一種多糖苷化五環(huán)三萜-28-酸及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥及其制備和應(yīng)用的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種多糖苷化五環(huán)三 萜-28-酸及其制備方法及在制備抗糖尿病藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一種以慢性血糖水平增高為特征的代謝疾病，近年來，患病率及死亡率 都呈現(xiàn)出迅速上升的趨勢，成為繼腫瘤、心血管疾病之后的威脅人類健康的第三大疾患。目 前主要診治方法為通過注射胰島素和口服降糖藥物來控制血糖濃度。目前較為常見的化學(xué) 藥物主要有雙胍類化合物、噻唑烷二酮類化合物（TZDs)以及磺酰脲類化合物等，這些合成 藥物雖然見效快、療效明顯，但副作用也較大。因此，研究天然資源中作用溫和、毒副作用小 的降糖成分是發(fā)展的趨勢和方向。許多研究表明，多羥基五環(huán)三萜酸類化合物諸如科羅索 酸、山楂酸等具有一定的抗糖尿病活性。但其水溶性差和生物利用率低等問題嚴重制約了 它們在臨床的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的第一個目的是提供一種通過引入糖基基團，使得具有一定降糖活性的 多羥基五環(huán)三萜-28-酸類化合物在保持或者提高其降糖活性的基礎(chǔ)上改善其水溶性， 得到水溶性好、作用溫和、毒副作用小的新型a-葡萄糖苷酶抑制劑：多糖苷化五環(huán)三 萜-28-酸，可應(yīng)用于糖尿病的治療。
[0004] 本發(fā)明的第二個目的是提供一種多糖苷化五環(huán)三萜-28-酸的制備方法，該多糖 苷化五環(huán)三萜-28-酸對a -葡萄糖苷酶體外抑制活性進行評價。
[0005] 本發(fā)明的第三個目的是提供多羥基五環(huán)三萜酸糖苷在制備抗糖尿病藥物中的應(yīng) 用。
[0006] 本發(fā)明的第一個目的是這樣實現(xiàn)的：
[0007] -種多糖苷化五環(huán)三萜-28-酸，具有以下結(jié)構(gòu)通式：
[0009]其中：其中：?,?= CH 3或 H ;R4= R3O或C = 0 ;R5= COOH 或 CH 3或CH2OR35R6 = 013或CH2OR35R3為醛糖作原料形成的基團，醛糖為單糖：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、甘露糖、 阿拉伯糖、木糖、核糖，或雙糖：乳糖，麥芽糖，或三糖：麥芽三糖、異麥芽三糖，或四糖：麥芽 四糖、異麥芽四糖。
[0010] 本發(fā)明的第二個目的是這樣實現(xiàn)的：
[0011] -種多糖苷化五環(huán)三萜-28-酸的制備方法，具體步驟如下：
[0012] (1)將鹵化芐和多羥基五環(huán)三萜-28-酸按照摩爾比1-10:1混合，并加入相對于 多羥基五環(huán)三萜-28-酸1-5倍摩爾量的無機堿，最后加入有機溶劑（如二甲基亞砜）并混 勻；在50-150°C油浴條件下攪拌反應(yīng)l_48h ;加入蒸餾水，待固體析出，過濾，烘干，得多羥 基五環(huán)三萜酸-28-芐酯；
[0013] (2)將多羥基五環(huán)三萜酸-28-芐酯與三氯乙酰亞胺糖酯按摩爾比1:1-10溶于二 氯甲烷中，加入分子篩，攪拌l_60min ;滴入20滴催化劑，室溫攪拌l-24h ;過濾，減壓濃縮， 再經(jīng)柱層析分離后得到多全苯甲?；擒?五環(huán)三萜酸-28-芐基酯；
[0014] (3)將多全苯甲酰化糖苷-五環(huán)三萜酸-28-芐基酯溶于乙酸乙酯中并加入鈀碳 (Pd/C)，將H 2通入反應(yīng)體系，攪拌反應(yīng)l-12h ;過濾，減壓蒸餾得多全苯甲?；擒?五環(huán)三 萜-28-酸；
[0015] (4)將多全苯甲酰化糖苷-五環(huán)三萜-28-酸溶于甲醇中，并加入甲醇-甲醇鈉溶 液，常溫攪拌l_24h ;向體系中加入氫型酸性陽離子樹脂，過濾，減壓濃縮，再經(jīng)柱層析分離 得到目標產(chǎn)物：多糖苷化五環(huán)三萜-28-酸。
[0016] 所述多羥基五環(huán)三萜-28-酸為：
[0018] 其中：?, R2= CH 3或 H ;R 4= OH 或 C = 0 ;R 5= C00H，CH 3或 CH 20H ;R6= CH 3或 CH2OH0
[0019]所述多羥基五環(huán)三萜酸-28-芐酯為：
[0020]
[0021] 其中：?,R2=CH3或H;R4=OH或C= 0;R5=COOBn，CH3或CH20H;R6=CH3或 CH2OH0
[0022] 所述三氯乙酰亞胺糖酯為具有醛糖結(jié)構(gòu)的還原糖為原料形成的三氯乙酰亞胺糖 酯（下式實例為三氯乙酰亞胺葡萄糖酯）。醛糖為單糖：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、甘露糖、 阿拉伯糖、木糖、核糖，或雙糖：乳糖，麥芽糖，或三糖：麥芽三糖、異麥芽三糖，或四糖：麥芽 四糖、異麥芽四糖。
[0023]
[0024] 所述多全苯甲?；擒?五環(huán)三萜-28-酸芐基酯為：
[0026]其中：1^，1?2=013或11 ;1?4=1?3'0或〇=0;1?5=0)(?11，，01 3或01201?3';1?6=01 3 或CH2OIV;R3'為醛糖中羥基經(jīng)苯甲酰基進行全保護，所得到的全苯甲酰化的糖基（上式 實例為全苯甲?；咸烟腔?。醛糖為單糖：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿拉伯糖、木 糖、核糖，或雙糖：乳糖，麥芽糖，或三糖：麥芽三糖、異麥芽三糖，或四糖：麥芽四糖、異麥 芽四糖。
[0027] 所述多全苯甲?；擒?五環(huán)三萜-28-酸為：
[0029]其中：1^，1?2=013或11 ;1?4=1?3'0或〇=0;1?5=0)011，，01 3或01201?3'；1?6=01 3 或CH2OIV ;R3'為醛糖中羥基經(jīng)苯甲?；M行全保護，所得到的全苯甲?；奶腔ㄉ鲜?實例為全苯甲?；咸烟腔?。醛糖為單糖：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿拉伯糖、木 糖、核糖，或雙糖：乳糖，麥芽糖，或三糖：麥芽三糖、異麥芽三糖，或四糖：麥芽四糖、異麥芽 四糖。
[0030] 步驟（1)中所述鹵化芐為溴化芐或氯化芐。
[0031] 步驟（1)中所述無機堿為碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉或碳酸氫鉀。
[0032] 步驟（1)中所述有機溶劑為DMSO、DMF或1，4-二氧六環(huán)。
[0033] 步驟（2)中所述催化劑為三氟甲基磺酸三甲基硅酯（TMSOTf)或三氟化硼乙醚。
[0034] a _葡萄糖苷酶是依附在小腸上皮膜的結(jié)合酶，主要作用是催化二糖和寡糖糖苷 鍵的裂解作用，從而使得人體血糖濃度升高。本發(fā)明通過抑制a-葡萄糖苷酶的活性，能很 大程度的維持人體內(nèi)血糖濃度，從而控制糖尿病癥狀并減少并發(fā)癥的發(fā)生。因此，本發(fā)明通 過對所合成的多羥基五環(huán)三萜酸糖苷進行體外a _葡萄糖苷酶活性測試，來評價其抗糖尿 病的活性。
[0035] 本發(fā)明的優(yōu)點在于：通過在多羥基五環(huán)三萜-28-酸的羥基位置上引入多個強極 性的糖基成苷，在保持或提高多多羥基五環(huán)三萜-28-酸降糖活性的基礎(chǔ)上進一步增強其 水溶性，合成了一系列水溶性好，作用溫和，毒副作用小的a -葡萄糖苷酶抑制劑，可更廣 泛地進行抗糖尿病方面的臨床應(yīng)用。
【具體實施方式】
[0036] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步地詳細說明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局 限于實施例所表示的范圍。
[0037] 實施例1
[0038] -種2 a，3 P -2- (0- P -D-吡喃葡萄糖苷）齊墩果烷-28-酸的合成，具體步驟如 下：
[0039] ⑴2 a，3 0 -二羥基-齊墩果烷-28-酸芐酯的合成：
[0041 ]將 2a_ 羥基齊壤果酸（10g，21. 2mmol)，碳酸鐘（6g，43. 6mmol)溶于 50mL DMF 中， 并加入4. 2mL BnBr，在反應(yīng)溫度為50°C的條件下，攪拌反應(yīng)24h。加入蒸餾水，待固體析出， 過濾，烘干得目標產(chǎn)物ll.Og，收率為92.0%，熔點為155-157°C ;
[0042] (2) 2 a，3 P-二-0- (2, 3, 4, 6-4-0-苯甲?；?P -D-吡喃葡萄糖苷）-齊墩果 烷-28-酸芐酯的合成：
[0044] 將步驟⑴的產(chǎn)物（lg，I. 8mmol)與三氯乙酰亞胺葡萄糖酯（2. 94g, 3. 95mmol)溶 于二氯甲烷中，并加入5滴TMSOTf，室溫攪拌24h。過濾，減壓濃縮，粗產(chǎn)物以石油醚/乙酸 乙酯進行柱層析分離，得到I. 56g產(chǎn)物，收率為50. 5%。熔點143-144°C ;
[0045] (3) 2 a，3 P-二-0- (2, 3, 4, 6-3-0-苯甲?；?P -D-吡喃葡萄糖苷）-齊墩果 烷-28-酸的合成：
[0046]
[0047] 將步驟（2)中產(chǎn)物（0. 99g，0. 58mmol)溶于30mL乙酸乙酯中，加入700mgPd/C并 通入氫氣，攪拌反應(yīng)24h。過濾，減壓濃縮除去乙酸乙酯，得到產(chǎn)物0.83g，產(chǎn)率為88. 2%， 熔點 161-162°C;
[0048](4) 2 a，3 P-二-(0- P -D-呋喃葡萄糖苷）-齊墩果烷-28-酸的合成：
[0050] 將步驟（3)中產(chǎn)物（754mg，0. 46mmol)溶于20mL甲醇中，加入I.OmT,甲醇-甲醇 鈉溶液（33%)，攪拌反應(yīng)24h。加入DowexH+resin將反應(yīng)體系pH調(diào)至中性，過濾，減壓 濃縮，以氯仿/甲醇的展開劑體系對粗產(chǎn)物進行柱層析分離，得到目標產(chǎn)物498mg，產(chǎn)率為 88. 3%，熔點為 253-255°C。
[0051] 譜圖數(shù)據(jù)jHNMRGOOMHz,DMS0-d6) :S5. 14 (s, 1H)，4. 46 (d,J= 4. 4Hz, 1H), 4. 30 (d,J= 7. 1Hz, 1H), 4. 02-4. 01 (m, 1H), 3. 71-3. 68 (m, 1H), 3. 65-3 .62 (m, 2H), 3. 54-3. 36 (m, 8H), 3. 32-3. 30 (m, 2H), 3. 28-3. 26 (m, 1H), 3. 23-3. 13 (m, 5H), 3. 09-3. 06 (m, 1H), 3. 05-3. 02 (m, 1H), 2. 99-2. 95 (m, 1H), 2. 74-2. 72 (m, 1H),I .97-1. 96 (m, 1H),I. 89-1. 82 (m, 3H),I. 86-1. 56 (m, 3H),I. 52-1. 45 (m, 3H),I. 42-1. 36 (m, 2H),I. 31-1. 26 (m, 2H),I. 23-1. 21 (m, 1H),I. 07 (s, 3H),I. 02 (s, 3H), 0. 87(s ，3H)，0? 86 (s, 3H)，0? 85 (s, 3H)，0? 79 (s, 3H)，0? 69 (s, 3H) ? 13C匪R(100MHz,DMS0-d6) :8 178. 8, 144. I, 121. 3,