降鈣素原和c反應(yīng)蛋白的檢測(cè)試紙的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及醫(yī)藥檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及降鈣素原和C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)試紙。
【背景技術(shù)】
[0002]降鈣素原(PCT)是存在于人體的一種特定標(biāo)記物。PCT的檢查在對(duì)診斷發(fā)熱性疾病有著重要的作用，它是區(qū)別細(xì)菌和非細(xì)菌性感染的重要標(biāo)志物。普通檢測(cè)方法檢測(cè)PCT濃度下線為0.5ng/ml可用于判斷全身性細(xì)菌感染，更高濃度的2_10ng/ml可能為嚴(yán)重細(xì)菌感染，>10ng/ml可能為感染性休克。如果能夠更精確檢測(cè)PCT濃度，則能夠判斷局部細(xì)菌感染和胞內(nèi)病原微生物感染(如立克次體、布魯菌、軍團(tuán)菌、支原體、衣原體等)等。
[0003]PCT適應(yīng)癥:1、細(xì)菌感染與病毒感染的鑒別診斷；2、幫助SIRS/膿毒癥的早期診斷，評(píng)估疾病的嚴(yán)重程度及預(yù)后；3、抗生素治療效果的評(píng)估，指導(dǎo)臨床抗生素使用；4、手術(shù)和嚴(yán)重創(chuàng)傷患者細(xì)菌感染并發(fā)癥監(jiān)測(cè)；5、胰腺炎鑒別診斷。
[0004]目前檢測(cè)PCT的試紙檢測(cè)精度不高，不能定量檢測(cè)。
[0005]CRP是一種急性反應(yīng)蛋白，多種因素均可引起其升高，其檢測(cè)在臨床應(yīng)用相當(dāng)廣泛，包括急性感染性疾病的診斷和鑒別診斷，手術(shù)后感染的監(jiān)測(cè)；抗生素療效的觀察；病程檢測(cè)及預(yù)后判斷等。
[0006]CRP適應(yīng)癥:1、組織損傷、感染、腫瘤、心肌梗塞及一系列急慢性炎癥性疾病，如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性血管炎、多肌痛風(fēng)濕??；2、術(shù)后感染及并發(fā)癥的指標(biāo):手術(shù)后病人CRP升高，術(shù)后7 —10天CRP水平應(yīng)下降，如CRP不降低或再次升高，提示可能并發(fā)感染或血栓栓塞；3、可作為細(xì)菌性感染和病毒性感染的鑒別診斷:大多數(shù)細(xì)菌性感染會(huì)引起患者血清CRP升高，而病毒性感染則多數(shù)不升高。
[0007]現(xiàn)有技術(shù)的檢測(cè)試紙并不能同時(shí)檢測(cè)PCT和CRP，給臨床帶及診斷來不便，也不利于準(zhǔn)確診斷病因和病情。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0008]本實(shí)用新型實(shí)施例所要解決的技術(shù)問題在于，提供降鈣素原和C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)試紙，從而可方便快捷、準(zhǔn)確定量地同時(shí)檢測(cè)降鈣原PCT和C反應(yīng)蛋白CRP。
[0009]為解決上述技術(shù)問題，本實(shí)用新型提供以下技術(shù)方案:降鈣素原和C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)試紙，其為一種量子點(diǎn)標(biāo)記免疫定量檢測(cè)試紙，包括底襯以及依次搭接地粘貼于底襯上的樣品墊、過濾墊、結(jié)合墊、層析膜和吸水墊從而形成多層膜結(jié)構(gòu)，各層膜結(jié)構(gòu)之間部分重疊；所述結(jié)合墊上包被有量子點(diǎn)標(biāo)記免疫的涂層；所述層析膜上包被有兩條檢測(cè)線即一條降鈣素原檢測(cè)線和一條C反應(yīng)蛋白檢測(cè)線、以及位于兩條檢測(cè)線外側(cè)的一條質(zhì)控線。
[0010]進(jìn)一步地，所述結(jié)合墊上包被有量子點(diǎn)標(biāo)記免疫的涂層是指包被有含量子點(diǎn)標(biāo)記的降鈣素原特異性抗體1、量子點(diǎn)標(biāo)記的C反應(yīng)蛋白特異性抗體1、以及量子點(diǎn)標(biāo)記的兔IgG共三種量子點(diǎn)的免疫涂層；所述層析膜上包被的降鈣素原檢測(cè)線是一條包被降鈣素原特異性抗體II的檢測(cè)線，C反應(yīng)蛋白檢測(cè)線是一條包被C反應(yīng)蛋白特異性抗體II的檢測(cè)線，質(zhì)控線是包被羊抗兔IgG抗體的質(zhì)控線。
[0011]進(jìn)一步地，所述三種量子點(diǎn)的發(fā)射熒光波長(zhǎng)均大于550nm，且三種量子點(diǎn)波長(zhǎng)范圍不相同；所述質(zhì)控線位于所述兩檢測(cè)線的后側(cè)。
[0012]所述待測(cè)物結(jié)合在檢測(cè)線上后，降鈣素原檢測(cè)線的發(fā)射熒光波長(zhǎng)為620-650nm，C反應(yīng)蛋白檢測(cè)線的發(fā)射熒光波長(zhǎng)為590-620nm，所述質(zhì)控線的發(fā)射熒光波長(zhǎng)為550_590nm ；位于兩條檢測(cè)線外側(cè)。
[0013]所述底襯為塑膠；所述樣品墊是一種玻纖膜或聚酯膜，為待檢樣品收集區(qū)，其前端搭接粘貼于底襯前端上；所述過濾墊為紅細(xì)胞過濾膜，過濾墊位于樣品墊與底襯之間，其前端搭接粘貼于底襯上，后端自樣品墊后端下方延伸出一定長(zhǎng)度；所述結(jié)合墊的基體為玻璃纖維素膜或聚酯膜，結(jié)合墊位于過濾墊與底襯之間，其前端搭接粘貼于底襯上，后端自過濾墊后端下方延伸出一定長(zhǎng)度；所述層析膜為硝酸纖維素膜，其前端插設(shè)于結(jié)合墊與底襯之間且搭接粘貼于底襯上，并平鋪至底襯的后端；所述吸水墊為吸水玻纖膜，其搭接于底襯后端覆蓋于層析膜后端上一定長(zhǎng)度。
[0014]進(jìn)一步包括外包裝，所述外包裝上設(shè)置有加樣孔、觀察窗；所述加樣孔后方正對(duì)所述樣品墊的正面區(qū)域，觀察窗后方正對(duì)層析膜的正面區(qū)域且使得檢測(cè)線和質(zhì)控線至少部分長(zhǎng)度位于觀察窗正后方。
[0015]所述外包裝上進(jìn)一步設(shè)置有地預(yù)潤(rùn)孔；所述預(yù)潤(rùn)孔正對(duì)層析膜的正面區(qū)域。
[0016]所述試紙?bào)w呈長(zhǎng)條狀，相應(yīng)地，外包裝也呈長(zhǎng)條狀。
[0017]所述樣品墊、過濾墊、結(jié)合墊長(zhǎng)度均為7mm，寬度4mm ;層析膜、吸水墊長(zhǎng)度為15mm，寬度為4_ ;樣品墊、過濾墊、結(jié)合墊、層析膜之間的重疊區(qū)域?yàn)?mm長(zhǎng)度，層析膜和吸水墊之間的重疊區(qū)域?yàn)? mm長(zhǎng)度。
[0018]所述層析膜上檢測(cè)線和質(zhì)控線的寬度為1.5mm，間隔為5mm。
[0019]所述試紙對(duì)于降鈣素原和C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)下限分別為0.5ng/mL和50ng/mL。
[0020]本實(shí)用新型的檢測(cè)試紙可同時(shí)檢測(cè)待測(cè)血樣中的PCT和CRP，給臨床帶來及大的便利，減少多次取樣；有利于準(zhǔn)確診斷病情。通過同時(shí)檢測(cè)CRP和PCT，可以區(qū)分是急慢性炎癥、細(xì)菌性感染，局部細(xì)菌性感染、和病毒性感染等情況，并評(píng)估相關(guān)疾病的嚴(yán)重性。
【附圖說明】
[0021]圖1是本實(shí)用新型實(shí)施例的檢測(cè)試紙帶有外包殼的正面結(jié)構(gòu)示意圖。
[0022]圖2是本實(shí)用新型實(shí)施例的檢測(cè)試紙去掉外殼后的側(cè)面剖視圖。
[0023]圖3是本實(shí)用新型實(shí)施例的檢測(cè)試紙去掉外殼后的正面結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0024]請(qǐng)參照?qǐng)D1~圖3，本實(shí)用新型提供一種同時(shí)定量檢測(cè)降鈣素原和C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)試紙10，其為一種量子點(diǎn)標(biāo)記免疫定量檢測(cè)試紙，大致呈長(zhǎng)條狀，外層進(jìn)一步設(shè)置有外包裝20。
[0025]所述試紙10包括底襯I以及依次搭接地粘貼在底襯I上的樣品墊2、過濾墊3、結(jié)合墊4、層析膜5和吸水墊6等多層膜結(jié)構(gòu)，且各層膜結(jié)構(gòu)之間部分重疊。其中，結(jié)合墊4上包被有量子點(diǎn)標(biāo)記免疫的涂層，具體是指包被有量子點(diǎn)標(biāo)記的降鈣素原特異性抗體I (發(fā)射熒光波長(zhǎng)620-650nm)、量子點(diǎn)標(biāo)記的C反應(yīng)蛋白特異性抗體I (發(fā)射熒光波長(zhǎng)為590-620nm)，以及量子點(diǎn)標(biāo)記的兔IgG (發(fā)射熒光波長(zhǎng)550_590nm)。層析膜5上包被有一條降鈣素原特異性抗體II的檢測(cè)線8、一條包被C反應(yīng)蛋白特異性抗體II的檢測(cè)線9，以及在兩條檢測(cè)線后側(cè)的一條包被羊抗兔IgG抗體的質(zhì)控線7。
[0026]降鈣素原的特異性抗體1、II可以分別為:抗抗鈣素單克隆抗體和抗降鈣素多克隆抗體。當(dāng)然，配對(duì)的降鈣素原特異性抗體1、II只要可分別識(shí)別抗原的不同位點(diǎn)即可，并不限于抗抗鈣素單克隆抗體和抗降鈣素多克隆抗體。
[0027]同樣地，配對(duì)的C反應(yīng)蛋白特異性抗體1、II為兩種可識(shí)別抗原不同位點(diǎn)的抗體。
[0028]其中，上述外包裝20上對(duì)應(yīng)于該試紙10適當(dāng)位置設(shè)置有加樣孔21、觀察窗22以及預(yù)潤(rùn)孔23。所述加樣孔21以及預(yù)潤(rùn)孔23為貫穿外包裝20的通孔，以利于待測(cè)血清、血漿或全血樣本滴加到加樣孔21后滲至位于其正后方的試紙10的樣品墊2，以及自預(yù)潤(rùn)孔23中滴加的緩沖液滲透至其正后方的試紙10的層析膜5。通常設(shè)計(jì)中，所述加樣孔21以及預(yù)潤(rùn)孔23為圓形或橢圓形，當(dāng)然其它形狀也可適用。所述觀察窗22為透明窗體，或者可以直接設(shè)置為通孔，以通過觀察窗22可以讀取檢測(cè)結(jié)果，一般設(shè)計(jì)中，該觀察窗22為長(zhǎng)方形，且位于加樣孔21及預(yù)潤(rùn)孔23之間。可以理解，該觀察窗22也可設(shè)計(jì)為其它形狀，其位置及面積與位于其正后方的試紙10上層析膜5的檢測(cè)線8、9以及一條質(zhì)控線7相對(duì)應(yīng)。
[0029]底襯I為低熒光特性，承載前述各層膜結(jié)構(gòu)，其根據(jù)試紙10的形狀對(duì)應(yīng)裁剪而成，如本實(shí)施例為長(zhǎng)條形。
[0030]樣品墊2是一種玻纖膜或聚酯膜，為待檢樣品收集區(qū)，其前端搭接粘貼于底襯I前端上，過濾墊3夾設(shè)于樣品墊2與底襯I之間，且靠近樣品墊2后端。
[0031]過濾墊3為紅細(xì)胞過濾膜，作用是濾過紅細(xì)胞。紅細(xì)胞過濾膜3的設(shè)置使得試紙10能適用于測(cè)量血清、血漿或全血等各種血樣中的降鈣素原以及C反應(yīng)蛋白，適用性提高。過濾墊3位于樣品墊2與底襯I之間，其前端搭接粘貼于底襯I上，后端自樣品墊2后端下方延伸出一定長(zhǎng)度。
[0032]結(jié)合墊4的基體為玻璃纖維素膜或聚酯膜，含有量子點(diǎn)標(biāo)記的抗抗鈣素單克隆抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的C反應(yīng)蛋白特異性抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的兔IgG的混合物涂層涂覆于該基體上從而形成結(jié)合墊4上包被有量子點(diǎn)標(biāo)記的抗抗鈣素單克隆抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的C反應(yīng)蛋白特異性抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的兔IgG。其中，量子點(diǎn)標(biāo)記的降鈣素原特異性抗體I的發(fā)射波長(zhǎng)為620-650nm，量子點(diǎn)標(biāo)記的C反應(yīng)蛋白特異性抗體I的發(fā)射熒光波長(zhǎng)為590_620nm，量子點(diǎn)標(biāo)記的兔IgG的發(fā)射波長(zhǎng)為550-590nm。結(jié)合墊4位于過濾墊3與底襯I之間，其前端搭接粘貼于底襯I上，后端