一種降鈣素原（pct）定量檢測(cè)試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及檢測(cè)試劑盒，具體涉及一種降鈣素原(PCT)定量檢測(cè)試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，PCT的檢測(cè)方法較多，不僅可以定性亦可以做到定量檢測(cè)。常用的方法有下述幾種:放射免疫分析法、化學(xué)發(fā)光法、電化學(xué)發(fā)光法、透射免疫濁度法、干式免疫熒光法及膠體金比色法。
[0003]放射免疫分析法利用人工合成的多克隆抗體特異地識(shí)別和連接合成氨基酸降鈣素原。該法檢測(cè)耗時(shí)長(19?22h)，而且有放射性元素的污染，使用受到限制。化學(xué)發(fā)光法(ILMA)運(yùn)用雙單克隆抗體(降鈣素原抗體和抗降鈣素原抗體)，分別與PCT分子結(jié)合，可排除交叉反應(yīng)。但該方法操作費(fèi)時(shí)，操作人員必須具備專門的操作技能，2h后才可以出結(jié)果。電化學(xué)發(fā)光法靈敏度高、線性范圍寬、適用面廣，但電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定需要專門的儀器及配套試劑，且多為進(jìn)口，成本較為昂貴，在基層實(shí)驗(yàn)室很難開展。透射免疫濁度法是將樣品中的PCT與試劑中的PCT單克隆抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)，使反應(yīng)液濁度增加，并在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液濁度與所加入抗原的量呈線性關(guān)系。但該方法準(zhǔn)確度低。干式免疫熒光法運(yùn)用免疫層析技術(shù)，將熒光標(biāo)記的降鈣素原單克隆抗體包被于試紙條上，檢測(cè)樣本與試紙條上的標(biāo)記抗體混合，根據(jù)熒光抗體的信號(hào)強(qiáng)度測(cè)量降鈣素原的含量。此方法制備簡單，操作成本低，但由于標(biāo)記抗體與抗原的結(jié)合為固相反應(yīng)，使其反應(yīng)不夠充分，活性較差，影響檢測(cè)結(jié)果。膠體金比色法采用膠體金技術(shù)，包括膠體金標(biāo)記的抗降鈣素原的單克隆抗體和用作包被的抗降鈣素原多克隆抗體，當(dāng)標(biāo)本(血清或血漿)加入標(biāo)本孔，金標(biāo)單克隆抗體與標(biāo)本中的PCT結(jié)合，形成金標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物。該法具有快速簡便，易觀察的特點(diǎn)，但無法準(zhǔn)確測(cè)定PCT含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種降鈣素原(PCT)定量檢測(cè)試劑盒。
[0005]本實(shí)用新型是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種降鈣素原(PCT)定量檢測(cè)試劑盒，包括檢測(cè)緩沖液、檢測(cè)板和ID芯片，其特征是:所述檢測(cè)緩沖液為熒光染料標(biāo)記的PCT單克隆抗體；所述檢測(cè)板包括外包裝板塊和試紙條；外包裝板塊分為加樣區(qū)、反應(yīng)區(qū)和吸水區(qū)；所述試紙條為多層膜結(jié)構(gòu)且包被有PCT單克隆抗體和羊抗鼠抗體。
[0006]進(jìn)一步的，所述試紙條的多層膜結(jié)構(gòu)包括底板，以及在底板上依次搭接地粘貼玻璃纖維、固相抗體反應(yīng)膜和上端吸水紙；所述多層膜的各層膜之間緊密相連且至少部分重置。
[0007]進(jìn)一步的，加樣區(qū)對(duì)應(yīng)試紙條的玻璃纖維；反應(yīng)區(qū)對(duì)應(yīng)試紙條的固相抗體反應(yīng)膜；為硝酸纖維素膜上包被檢測(cè)線和質(zhì)控線；所述檢測(cè)線包被與標(biāo)記抗體配對(duì)的PCT單克隆抗體；所述質(zhì)控線包被羊抗鼠抗體；吸水區(qū)對(duì)應(yīng)試紙條的上端吸水紙。
[0008]該實(shí)用新型的有益之處是，本實(shí)用新型檢測(cè)原理應(yīng)用免疫熒光雙抗體夾心法，檢測(cè)緩沖液中含有熒光染料標(biāo)記的PCT單克隆抗體，試紙條的檢測(cè)線包被與標(biāo)記抗體配對(duì)的PCT單克隆抗體，標(biāo)記抗體與包被抗體為協(xié)同抗體，能與抗原的多個(gè)位點(diǎn)結(jié)合，形成雙抗體夾心復(fù)合物，配對(duì)抗體與樣本中的抗原緊密的結(jié)合在一起，可排除因檢測(cè)樣本中各種各樣蛋白質(zhì)的非特異性吸附產(chǎn)生的干擾，所形成的雙抗體夾心免疫復(fù)合物穩(wěn)定性好，具有靈敏度高，特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。并且檢測(cè)緩沖液中以新型熒光染料替代傳統(tǒng)的膠體金、量子點(diǎn)和熒光顆粒，進(jìn)一步提高了檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。為臨床診斷提供了可靠的依據(jù)。本實(shí)用新型以液相反應(yīng)取代固相反應(yīng)，與傳統(tǒng)的試紙條檢測(cè)方法相比，液相反應(yīng)具有材料混合均一，穩(wěn)定性好，反應(yīng)活性高等優(yōu)勢(shì)，增加檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。綜上所述，本實(shí)用新型具有檢測(cè)靈敏度高，準(zhǔn)確性好，可定量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說明】
[0009]圖1是本實(shí)用新型實(shí)施例的試紙條與外包裝板塊的整體結(jié)構(gòu)示意圖；
[0010]圖2是本實(shí)用新型實(shí)施例的試紙條與外包裝板塊的裝配圖。
[0011 ] 圖中，1玻璃纖維，2硝酸纖維素膜，3上端吸水紙，4底板，5檢測(cè)線，6質(zhì)控線，7試紙條，8加樣區(qū)，9反應(yīng)區(qū)，10吸水區(qū)，11外包裝板塊。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面，結(jié)合附圖以及【具體實(shí)施方式】，對(duì)本實(shí)用新型做進(jìn)一步描述:
[0013]本實(shí)用新型提供了一種可定量檢測(cè)降鈣素原的試劑盒，其利用具有優(yōu)良特性的新型熒光染料作為標(biāo)記物，結(jié)合免疫熒光雙抗體夾心法，實(shí)現(xiàn)血清、血漿的降鈣素原的檢測(cè)。
[0014]如圖1所示，一種降鈣素原(PCT)定量檢測(cè)試劑盒，包括檢測(cè)緩沖液、檢測(cè)板和ID芯片。所述檢測(cè)緩沖液為熒光染料標(biāo)記的PCT單克隆抗體；所述檢測(cè)板包括外包裝板塊11和試紙條7 ;外包裝板塊11分為加樣區(qū)8、反應(yīng)區(qū)9和吸水區(qū)10 ;所述試紙條7為多層膜結(jié)構(gòu)且包被有PCT單克隆抗體和羊抗鼠抗體。所述ID芯片已確定好了線性，由該試劑盒配套的免疫熒光定量分析儀檢測(cè)系列質(zhì)控品得到。
[0015]本實(shí)用新型檢測(cè)降鈣素原的檢測(cè)板呈長條狀，包括外包裝板塊11，以及設(shè)置與外包裝板塊11內(nèi)部的試紙條7。
[0016]所述試紙條7包括底板4以及依次搭接地粘貼于底板4上的玻璃纖維1、硝酸纖維素膜2和上端吸水紙3等各層膜結(jié)構(gòu)，各層之間緊密相連且部分重疊。
[0017]底板4為低熒光特性，承載前述各種膜結(jié)構(gòu)，其根據(jù)試紙條7的形狀對(duì)應(yīng)裁剪而成，如本實(shí)施例為長條形。
[0018]玻璃纖維1為待檢樣品收集區(qū)，其前端搭接粘貼于底板4前端上，后端搭接覆蓋于硝酸纖維素膜2前端。
[0019]硝酸纖維素膜2是一種低熒光特性膜，該膜上劃設(shè)有兩條平行帶5、6，兩平行帶5、6沿硝酸纖維素膜2的寬度方向設(shè)置并間隔一定距離，且具有一定深度。硝酸纖維素膜2的前端搭設(shè)于玻璃纖維1與底板4上端吸水紙3之間且搭接粘貼于底板4上。
[0020]硝酸纖維素膜2包含一條包被有PCT單克隆抗體的檢測(cè)線5和一條包被有羊抗鼠抗體的質(zhì)控線6。該檢測(cè)線5和質(zhì)控線6分別為對(duì)應(yīng)包被在硝酸纖維素膜2的兩條平行帶。
[0021]上端吸水紙3對(duì)應(yīng)板塊的吸水區(qū)，其前端覆蓋于硝酸纖維素膜2后端一定長度，其后端彳合接于底板4后端。
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