]請(qǐng)參照?qǐng)D1及圖2所示，圖1為本實(shí)用新型一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為本實(shí)用新型一種β-興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡的檢測(cè)底板的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026]于本實(shí)施例中，一種β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡，包括由塑料制成的卡殼I及設(shè)置于卡殼I內(nèi)的檢測(cè)底板2，所述檢測(cè)底板2由聚氯乙烯材料制成，其上沿液體流動(dòng)方向依次設(shè)置有樣品墊A21、結(jié)合物墊22、樣品墊B23、硝酸纖維素膜24及吸水墊25，所述吸水墊25為濾紙，所述樣品墊A21的長(zhǎng)度為12mm，所述結(jié)合物墊22的長(zhǎng)度為8mm，所述樣品墊B23的長(zhǎng)度為7mm，所述硝酸纖維素膜24的長(zhǎng)度為25mm，所述吸水墊25的長(zhǎng)度為17mm，所述硝酸纖維素膜24與樣品墊B23交疊2mm，且硝酸纖維素膜24與吸水墊25交疊2mm，所述結(jié)合物墊22與樣品墊A21交疊3mm，且結(jié)合物墊22與樣品墊B23交疊2mm，所述卡殼I上開(kāi)有加樣孔12及觀察窗11，所述加樣孔12位于樣品墊A21的上方，所述觀察窗11位于硝酸纖維素膜24的上方，所述硝酸纖維素膜24上鄰近樣品墊B23的一端設(shè)置有檢測(cè)線26，且硝酸纖維素膜24上鄰近吸水墊25的一端設(shè)置有質(zhì)控線27，所述檢測(cè)線26上包被有溴布特羅-牛血清白蛋白偶聯(lián)物，所述質(zhì)控線27上包被有羊抗鼠IgG抗體，所述結(jié)合物墊22上包被有抗克倫特羅鼠單抗-膠體金結(jié)合物，所述抗克倫特羅鼠單抗-膠體金結(jié)合物中膠體金顆粒的大小為30nm。
[0027]值得一提的是，雖然上述實(shí)施例中，檢測(cè)線26上包被溴布特羅-牛血清白蛋白偶聯(lián)物，但是本實(shí)用新型不限于此，檢測(cè)線26上也可包被溴布特羅-雞卵白蛋白偶聯(lián)物或溴布特羅-血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物。
[0028]請(qǐng)參照?qǐng)D3至圖6所示，檢測(cè)時(shí)，將豬尿滴入到加樣孔12中，液體按照?qǐng)D中箭頭方向流動(dòng)，反應(yīng)5min，在觀察窗11即可看到檢測(cè)線26、質(zhì)控線27的顯色情況，圖3中，質(zhì)控線27與檢測(cè)線26都有條帶，即表示待檢豬尿?yàn)殛幮裕粓D4中質(zhì)控線27顯色，而檢測(cè)線26無(wú)條帶，即表示待檢豬尿?yàn)殛?yáng)性；圖5及圖6中質(zhì)控線27不顯色，即表示該β -興奮劑七合一膠體金檢測(cè)卡已失效。
[0029]一、膠體金的制備
[0030]膠體金的制備采用檸檬酸三鈉還原法:99mL超純水中加入ImL 1%氯金酸，加熱煮沸，迅速加入ImL I %檸檬