%的乙醇,進(jìn)行醇沉處 理,醇沉處理完畢離心分離得上清液四和沉淀四,干燥沉淀四,得固體藍(lán)色色素。
[0131] 當(dāng)然,也可直接把清液A和超濾濃縮液二進(jìn)行噴霧干燥,得固體藍(lán)色色素予以保 存;如果對藍(lán)色色素純度要求較高,在使用前,進(jìn)行醇沉處理即可。
[0132] 提純后的藍(lán)色色素的高效液相色譜如圖19所示,有圖19可知,本發(fā)明所得色素純 度非常高,雜質(zhì)含量極少。
【主權(quán)項】
1. 一種產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomyces sp. ) YLAO菌株,該菌株已保藏于 中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,其保藏編號為CGMCC No :11335,其保藏 時間為:2015年9月8日。2. 如權(quán)利要求1所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLAO菌株,其 特征在于,其16ri)NA的部分基因序列為: cgtcccatcg ccagtcccac cttcgacagc tccctcccac aaggggttgg gccaccggct 60 tcgggtgtta ccgactttcg tgacgtgacg ggcggtgtgt acaaggcccg ggaacgtatt 120 caccgcagca atgctgatct gcgattacta gcgactccga cttcatgggg tcgagttgca 180 gaccccaatc cgaactgaga ccggcttttt gagattcgct ccaccttgcg gtatcgcagc 240 tcattgtacc ggccattgta gcacgtgtgc agcccaagac ataaggggca tgatgacttg 300 acgtcgtccc caccttcctc cgagttgacc ccggcggtct cccgtgagtc cccaacaccc 360 cgaagggctt gctggcaaca cgggacaagg gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca 420 tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc accacctgta caccgaccac aaggggggca 480 ccatctctga tgctttccgg tgtatgtcaa gccttggtaa ggttcttcgc gttgcgtcga 540 attaagccac atgctccgcc gcttgtgcgg gcccccgtca attcctttga gttttagcct 600 tgcggccgta ctccccaggc ggggcactta atgcgttagc tgcggcacgg acaacgtgga 660 atgttgccca cacctagtgc ccaccgttta cggcgtggac taccagggta tctaatcctg 720 ttcgctcccc acgctttcgc tcctcagcgt cagtatcggc ccagagatcc gccttcgcca 780 ccggtgttcc tcctgatatc tgcgcatttc accgctacac caggaattcc gatctcccct 840 accgaactct agcctgcccg tatcgactgc agacccgggg ttaagccccg ggctttcaca 900 accgacgtga caagccgcct acgagctctt tacgcccaat aattccggac aacgcttgcg 960 ccctacgtat taccgcggct gctggcacgt agttagccgg cgcttcttct gcaggtaccg 1020 tcactttcgc ttcttccctg ctgaaagagg tttacaaccc gaaggccgtc atccctcacg 1080 cggcgtcgct gcatcaggct ttcgcccatt gtgcaatatt ccccactgct gcctcccgta 1140 ggagtctggg ccgtgtctca gtcccagtgt ggccggtcgc cctctcaggc cggctacccg 1200 tcgtcgcctt ggtgagccat tacctcacca acaagctgat aggccgcggg ctcatccttc 1260 accgccggag ctttcgaacc tcgcagatgc ctgcgagggt cagtatccgg tattagaccc 1320 cgtttccagg gcttgtccca gagtgaaggg cagattgccc acgtgttact cacccgttcg 1380 ccactaatcc ccaccgaagt ggttcatcgt tcgactgcat gtgta 1425〇3. 如權(quán)利要求1所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLAO菌株,其 特征在于,其獲取步驟為: 1)取牡丹根際土樣,置于裝有無菌水的三角瓶中,震蕩均勻,靜置后取上層懸液; 2) 將所述懸液稀釋5-20倍,并將0. 05-0. 5mL稀釋后的懸液涂布于改良高氏一號合成 瓊脂培養(yǎng)基平板,于28-30°C下培養(yǎng)5-7天; 3) 出現(xiàn)單菌落后,挑選出產(chǎn)生水溶性色素的菌落; 4) 連續(xù)多次劃線,分離純化,即獲得產(chǎn)藍(lán)色色素的出發(fā)菌株,即,鏈霉菌(Streptomyces sp. )YLAll菌株; 5)產(chǎn)藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomyces sp. ) YLAll菌株接種于種子培養(yǎng)基,經(jīng)誘變、 篩選,獲得遺傳性質(zhì)穩(wěn)定、藍(lán)色色素產(chǎn)量高的鏈霉菌(Streptomyces sp. ) YLAO菌株。4.如權(quán)利要求3所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLAO菌株,其特 征在于,所述改良高氏一號合成瓊脂培養(yǎng)基由可溶性淀粉15-25g、酵母提取物0. 6-1. 5g、 硝酸鉀0. 6-1. 5g、氯化鈉0. 3-0. 8g、磷酸氫二鉀0. 3-0. 8g、硫酸鎂0. 3-0. 8g、硫酸亞鐵 0. 008-0. 012g、瓊脂15-25g和蒸餾水1000 mL組成,所述改良高氏一號合成瓊脂培養(yǎng)基的pH 值為 7. 2-7. 4。 5?如權(quán)利要求3所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLAO菌株,其 特征在于,步驟5)中,出發(fā)菌株的分生孢子,做成孢子濃度為IXlOs- IO9CfuAil的孢子懸 液,亞硝基胍處理液的作用下誘變,結(jié)合紫外燈照射進(jìn)行復(fù)合誘變,間隔挑取不同處理時間 的樣品,進(jìn)行平板篩選和發(fā)酵篩選,發(fā)酵篩選的菌株進(jìn)行發(fā)酵復(fù)篩,獲得產(chǎn)藍(lán)色色素的突變 菌株,即,鏈霉菌(Streptomycessp. )YLAO菌株。6. 如權(quán)利要求1所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLA0菌株用于 藍(lán)色色素的生產(chǎn)。7. 采用如權(quán)利要求1所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLA0菌株 生產(chǎn)藍(lán)色色素的方法,其特征在于:將菌株置于發(fā)酵培養(yǎng)基,并于35-37°C下發(fā)酵2-9天;所 述發(fā)酵培養(yǎng)基由玉米、硝酸鉀、乙酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和水組成,所 述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為7. 2-7. 4。 8?如權(quán)利要求7所述采用產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomycessp. )YLAO菌 株生產(chǎn)藍(lán)色色素的方法,其特征在于:所述發(fā)酵培養(yǎng)基由玉米20. 0g、硝酸鉀I. 0g、乙酸鈉 〇. 5g、磷酸氫二鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、硫酸錳0. 01g、硫酸亞鐵0.0 lg和水1000 mL組成。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌菌株,屬于微生物領(lǐng)域。本發(fā)明產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomyces?sp.)YLA0菌株,該菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,其保藏編號為CGMCC?No:11335,其保藏時間為:2015年9月8日。所述產(chǎn)環(huán)保型藍(lán)色色素的鏈霉菌(Streptomyces?sp.)YLA0菌株用于藍(lán)色色素的生產(chǎn)。CGMCC NO.1133520150908
【IPC分類】C12N1/20, C12P1/04, C12N15/01, C12N13/00, C12R1/465
【公開號】CN105176873
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】王宜磊, 王文爽, 宋磊
【申請人】菏澤學(xué)院
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年9月30日