腎病檢測(cè)系統(tǒng)的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種腎病檢測(cè)系統(tǒng)。
【背景技術(shù)】
[0002]IgA腎病是全球原發(fā)性腎小球腎炎中最常見的類型，是我國乃至全球范圍內(nèi)最常見的慢性腎臟疾病，約占臨床全部腎活檢病例的30%?40%。
[0003]目前，IgA腎病的診斷依賴腎活檢，其基本方案為:患者呈俯臥位，穿刺針在超聲的引導(dǎo)下，于患者背部進(jìn)針，快速取出腎組織，在一系列固定和染色后，在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察腎臟本事變化情況，以診斷腎病類型和判斷預(yù)后。
[0004]然而，腎活檢是有創(chuàng)檢查，不宜反復(fù)進(jìn)行，而多數(shù)IgA腎病是進(jìn)展性疾病，因此，臨床上需要能及時(shí)反映IgA腎病病情變化的生物標(biāo)志物以診斷病情、指導(dǎo)治療和判斷預(yù)后。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0005]本實(shí)用新型提供了一種腎病檢測(cè)系統(tǒng)，以解決上述現(xiàn)有問題。
[0006]為了解決上述問題，本實(shí)用新型公開了一種腎病檢測(cè)系統(tǒng)，包括:離心管、離心機(jī)、試劑盒、搖床、計(jì)算器；其中，離心管留取晨尿；離心機(jī)將留取的晨尿進(jìn)行離心處理后，形成尿上清；使用試劑盒中的試劑將稀釋后尿上清配置為標(biāo)準(zhǔn)液；搖床孵育標(biāo)準(zhǔn)液；對(duì)孵育后的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行洗滌；計(jì)算器計(jì)算洗滌后的最終數(shù)據(jù)，獲得樣本濃度。
[0007]可選地，所述試劑盒為Human LYVE-1 ELISA Kit試劑盒，包括:96孔板I個(gè)、Wash buffer I 瓶、Standard 2 管、Assay Diluent B I 瓶、Detect1n Antibody LYVE-12管、HRP-Streptavidin concentrate I 管、TMB One-step Substrate Reagent I 并瓦、StopSolut1n I瓶、貼封紙4張。
[0008]可選地，所述試劑盒為Human HER2/ErbB2 Immunoassay試劑盒，包括:96孔板I個(gè)、Human ErbB2 Conjugate I 瓶、Human ErbB2 Standard I 瓶、Assay Diluent RDlff I 瓶、Calibrator Diluent RD5-26 concentrate I 并瓦、Wash Buffer Concentrate I 并瓦、ColorReagent A I 瓶、Color Reagent B I 瓶、Stop Solut1n I 瓶、貼封紙 4 張。
[0009]可選地，所述試劑盒為Human Ang1statin ELISA Kit試劑盒。
[0010]可選地，所述搖床為室溫?fù)u床或過夜搖床。
[0011]本實(shí)用新型具有如下有益效果:
[0012]由于是所用的樣本是非常易得的尿沉渣而不是腎組織，所以本試劑盒具有無創(chuàng)，可以反復(fù)進(jìn)行留取和測(cè)試；無禁忌癥和并發(fā)癥，安全可靠適用于所有患者；試劑盒所用的方法為目前生命科學(xué)領(lǐng)域普遍常用且十分成熟的ELISA的方法，操作簡單易行、結(jié)果可靠準(zhǔn)確，且患者無需做特殊準(zhǔn)備，留取10-15ml晨尿即可。所有結(jié)果能在24小時(shí)內(nèi)給出，與傳統(tǒng)腎活檢5-7天的時(shí)間相比，十分快速方便，臨床應(yīng)用更為廣泛。。
【附圖說明】
[0013]通過閱讀下文優(yōu)選實(shí)施方式的詳細(xì)描述，各種其他的優(yōu)點(diǎn)和益處對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將變得清楚明了。附圖僅用于示出優(yōu)選實(shí)施方式的目的，而并不認(rèn)為是對(duì)本實(shí)用新型的限制。而且在整個(gè)附圖中，用相同的參考符號(hào)表示相同的部件。在附圖中:
[0014]圖1為根據(jù)本實(shí)用新型實(shí)施例一的一種腎病檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0015]下文中將參考附圖并結(jié)合實(shí)施例來詳細(xì)說明本實(shí)用新型。需要說明的是，在不沖突的情況下，本實(shí)用新型中的實(shí)施例及實(shí)施例中的特征可以相互組合。
[0016]本實(shí)施例提供了一種腎病檢測(cè)系統(tǒng)，包括:離心管101、離心機(jī)102、試劑盒103、搖床104、計(jì)算器105。
[0017]其中，
[0018]離心管101留取晨尿；離心機(jī)102將留取的晨尿進(jìn)行離心處理后，形成尿上清；使用試劑盒103中的試劑將稀釋后尿上清配置為標(biāo)準(zhǔn)液；搖床104孵育標(biāo)準(zhǔn)液；對(duì)孵育后的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行洗滌；計(jì)算器105計(jì)算洗滌后的最終數(shù)據(jù)，獲得樣本濃度。
[0019]一種可行方案中，所述試劑盒為Human LYVE-1 ELISA Kit試劑盒，包括:96孔板I個(gè)、Wash buffer I瓶、Standard 2管、Assay Diluent B I瓶、Detect1n Antibody LYVE-12 管、HRP-Streptavidin concentrate I 管、TMB One-step Substrate Reagent I 瓶、StopSolut1n I瓶、貼封紙4張。
[0020]另一種可行方案中，所述試劑盒為Human HER2/ErbB2Immunoassay試劑盒，包括:96 孔板 I 個(gè)、Human ErbB2 Conjugate I 瓶、Human ErbB2 Standard I 瓶、Assay DiluentRDlff I 并瓦、Calibrator Diluent RD5-26 concentrate I 并瓦、Wash Buffer Concentrate I瓶、Color Reagent A I 瓶、Color Reagent B I 瓶、Stop Solut1n I 瓶、貼封紙 4 張。
[0021]再一種可行方案中，所述試劑盒為Human Ang1statin ELISA Kit試劑盒。
[0022]可選地，所述搖床為室溫?fù)u床或過夜搖床。
[0023]以下，以具體實(shí)施對(duì)本實(shí)用新型的方案進(jìn)行說明:
[0024]1、使用 Human LYVE-1 ELISA Kit (RayB1tech 公司)試劑盒:內(nèi)含 96 孔板(已包被 LYVE-1 抗體)I 個(gè)、Wash buffer I 瓶、Standard 2 管、Assay Diluent B I 瓶、Detect1nAntibody LYVE-12 管、HRP-Streptavidin concentrate I 管、TMB One-step SubstrateReagent I 瓶、Stop Solut1n I 瓶、貼封紙 4 張。
[0025]上述各基因的命名均為公認(rèn)的命名，均為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。
[0026]具體實(shí)施方案:
[0027](I)尿液的收集:患者腎穿前或腎穿后I周后(無明顯出血等合并癥)，用無菌50ml離心管留取10-15ml晨尿，放入冰盒或4°C運(yùn)輸回實(shí)驗(yàn)室。
[0028](2)尿液的處理:將10-15ml晨尿放入SIGMA 3-18K離心機(jī)離心(4 °C，3000gX30min)。將離心后的尿上清小心轉(zhuǎn)移至新的無菌離心管中，棄掉尿沉渣。
[0029](3)將試劑和標(biāo)本置于室溫下融化，Assay Diluent B用新鮮去離子水5倍稀釋；Wash buffer用新鮮去離子水20倍稀釋；向Detect1n Antibody LYVE-1管中加入100 μ IAssay Diluent B，上下顛倒混勾，使用時(shí)80倍稀釋。
[0030](4)取潔凈無菌的1.5ml EP管8支，分別標(biāo)記:①2000pg/ml、②800pg/ml、③ 320pg/ml、④ 128pg/ml、⑤ 51.2pg/ml、⑥ 20.48pg/ml、⑦ 8.19pg/ml、⑧ Opg/ml，第①個(gè)EP 管加入960 μ I Assay Diluent B，其余EP 管分別加入 300 μ I Assay Diluent B，配置標(biāo)準(zhǔn)液。需配制的標(biāo)準(zhǔn)液的濃度梯度如EP管所標(biāo)。
[0031](5)每孔加入100 μ I配置好的Standard標(biāo)準(zhǔn)品或尿上清(復(fù)孔)，用貼封紙覆蓋，室溫?fù)u床孵育2.5小時(shí)或者4°C過夜搖床孵育。
[0032](6)洗滌:翻轉(zhuǎn)傾倒試管內(nèi)液體后，倒扣在吸水紙上，輕扣孔板底部；每孔加入300 μ I Wash Buffer，適當(dāng)間隔45s，后翻轉(zhuǎn)倒出液體，共重復(fù)4次。最后一次洗滌后，倒扣在吸水紙上，盡量拍干。
[0033](7)每孔加100 μ I Detect1n Antibody LYVE-1，用新的貼封紙覆蓋，室溫?fù)u床孵育I小時(shí)。
[0034](8)洗滌同(6)。
[0035](9)每孔加 100 μ I HRP-Streptavidin solut1n (HRP-Streptavidinconcentrate200倍稀釋)，室溫?fù)u床孵育45分鐘。
[0036](10)洗滌同(6)
[0037](11)每孔加 100 μ I TMB One-step Substrate Reagent，避光，室溫?fù)u床孵育 30分鐘。
[0038](12)每孔加50 μ I終止液，立即酶標(biāo)儀450nm波長檢測(cè)OD值，并導(dǎo)出數(shù)據(jù)Word。
[0039](13)按照標(biāo)準(zhǔn)濃度梯度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)生成的線性函數(shù)，計(jì)算各樣本濃度。
[0040]2、使用 Human HER2/ErbB2 Immunoassay (R&D Systems 公司)試劑盒:內(nèi)含 ％ 孔板(已包被 HER2/ErbB2 抗體)I 個(gè)、Human ErbB2 Conjugate I 瓶、Human ErbB2 StandardI 瓶、Assay Diluent RDlff I 瓶、Calibrator Diluent RD5-26 concentrate I 瓶、WashBuffer Concentrate I 并瓦、Color Reagent A I 并瓦、Color Reagent B I 并瓦、Stop Solut1nI瓶、貼封紙4張。
[0041]上述各基因的命名均為公認(rèn)的命名，均為本領(lǐng)域技術(shù)人員