人體lbm（瘦體重）檢測(cè)試劑盒和方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及基因檢測(cè)，具體涉及人體LBM基因檢測(cè)試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002] 肥胖是身體成分發(fā)生了變化，身體成分是指人的所有組織器官的總成分，它的單 位就是體重，分成脂肪和非脂肪兩種成分。前者稱為脂體重(或稱肥體重)，后者稱為瘦體重 (或稱去脂體重)，亦稱"去脂體重"（化t-化ee body),為除脂肪W(wǎng)外身體其他成分的重量， 肌肉是其中的主要部分。
[000引"瘦體重"由身體細(xì)胞重量（BCW)、細(xì)胞外水分（ECW)、和去脂的固體部分（FFS)組 成。其主要成分是骨骼、肌肉等。正常情況，瘦體重與身體脂肪含量有一定比例。測(cè)量瘦體 重對(duì)促進(jìn)能量轉(zhuǎn)換和耗氧、調(diào)節(jié)水鹽代謝等具有重要意義。在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中，運(yùn)動(dòng)員保持較高 的瘦體重，對(duì)提高有氧耐力和運(yùn)動(dòng)能力是非常有好處的。運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)能力在相當(dāng)程度上 決定于骨骼肌類型和骨骼肌的收縮能力，因此，W骨骼肌為主要成分的瘦體重占總體中的 比例，對(duì)運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)能力有很大影響。瘦體重發(fā)達(dá)說(shuō)明身體強(qiáng)壯體質(zhì)好，如運(yùn)動(dòng)員或一些 平時(shí)就注重鍛煉身體的人，他們肌肉強(qiáng)健，雖然體重高但卻不屬于肥胖。
[0004] 瘦體重的計(jì)算公式是： 瘦體重=體重(W)-脂肪重量（f ) 脂肪重量=體重（W) X體脂率（F%) 瘦體重主要由肌肉組成，而肌肉在體內(nèi)的最大含量是高度遺傳的，基因是決定因素。后 天的訓(xùn)練和運(yùn)動(dòng)增加的瘦體重只能在基因決定的最高含量W下。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明提供了一種LBM基因檢測(cè)試劑盒，該試劑盒對(duì)受測(cè)者的相關(guān)基 因進(jìn)行檢測(cè)，分析得到其體內(nèi)潛在的LBM含量水平，并計(jì)算瘦體重?cái)?shù)值，且PCR擴(kuò)增反應(yīng)在 同一臺(tái)PCR儀上同步進(jìn)行并具備檢測(cè)的高效性、特異性。
[0006] 一種LBM基因檢測(cè)試劑盒，包括盒體及盒體內(nèi)單獨(dú)存放的試劑，存放的試劑包括： (1)針對(duì)2個(gè)基因 SNP多態(tài)位點(diǎn)的PCR反應(yīng)引物組： 針對(duì)SNP RS16892496的引物組： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 針對(duì)SNP RS7832552的引物組： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR擴(kuò)增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0007] 本發(fā)明提供的瘦體重基因檢測(cè)試劑盒的有益效果是；通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)使多個(gè) PCR擴(kuò)增反應(yīng)在同一臺(tái)PCR儀上同步進(jìn)行，對(duì)受測(cè)者的相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè)，并實(shí)現(xiàn)檢測(cè)的高 效性、特異性，分析得到其瘦體重的遺傳因素，計(jì)算體內(nèi)LBM數(shù)值，從而為受測(cè)者獲得一個(gè) 合適的健康方案，了解自身的肌肉含量和質(zhì)量，在健身運(yùn)動(dòng)中采取相應(yīng)的策略避免對(duì)其無(wú) 效甚至是有害的方法。同時(shí)為專業(yè)運(yùn)動(dòng)員的選材和訓(xùn)練提供科學(xué)依據(jù)。
【附圖說(shuō)明】
[0008] 圖1是反應(yīng)產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖。
【具體實(shí)施方式】
[0009] 瘦體重基因檢測(cè)試劑盒，包括盒體及盒體內(nèi)單獨(dú)存放的試劑，存放的試劑包括： (1) 針對(duì)2個(gè)基因 SNP多態(tài)位點(diǎn)的PCR反應(yīng)引物組： 針對(duì)SNP RS16892496的引物組： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 針對(duì)SNP RS7832552的引物組： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR擴(kuò)增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0010] 下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的方法予W進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0011] 本實(shí)施例對(duì)測(cè)試者采用瘦體重基因檢測(cè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)2個(gè)基因的SNP多態(tài)位 點(diǎn)，并根據(jù)基因分型結(jié)果，分析得到其瘦體重的遺傳因素，計(jì)算體內(nèi)LBM數(shù)值，從而為受測(cè) 者獲得一個(gè)合適的健康方案，了解自身的肌肉含量和質(zhì)量，在健身運(yùn)動(dòng)中采取相應(yīng)的策略 避免對(duì)其無(wú)效甚至是有害的方法。
[0012] 使用到的瘦體重基因檢測(cè)試劑盒內(nèi)試劑由W下組成： (1)針對(duì)2個(gè)基因 SNP多態(tài)位點(diǎn)的PCR反應(yīng)引物組： 針對(duì)SNP RS16892496的引物組： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 針對(duì)SNP RS7832552的引物組： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2)PCR擴(kuò)增試劑；10XPCR緩沖液，該P(yáng)CR緩沖液為lOOmM Tris-肥1 P冊(cè).3,500mM KC1，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，該dNTPs混合物為Η磯酸鳥(niǎo)嘿嶺脫氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿嶺脫氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脫氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脫氧核巧酸 dCTP四種核巧酸，各組分濃度為2. 5mM ;5υ/μ 1熱啟動(dòng)Taq酶。
[001引（3)瓊脂糖凝膠電泳分析試劑諒脂糖、TAE緩沖液、DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)、Goldview 染色液和DM上樣緩沖液，該緩沖液W漠酪藍(lán)為指示劑稀釋至IX后使用。
[0014] 使用上述瘦體重基因檢測(cè)試劑盒按如下步驟進(jìn)行檢測(cè)： (1)提取樣本基因組DNA。
[0015] 采集該測(cè)試者唾液，向l-2ml唾液樣品中加入500ul提取緩沖溶液，該DNA提取 緩沖溶液溶劑為50mM的化is-肥1 pH7. 4、0. 5mM的邸TA和50mM的化C1，反復(fù)吹打混勻 后，SOOOXg離必5分鐘，棄去上清，此步驟重復(fù)一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 該裂解液溶劑為 50mM Tris-肥 1 pH7. 4,50mM Tris-肥 1 pH7. 4，150mM 化Cl，lmM 邸TA，1% Triton x-100，l% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,蛋白酶 K20mg/mL,徹底懸浮沉淀并 充分混勻后，室溫放置30分鐘，期間來(lái)回顛倒離必管數(shù)次；得到的混合液中，加