一種葛根素曲馬多的制備工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種葛根素曲馬多的制備工藝。
【背景技術(shù)】
[0002] 曲馬多是一種應(yīng)用比較廣泛的中樞作用鎮(zhèn)痛藥，臨床適應(yīng)證為各種急、慢性中度 至次重度疼痛。根據(jù)目前的研究結(jié)果顯示其主要通過阿片和非阿片機(jī)制起到鎮(zhèn)痛作用。曲 馬多通過阿片機(jī)制的鎮(zhèn)痛作用主要有賴于其在體內(nèi)的代謝物Μ?α-ο-去甲基曲馬多)作用， 其單體原藥及在生物體內(nèi)的代謝物Ml可與腦內(nèi)μ阿片受體產(chǎn)生弱親和力的結(jié)合。而Ml與μ受 體的親和力強(qiáng)于曲馬多原藥160~300倍，可以誘導(dǎo)出較強(qiáng)的阿片受體激動(dòng)作用；曲馬多對 中樞神經(jīng)元再攝取去甲腎上腺素(ΝΕ)和5-羥色胺(5-ΗΤ)起輕度抑制作用，從而增加腦內(nèi)單 胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平。研究表明，ΝΕ和5-ΗΤ等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)參與脊髓水平下行傷害性刺激 的調(diào)控，ΝΕ通過α2腎上腺素能受體，5-ΗΤ通過5-ΗΤ2受體的作用分別阻抗傷害性沖動(dòng)的傳 導(dǎo)，從而降低疼痛的敏感性。曲馬多的這一藥理學(xué)作用與其空間結(jié)構(gòu)有直接關(guān)系。曲馬多是 一個(gè)對映消旋混合體，2種對映體對不同的受體具有不同的親和力：（+/-)-曲馬多可選擇性 激動(dòng)μ受體，并抑制5-ΗΤ的再攝取;而(-)-曲馬多主要抑制ΝΕ的再攝取，這兩種對映體對鎮(zhèn) 痛作用具有互補(bǔ)和協(xié)同作用。曲馬多具有使用方便、鎮(zhèn)痛作用時(shí)間較長、鎮(zhèn)痛強(qiáng)度下降緩慢 等特點(diǎn)，是緩解慢性疼痛的理想藥物。
[0003] 曲馬多的鎮(zhèn)痛作用，是通過弱阿片樣激動(dòng)與ΝΕ和5-ΗΤ等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)對疼痛調(diào) 控的共同作用，形成一種阿片機(jī)制和非阿片機(jī)制結(jié)合的協(xié)同作用方式。曲馬多的這種雙重 鎮(zhèn)痛機(jī)制有別于通過激活阿片受體的鎮(zhèn)痛作用機(jī)制，這是其具有弱阿片受體結(jié)合作用但卻 具有較強(qiáng)鎮(zhèn)痛作用的主要原因，因而也受到國際鎮(zhèn)痛領(lǐng)域的關(guān)注。
[0004] 隨著曲馬多在臨床上日益廣泛應(yīng)用，其不良反應(yīng)也越來越多地顯現(xiàn)出來。除惡心、 嘔吐、出汗、眩暈等常見不良反應(yīng)外，還有因過量服用導(dǎo)致的心房纖顫、尿潴留、低鉀麻痹、 藥物變態(tài)反應(yīng)以及精神癥狀如四肢抽搐、癲癇、意識喪失等。由于曲馬多具有激動(dòng)阿片受體 和抑制5_ΗΤ、ΝΕ等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的再攝取的雙重作用機(jī)制，因此，其副作用可能是由刺激 阿片受體作用（如惡心、嘔吐、困倦、便秘、尿潴留等）引起或由于5_ΗΤ、ΝΕ再攝取抑制作用 (如頭疼、眩暈、出汗、口干等)所致。由于曲馬多具有增加腦內(nèi)ΝΕ和5-ΗΤ水平的作用，因此理 論上可能會(huì)增加強(qiáng)化效應(yīng)以及精神依賴性和濫用潛力；依賴與濫用本身即是機(jī)體的一種中 毒現(xiàn)象，也是導(dǎo)致曲馬多過量的原因，是造成曲馬多中毒甚至死亡的重要根源。當(dāng)進(jìn)入機(jī)體 的物質(zhì)積累達(dá)一定量后，能與體液或組織發(fā)生生物化學(xué)作用或生物物理作用，擾亂或破壞 機(jī)體的正常生理功能，引起暫時(shí)性或持久性的病理狀態(tài)，甚至危及生命。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的問題是提供一種可大大降低曲馬多的依賴性和毒性，且具有良 好的鎮(zhèn)痛效應(yīng)的葛根素曲馬多。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:所提供的一種葛根素曲馬多制備 工藝，包括下述工藝步驟：
[0007] (1)化合物a的氫化還原:在500mL氫化瓶中加入(300-350)mL甲醇和原料a(18-21) g，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下小心加入(5-8) g無水Pd/C，反應(yīng)液用氮?dú)庵脫Q3次，再用氫氣置換3次后，在 室溫下攪拌反應(yīng)(2-5 )h，反應(yīng)液用硅藻土過濾，濾餅用甲醇洗滌，濾液減壓蒸干得化合物b。
[0008] (2)化合物b與乙酸酐發(fā)生酯化反應(yīng):在250mL三口燒瓶中依次加入無水二氯甲烷 (90-110)mL，原料b (7.5-8.0)g和吡啶（8.7-9.2)g，在攪拌下向上述溶液中滴加乙酸酐 (11.2-14)g，的二氯甲烷溶液(50-60)mL，滴加完畢后攪拌過夜，減壓蒸餾，所得物用乙酸乙 酯（200-220)mL溶解，依次用1N鹽酸水溶液洗滌（2 X 50mL)，飽和碳酸鈉溶液洗滌（2 X 50mL)，再用飽和食鹽水洗滌(50mL)，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾，即得化合物c。
[0009] (3)化合物C與對甲氧基苯乙酰氯反應(yīng):在250mL三口燒瓶中加入（100-120)mL無水 二氯甲烷并冷卻至(〇_2)°C，將無水AlCl 3(3.7-4.5)g和原料c(11.7-12)g分別加入上述溶 液，在攪拌下，慢慢加入對甲氧基苯乙酰氯(5.卜6)g的二氯甲烷溶液(50-55)mL，滴加完畢 后，在室溫下攪拌過夜，反應(yīng)液慢慢倒入(200-210)mL冷卻至0°C的IN HC1溶液中，分出有機(jī) 相，水相用(200_220)mL二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水洗滌(2X100mL)，無水硫 酸鈉干燥，減壓蒸干，粗品用柱色譜純化得化合物d。
[0010] (4)化合物d的還原反應(yīng):在500mL三口燒瓶中加入原料d(12.3-13)g和（150-163) mL無水二氯甲烷并冷卻至-78°C，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將1.0mol/L的BBr3二氯甲烷溶液(80-92)mL 慢慢滴加至上述溶液中，滴加完畢后，在_78°C下反應(yīng)(1-1.5)h，再慢慢升至室溫，攪拌反應(yīng) (2-3)11，將反應(yīng)液慢慢倒入（200-210)11^冰水中，分出有機(jī)相，水相用二氯甲烷萃取（3\ 100mL)，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水洗滌(2X 100mL)，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾，粗品用柱 色譜純化得化合物e。
[0011] (5)化合物e與DMFDMA反應(yīng):將原料e(8 · 6-9 · 5)g溶于DMF(80-87)mL中，在攪拌下將 DMroMA(lOmL)慢慢滴加至上述溶液中，加完后，反應(yīng)在室溫下攪拌至反應(yīng)結(jié)束，減壓蒸餾， 所得粗品用柱色譜純化得化合物f。
[0012] (6)化合物f還原為葛根素：在250mL燒瓶中依次加入1^0!1(100-120)11^，原料€ (5.8-6.4) g和K2⑶3 (8.3-9.0) g，在室溫下攪拌過夜，反應(yīng)液用1N鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至5左右， 過濾，濾液減壓蒸餾，粗品用柱色譜純化，制得葛根素。
[0013] (7)葛根素曲馬多的合成:a、將曲馬多（11.9-12)g碳酰氯(4.5-5化及1(20) 3(6.3-7) g溶于甲苯中在〇°C下反應(yīng)(4-5)h后減壓蒸餾，粗品用柱色譜純化，b、將含化合物h(14.7-15)g的（6.3-7)mL的三乙胺溶液在0°C下緩慢滴加至含葛根素（18-19)g的50mL四氫呋喃溶 液中，室溫下反應(yīng)(2-3)h。純水洗滌后用庚烷/乙酸乙酯混合物對其產(chǎn)物進(jìn)行萃取，將有機(jī) 相用硫酸鎂干燥、過濾、濃縮，粗品用薄層層析或者制備液相色譜純化，制得所述葛根素曲 馬多。
[0014]優(yōu)選的，所述步驟(1)中所使用催化劑為鈀碳，還原劑為H2,反應(yīng)溶劑為甲醇。
[0015]優(yōu)選的，所述步驟(2)中所使用反應(yīng)試劑為乙酸酐，催化劑為吡啶，反應(yīng)溶劑為二 氯甲烷。
[0016] 優(yōu)選的，所述步驟（3)中所使用?；噭?-甲氧基苯乙酰氯，催化劑為三氯化 鋁、三氟化釔或三氟化鏑中的任一種。
[0017] 優(yōu)選的，所述步驟(4)中所使用有機(jī)硼試劑為三溴化硼，反應(yīng)溶劑為二氯甲烷。
[0018]優(yōu)選的，所述步驟（5)中所使用反應(yīng)試劑為N，N_二甲基甲酰胺二甲基縮醛 (DMFDMA)，反應(yīng)溶劑為二甲基甲酰胺(DMF)。
[0019]優(yōu)選的，所述步驟(6)中所使用還原劑為碳酸鉀(K2C03)，反應(yīng)溶劑為甲醇
[0020] 優(yōu)選的，所述步驟(7a)的中所使用試劑為碳酰氯和碳酸鉀，溶劑為甲苯，反應(yīng)摩爾 比為（1-2): (2-4)，反應(yīng)條件為0°C，所述步驟(7b)中所使用溶劑為三乙胺和四氫呋喃溶液， 萃取劑為庚烷:乙酸乙酯= (2-4): (1-3)的混合物;反應(yīng)后產(chǎn)物干燥劑為硫酸鎂。
[0021] 一種葛根素曲馬多在鎮(zhèn)痛效應(yīng)方面藥物的應(yīng)用，應(yīng)用于制備中、重度急、慢性疼痛 的治療藥物，應(yīng)用于制備治療神經(jīng)病理性疼痛藥物。
[0022] 采用本發(fā)明的技術(shù)方案，本發(fā)明合成了一種新的化合物葛根素曲馬多，不僅具有 與曲馬多相當(dāng)?shù)逆?zhèn)痛效果，且能從根本上減少藥物用量，降低藥物耐受性與成癮性，一定程 度減緩其對消化系統(tǒng)及循環(huán)系統(tǒng)的副作用，控制不良反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)臨床上更加安全有效 地用藥。
【附圖說明】
[0023] 圖1為本發(fā)明所述步驟(1)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0024] 圖2為本發(fā)明所述步驟(2)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0025] 圖3為本發(fā)明所述步驟(3)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0026] 圖4為本發(fā)明所述步驟(4)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0027] 圖5為本發(fā)明所述步驟(5)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0028] 圖6為本發(fā)明所述步驟(6)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0029] 圖7為本發(fā)明所述步驟(7)的化學(xué)反應(yīng)示意圖。
[0030] 圖8為本發(fā)明所述一種葛根素曲馬多的制備工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 實(shí)施例1:葛根素曲馬多化合物對神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛作用
[0032] 1、實(shí)驗(yàn)方法
[0033 ] 1.1坐骨神經(jīng)慢性壓迫(CCI)模型的建立:小鼠腹腔注射烏來糖（1.4g/kg)麻醉后， 切開右后肢上部皮膚，鈍性分離股二頭肌，暴露坐骨神經(jīng)主干。用8-0鉻制羊腸線在坐骨神 經(jīng)上輕輕結(jié)扎3個(gè)單結(jié)，結(jié)扎環(huán)間隔1mm，結(jié)扎扣的松緊程度以右后肢出現(xiàn)輕微收縮為宜。手 術(shù)完成后，分層縫合肌肉和皮膚，腹腔注射青霉素預(yù)防感染。術(shù)后1周進(jìn)行熱板實(shí)驗(yàn)。
[0034] 1.2實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法:將CCI模型小鼠隨機(jī)分為6組，每組8只，分別為生理鹽水 對照組，40mg/kg曲馬多注射組，10mg/kg葛根素曲馬多化合物注射組，20mg/kg葛根素曲馬 多化合物注射組，40mg/kg葛根素曲馬多化合物注射組。所有藥物均通過腹腔注射。
[0035] 1.3熱板實(shí)驗(yàn):將CCI模型小鼠放置在面板溫度為55 ± 0.3° C的冷熱板測痛儀上，以 抬足或舔足作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)，動(dòng)態(tài)測定小鼠給藥前和給藥后15，30，45，60，75和90min患 側(cè)腳掌的縮足潛伏期(s)。每個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)測3次(間隔2min)，取其平均值作為痛覺閾值。
[0036] 1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)誤（X 土 s)表示，采用Sigmastat 2.03軟 件的One-way AN0VA分析模型組小鼠與對照組小鼠痛閾的差異；Two way RM AN0VA (Bonferroni t-test)統(tǒng)計(jì)分析不同給藥組之間及不同時(shí)間點(diǎn)各組間的差異。P〈0.05為差 異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0037] 2實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0038] 2.1 CCI誘導(dǎo)的熱痛覺過敏:手術(shù)1周后，利用熱板法測定CCI模型小鼠的平均縮足 潛伏期為6.87 ± 0.18s，明顯低于對照組小鼠的縮足潛伏期13.26 ±0.48s，One-way AN0VA 分析顯示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈〇.001)，提示CCI神經(jīng)病理性痛模型小鼠建立成功。
[0039] 表1:葛根素曲馬多化合物對CCI模型小鼠的鎮(zhèn)痛作用（i±s，n = 8)
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