測ST2和NT-proBNP的試紙的一種優(yōu)選實(shí)施方 式的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0019] 其中，1:支撐墊片，2:硝酸纖維素膜，3:吸水墊，4:偶合物墊片，5:樣本墊片，6: 第一固定部件，7:第二固定部件，8:第一檢測線，9:第二檢測線，10:控制線。
[0020] 圖2是本實(shí)用新型所述快速定量檢測ST2和NT-proBNP的試紙盒的一種優(yōu)選實(shí)施 方式的示圖。
[0021] 其中，3:吸水墊，5:樣本墊片，8:第一檢測線，9:第二檢測線，10:控制線，11:外 殼。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型所述快速定量檢測ST2和NT-proBNP的試紙或試紙盒 進(jìn)行詳細(xì)說明，不能理解為是對(duì)本實(shí)用新型的限制。以下實(shí)施例中所使用的材料和試劑除 特別說明外，均為普通市售。
[0023] 【實(shí)施例1】制備快速定量檢測ST2和NT-proBNP的試紙
[0024] 如圖1所示的膠體金試紙結(jié)構(gòu)，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維 素膜2,所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3,另一端上方層疊連接偶合物墊片 4,所述偶合物墊片遠(yuǎn)離硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接樣本墊片5,所述樣本墊片另 一端部的下方粘接第一固定部件6,優(yōu)選雙面膠，上方粘接第二固定部件7,優(yōu)選單面膠，其 特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位第一檢測線8和第二檢測線9分別包被有ST2和 NT-proBNP的單克隆或多克隆抗體，在所述第一檢測線和第二檢測線的兩邊分別設(shè)有控制 線10,所述偶合物墊片4上涂布有金標(biāo)記的ST2和NT-proBNP抗體以及控制線偶合物。
[0025] 所述控制線10包被有抗DNP抗體，所述控制線偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠體金。
[0026] 其中，硝酸纖維素膜2在試紙中用于固定包被抗體，同時(shí)也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處； 第一檢測線8和第二檢測線9是分別將ST2和NT-proBNP抗體使用1*PBS、甲醇等緩沖液稀 釋到0. 5mg/ml的濃度，取lul/cm劃線于所述硝酸纖維素膜1上，干燥，即得；控制線10是 將抗DNP抗體使用1*PBS、甲醇等緩沖液稀釋到0. 5mg/ml的濃度，取lul/cm劃線于所述硝 酸纖維素膜1上，干燥，即得。
[0027] 其中，所述偶合物墊片4的原材料為玻璃纖維濾膜，將用于制備偶合物墊片的 玻璃纖維濾膜放入預(yù)封閉緩沖液（包含0. 1-1 %的酪蛋白，0. 5-5 %的牛血清白蛋白、 0. 005-0. 5 %的硼酸、0. 01-0. 2 %的PEG)中浸泡5分鐘后取出，干燥，用Biodot包膜儀器 將金標(biāo)記的IGFBP-7和TMP-2單克隆抗體或多克隆抗體以及控制線偶合物涂布在偶合物 墊片4上，涂布量是lul/mm，干燥，即得。優(yōu)選地，所述偶合物墊片4的預(yù)封閉緩沖液包含 0.8%的酪蛋白，4%的牛血清白蛋白，0.007%的硼酸，0. 1%的PEG。
[0028] 其中，所述樣本墊片5可對(duì)液態(tài)樣品起到初步過濾作用。將樣本墊片用141封閉液 (包含：〇. 1-1 %的Tris，0. 1-1 %的酪蛋白）浸泡5分鐘后，干燥，即得。優(yōu)選地，所述141 封閉液包含：0.3%的Tris，0.8%的酪蛋白。
[0029] 將上述各組成部件按圖1所示結(jié)構(gòu)粘貼在支撐墊片1上，獲得快速定量檢測ST2 和NT-proBNP的試紙。
[0030] 【實(shí)施例2】用本實(shí)用新型所述試紙快速定量檢測ST2和NT-proBNP
[0031] 取本實(shí)用新型優(yōu)選的一種快速定量檢測ST2和NT-proBNP的試紙，如圖1所示，所 述試紙包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2,所述硝酸纖維素膜的一端 上方層疊連接吸水墊3,另一端上方層疊連接偶合物墊片4,所述偶合物墊片遠(yuǎn)離硝酸纖維 素膜1的一端上方層疊連接樣本墊片5,所述樣本墊片另一端部的下方粘接第一固定部件 6,優(yōu)選雙面膠，上方粘接第二固定部件7,優(yōu)選單面膠，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中 間部位第一檢測線8和第二檢測線9分別包被有抗ST2和NT-proBNP的單克隆或多克隆抗 體，在所述第一檢測線和第二檢測線的兩邊分別設(shè)有控制線10,所述偶合物墊片4上涂布 有金標(biāo)記的ST2和NT-proBNP抗體以及控制線偶合物。優(yōu)選地，所述控制線10包被有抗DNP 抗體，所述控制線偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠體金。按以下步驟進(jìn)行檢測：1)采集的病人 尿液樣本，如低溫保存樣本需恢復(fù)至室溫。2)將待測樣品加入樣本墊片5上，反應(yīng)。3)判 讀，將所述試紙置于多功能免疫檢測儀，SSJ-2或MINI(瑞萊生物工程（深圳）有限公司） 中判定結(jié)果。
[0032] 【實(shí)施例3】用本實(shí)用新型所述試紙盒快速定量檢測ST2和NT-proBNP
[0033] 取本實(shí)用新型優(yōu)選的一種快速定量檢測ST2和NT-proBNP的試紙盒，如圖1和圖 2所示，所述試紙包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2,所述硝酸纖維素 膜的一端連接吸水墊3,另一端連接偶合物墊片4,所述偶合物墊片連接樣本墊片5,所述樣 本墊片另一端部的下方粘接第一固定部件6,優(yōu)選雙面膠，上方粘接第二固定部件7,優(yōu)選 單面膠，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位第一檢測線8和第二檢測線9分別包被 有抗ST2和NT-proBNP的單克隆或多克隆抗體，在所述第一檢測線和第二檢測線的兩邊分 別設(shè)有控制線10,所述偶合物墊4上涂布有金標(biāo)記的ST2和NT-proBNP抗體以及控制線偶 合物。優(yōu)選地，所述控制線10包被有抗DNP抗體，所述控制線偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠 體金。所述試紙還包括一外殼11，所述外殼包裹所述試紙，露出樣本墊片5、硝酸纖維素膜 2上的第一檢測線8、第二檢測線9和兩條控制線10、以及吸水墊3。按以下步驟進(jìn)行檢測： 1)采集的病人尿液樣本，如低溫保存樣本需恢復(fù)至室溫。2)將待測樣品加入樣本墊片5上， 反應(yīng)。3)判讀，將所述試紙置于多功能免疫檢測儀，SSJ-2或MINI(瑞萊生物工程（深圳） 有限公司）中判定結(jié)果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種快速定量檢測ST2和NT-proBNP聯(lián)檢的試紙，包括支撐墊片（I)，位于所述支 撐墊片上的硝酸纖維素膜（2)，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊（3)，另一端 上方層疊連接偶合物墊片（4)，所述偶合物墊片一端上方層疊連接樣本墊片（5)，所述樣本 墊片另一端部的下方設(shè)有第一固定部件（6)，上方設(shè)有第二固定部件（7)，其特征在于，所 述硝酸纖維素膜（2)中間部位第一檢測線（8)和第二檢測線（9)分別包被有抗ST2或抗 NT-proBNP的單克隆或多克隆抗體，在所述第一檢測線和第二檢測線的兩邊分別設(shè)有控制 線（10)，所述偶合物墊片（4)上涂布有金標(biāo)記的ST2和NT-proBNP抗體以及控制線偶合物。
2. 如權(quán)利要求1所述的試紙，其特征在于，所述控制線（10)包被有抗DNP抗體，所述控 制線偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠體金。
3. 如權(quán)利要求1所述的試紙，其特征在于，所述第一固定部件（6)為雙面膠，第二固定 部件（7)為單面膠。
4. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的試紙，其特征在于，所述試紙外還包括一外殼（11)， 所述外殼包裹所述試紙，露出樣本墊片（5)、硝酸纖維素膜（2)上的第一檢測線（8)、第二檢 測線（9)、兩條控制線（10)、以及吸水墊（3)。
5. 如權(quán)利要求4所述的試紙，其特征在于，所述兩條控制線（10)與第一檢測線（8)和 第二檢測線（9)為平行設(shè)置。
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種快速定量檢測ST2和NT-proBNP聯(lián)檢的試紙，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，另一端上方層疊連接偶合物墊片4，所述偶合物墊片一端上方層疊連接樣本墊片5，所述樣本墊片另一端部的下方設(shè)有第一固定部件6，上方設(shè)有第二固定部件7，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位第一檢測線8和第二檢測線9分別包被有抗ST2或抗NT-proBNP的單克隆或多克隆抗體，在所述第一檢測線和第二檢測線的兩邊分別設(shè)有控制線10，所述偶合物墊片4上涂布有金標(biāo)記的ST2和NT-proBNP抗體以及控制線偶合物。優(yōu)選地，所述控制線9包被有抗DNP抗體，所述控制線偶合物為DNP-BSA標(biāo)記的膠體金。
【IPC分類】G01N33-68
【公開號(hào)】CN204495843
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201520184860
【發(fā)明人】趙俊平, 劉紅劍, 吳偉云, 夏宣喜
【申請(qǐng)人】瑞萊生物工程（深圳）有限公司
【公開日】2015年7月22日
【申請(qǐng)日】2015年3月30日