一種草綠鹽角草細胞精華素及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種抗衰老的護膚品，具體為草綠鹽角草提取物細胞精華素及其制備 方法。屬于化妝品技術領域。
【背景技術】
[0002] 在皮膚抗衰老的化妝品，有多種方法，比如通過激素、植物提取物等配方對皮膚進 行去皺處理，然而這些方法不能從根本上達到抗衰老的作用，激素使用對人體有危害，并且 只能取得短期效果，長期使用加劇皮膚老化，而植物提取物的效果不明顯，需要長期使用。
[0003] 隨著生活水平的不斷提高，人們對健康尤其是皮膚的保養(yǎng)越來越受到重視。皮膚 組織是人體最大組織器官，覆蓋在人體表面，阻隔自然界一切有害物質(zhì)對生命機體產(chǎn)生的 損害作用。但是，隨著年齡的增加，皮膚組織器官的功能逐漸老化，從美學觀點看，嚴重影響 人們對生命的熱情；從生理學的角度看，影響人體內(nèi)部器官的有效保護。皮膚老化的主要原 因是，在新陳代謝過程中需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)數(shù)量和質(zhì)量不能從飲食中得到生理性滿足， 從而導致生命細胞核內(nèi)的生命遺傳物質(zhì)載體DNA的合成原料的數(shù)量逐漸減少，最終導致其 調(diào)空合成的蛋白質(zhì)種類和數(shù)量減少，細胞代謝能力隨之下降，壽命相對縮短。皮膚過度衰老 現(xiàn)象的表現(xiàn)是：皮膚松弛、皺紋增多加深、毛孔增大、皮膚紋理變粗變亂、皮膚彈性下降等。 目前，市面上用于護膚的產(chǎn)品大多保濕，功效有限。
[0004] 人類臍帶間充質(zhì)干細胞（humanumbilicalmesenchymalstemcells，HUMSC)和 胎盤干細胞（placentalstemcell，PSC)來源于婦女分娩時的廢棄的臍帶和胎盤組織。 臍帶內(nèi)含二條臍動脈、一條臍靜脈，在動靜脈之間含有特殊的胚胎粘液樣結(jié)締組織-華爾 通氏膠（WhartonpsJelly)，從華爾通氏膠分離得到的基質(zhì)細胞即為人臍帶間充質(zhì)干細胞 (humanumbilicalmesenchymalstemcell，HUMSC)。胎盤是胎兒從母體吸取營養(yǎng)的場所， 分為羊膜層、絨毛層及脫基底膜層。HUMSC和PSC具有多向分化潛能和可塑性，可分化成三 個胚層來源的組織細胞，如成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、胰島細胞、神經(jīng)細胞、心肌細胞、 生殖細胞（如精原細胞、卵母細胞等），并能分泌豐富的營養(yǎng)因子。這些豐富的營養(yǎng)因子不 僅可以延緩皮膚干細胞的衰老，還可以促進表皮干細胞和毛囊干細胞增殖，對保持皮膚彈 性和健康具有重要作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對上述技術問題，本發(fā)明提供一種效果明顯、療效短并且無副作用的抗衰老護 膚品，具體技術方案為：
[0006] 本發(fā)明產(chǎn)品的草綠鹽角草提取物細胞精華素，包括以下原料按照重量份比例混 合：細胞提取物28~32 %，草綠鹽角草提取物3-5 %，甘油3~7 %，乳酸0. 2~0. 8 %，海 藻糖0. 7~1. 3%，維生素A醋酸酯0. 2~0. 5%，維生素E醋酸酯0. 1~0. 3%，4'，6, 7-三 羥基異黃酮0. 1~0. 3 %，二氧化鈦0. 5~0. 7 %，黃原膠0. 01~0. 02 %，三乙醇胺0. 02~ 0. 03%，肉豆蔻酸異丙酯2~4%，丙二醇0. 8~1%，透明質(zhì)酸鈉0. 02~0. 07%，防腐劑 0. 8~I. 2%，其余為去離子水；所述的細胞提取物為干細胞提取物；所述的干細胞提取物 提取物為胎盤干細胞提取物或者植物干細胞提取物。
[0007] 甘油、海藻糖、維生素A醋酸酯、維生素E醋酸酯、4'，6, 7-三羥基異黃酮、透明質(zhì)酸 鈉、黃原膠、三乙醇胺、肉豆蔻酸異丙酯、丙二醇、透明質(zhì)酸鈉、防腐劑和去離子水混合加熱 至75~80 °C，均質(zhì)乳化；
[0008] 降溫至室溫后，加入乳酸、氧化鈦、干細胞提取物，攪拌均勻后真空脫氣。
[0009] 優(yōu)選方案為：包括以下原料按照重量份比例混合：細胞提取物30%，草綠鹽角草 提取物4 %，甘油5 %，乳酸0. 5 %，海藻糖1 %，維生素A醋酸酯0. 3 %，維生素E醋酸酯 0. 2 %，4'，6，7-三羥基異黃酮0. 2 %，二氧化鈦0. 6 %，黃原膠0. 015 %，三乙醇胺0. 025 %， 肉豆蔻酸異丙酯3%，丙二醇1 %，透明質(zhì)酸鈉0. 05%，防腐劑1 %，其余為去離子水。
[0010] 其中，草綠鹽角草（SALICORNIAHERBACEA)提取物的制備方法為：
[0011] 其中，草綠鹽角草提取物制備方法為：按照重量比為1比8-10的重量份比例將草 綠鹽角草與去離子水混合，保持在0-4tC的溫度浸泡2小時到24小時，破碎草綠鹽至懸濁 液，然后按照〇. 2-0. 4升/千克的比例加入殼聚糖；再加入質(zhì)量比為3%~6%乙醇，靜置2 小時；取109AB-8大孔樹脂裝柱5份，在PH6-7下，提取液濃度在0. 1-0. 2克每升時取50ml 上柱，上樣流速為2BV/h，先用去離子水澄清，再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脫得 到提取物。其中，提取效果更好的方法是在用去離子水浸泡草綠鹽角草的時候加入與草綠 鹽角草等重量份的冬青油，這個是本發(fā)明經(jīng)過多次試驗發(fā)現(xiàn)的，經(jīng)過發(fā)明人研究，冬青油是 水溶性的，可以將草綠鹽角草中的水溶性成份進一步溶出。這是由于冬青油具有皮膚血管 擴張、膚色發(fā)紅等刺激反應的作用，在于草綠鹽角草共同作用的時候產(chǎn)生協(xié)同作用，可以使 得本發(fā)明的產(chǎn)品更進一步使得皮膚吸收，迅速改變?nèi)梭w皮膚狀態(tài)。另外，本發(fā)明的發(fā)明人驚 奇地發(fā)現(xiàn)，草綠鹽角草提取物單獨使用的時候效果并不是十分理想，但是與干細胞提取物 混合后的效果卻非常好，經(jīng)過單獨干細胞配料、草綠鹽角草配料的化妝品與兩者混合使用 的化妝品的對比發(fā)現(xiàn)，在皮膚彈性、皺紋減少和皮膚光嫩方面，具有非常大的進步。
[0012] 本發(fā)明的干細胞提取物優(yōu)選為植物干細胞提取物；
[0013] 植物干細胞（Plantstemcell)包含有關于植物發(fā)育和生長的所有程式，擁有永 恒生命力的細胞（immortalcell)，是植物生命力的根源（origin)。植物干細胞存在于被 稱為分生組織的特殊構造內(nèi)，具有非常驚人的再生能力。這些使得植物可以在數(shù)百年間不 斷生長，并生成全新的器官?！蹲匀弧?15,715-754(2002)本發(fā)明采用的是商購獲得的蘋果 干細胞、番茄干細胞和葡萄干細胞，但是為了更切合本發(fā)明的發(fā)明目的，發(fā)明人經(jīng)過多次試 驗，將蘋果干細胞進行了處理和調(diào)整，使得本發(fā)明的效果更好，具體的方法如下：
[0014] 按照重量比例I:I: 1 : 2將蘋果干細胞、番茄干細胞，葡萄干細胞和維生素C 混合；
[0015] 常規(guī)方法體外培養(yǎng)并收集培養(yǎng)物；
[0016] 收集上清液中分子量相遇5000Da的成份，進行冷凍干燥，其中，冷凍干燥的方法 如下：〇攝氏度5-10分鐘，-10攝氏度10-20分鐘，-20攝氏度2-3小時，然后-35攝氏度保 存超過5小時，進行冷凍干燥，這是本發(fā)明的一個發(fā)明點經(jīng)過了這個方法，可以最大限度保 持細胞活性物質(zhì)，對最終產(chǎn)品的效果具有非常好的促進作用。
[0017]干細胞提取物再優(yōu)選為羊臍帶血干細胞提取物。
[0018]本發(fā)明的取得羊臍帶血干細胞提取物的方法如下：
[0019] (1)臍帶及胎盤的采集。選足月母羊，病毒檢測，在無菌條件下取得羊臍帶血和胎 盤，〇攝氏度條件下運至GMP車間，放入液氮罐內(nèi)進行保存。（2)收集足量的胎盤和羊臍帶 血后，準備生產(chǎn)和加工。在冰上，用PBS將臍帶與胎盤沖洗兩次，剪斷分開，去除血管和外膜 后并剪成〇. 5-3_3大小的組織塊，用組織勻漿機將臍帶和胎盤制成組織勻漿，800-900轉(zhuǎn) /分鐘離心2-20分鐘后去除組織殘塊，上清液置于冰箱內(nèi)。優(yōu)選地，可以將此上清液按照 I:1的重量比例加入到干細胞提取物中作為一個整體使用于本發(fā)明的產(chǎn)品中。
[0020] 其中，所述的干細胞提取物制備方法為：
[0021] 1)、羊臍帶血干細胞的破碎：將羊臍帶血干細胞懸液50毫升，采用超聲波破碎法， 利用超聲波振蕩器發(fā)射9~10千周聲波處理3-9分鐘；
[0022]2)、向溶液中加入10倍體積生理鹽水后，3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心20分鐘；
[0023]3)、取上清液，加入20%無水乙醇，混勾，放置15分鐘（乙醇沉淀法）；
[0024]4)、將溶液3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心20分鐘；
[0025]5)、棄上清液，取沉淀，加入生理鹽水50毫升，輕輕搖勻，將沉淀溶解成透明溶液， 即為羊臍帶血干細胞活性蛋白粗提液；
[0026]本發(fā)明提供的干細胞精華素，從細胞的角度，有針對性地補充活性細胞或活化已 有細胞的功能。在皮膚眾多的細胞中，皮膚干細胞是各種細胞更新?lián)Q代的"種子細胞"，是可 以產(chǎn)生各種類型細胞的原始細胞。干細胞精華素通過表皮吸收后，深入到真皮層和皮下組 織，全面激活皮膚內(nèi)干細胞分化，快速地更新替換衰老的細胞。從而增加膠原分泌，