核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型是有關(guān)一種核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置，尤指一種可以應(yīng)用于同時(shí)偵測多核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]傳統(tǒng)臨床檢測測試分子中是否存在目標(biāo)核酸，多先利用不同核酸擴(kuò)增放大的技術(shù)，例如聚合酶連鎖反應(yīng)(Polymerase Chain React1n，PCR)等，將少量目標(biāo)核酸的數(shù)目擴(kuò)增后，再利用膠體電泳(gel electrophoresis)或者標(biāo)記焚光(label fluorescence)的技術(shù)讓操作人員讀取檢測結(jié)果。傳統(tǒng)讀取檢測結(jié)果的方法，雖然可以讓技術(shù)人員以肉眼直接判讀測試分子中是否存在目標(biāo)核酸，但需要在實(shí)驗(yàn)室里且長時(shí)間的操作，并搭配昂貴的專業(yè)器材(如標(biāo)記熒光技術(shù)使用的熒光儀)以及熟悉檢測技術(shù)的專業(yè)人員，無法實(shí)時(shí)或隨地提供臨床檢測結(jié)果給操作者，以及達(dá)到定點(diǎn)照護(hù)檢驗(yàn)(point-of_care，P0C)。
[0003]為了能更快速得知目標(biāo)核酸的檢驗(yàn)結(jié)果，遂開發(fā)出側(cè)流式檢測系統(tǒng)(lateralflow test strip system)。例如，中華民國第M432833號新型專利，揭露一種快速檢測試劑。該快速檢測試劑至少包含一檢體部、一結(jié)合部以及一顯示部。該檢體部用以使該檢體進(jìn)入該快速檢測試劑之中，具有一吸收物質(zhì)及一溶液，該溶液吸附于該吸收物質(zhì)上。該結(jié)合部的一端連結(jié)于該檢體部的一端，并具有一結(jié)合物質(zhì)，該結(jié)合部是用以使該檢體選擇性與該結(jié)合物質(zhì)結(jié)合。該顯示部依序具有一測試部以及一對照部。該測試部的一端連結(jié)于該結(jié)合部的另一端，且具有一披覆一測試物質(zhì)的測試顯示單元;該對照部的一端連結(jié)于該測試部的另一端，且具有一對照顯示單元，該對照顯示單元披覆一對照物質(zhì)。另外，如中華民國第M395826號新型專利，揭露一種登革熱檢測試紙，該試紙包含數(shù)個(gè)部件，分別為支撐體，以及其上的分子層，反應(yīng)物釋放層，結(jié)果檢測層，以及吸水層，其中反應(yīng)物釋放層上涂覆檢驗(yàn)反應(yīng)物，可與待測分子做專一性的反應(yīng)，當(dāng)待測分子因吸水層的毛細(xì)作用而被帶至反應(yīng)物釋放層，分子會(huì)與反應(yīng)物釋放層的反應(yīng)物作用形成一復(fù)合物，此復(fù)合物經(jīng)過結(jié)果檢測層上的檢測線與控制線時(shí)會(huì)分別與其上的反應(yīng)試劑產(chǎn)生呈色反應(yīng)，據(jù)此呈色便可判讀分子中目標(biāo)成份是否存在。此種側(cè)流式檢測系統(tǒng)，相較于傳統(tǒng)讀取檢測結(jié)果的技術(shù)，具有成本低廉、操作簡單、快速且容易判讀等優(yōu)點(diǎn)。然而，前述應(yīng)用側(cè)流式檢測系統(tǒng)的裝置，其檢測結(jié)果的呈現(xiàn)，通常以條狀顯色區(qū)塊方式呈現(xiàn)。往往僅能測試出該待測分子內(nèi)的單一檢測目標(biāo)，如欲得到不同檢測目標(biāo)的檢測結(jié)果，一般多使用不同的檢測裝置。若欲于單一前述側(cè)流式檢測系統(tǒng)的裝置中偵測多個(gè)檢測目標(biāo)，則需要在有限空間內(nèi)規(guī)劃多個(gè)包含檢測線與控制線的反應(yīng)區(qū)塊，若同時(shí)有多個(gè)檢測目標(biāo)反應(yīng)呈色，因線條的密度太高，操作者難以判讀甚至有誤判的可能。此外，該些檢測裝置多使用專一性抗體來偵測該檢測目標(biāo)，為了能呈現(xiàn)帶狀檢測結(jié)果，必須在檢測區(qū)域內(nèi)涂布大量的昂貴抗體，但仍僅能得到單一檢測目標(biāo)的測試結(jié)果。既不符合經(jīng)濟(jì)效益，亦造成珍貴抗體的浪費(fèi)。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004]本實(shí)用新型的主要目的，在于解決傳統(tǒng)應(yīng)用側(cè)流式檢測系統(tǒng)的裝置僅能偵測單一檢測目標(biāo)，或同一時(shí)間偵測多個(gè)檢測目標(biāo)時(shí)易產(chǎn)生混淆以及浪費(fèi)大量抗體的問題。
[0005]為達(dá)上述目的，本實(shí)用新型提供一種核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置，用于偵測至少一待測分子。該待測分子包含有一第一標(biāo)志物以及一相異于該第一標(biāo)志物的第二標(biāo)志物。該核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置沿著一軸向依序包含有一吸收該待測分子的樣品接觸部，一連接該樣品接觸部并接收該待測分子的結(jié)合部，以及一檢測部。該結(jié)合部包含有一專一性結(jié)合該第一標(biāo)志物的報(bào)告載體。該檢測部連接該結(jié)合部并接收該待測分子與結(jié)合在該第一標(biāo)志物上報(bào)告載體所形成的復(fù)合體。該檢測部包含有至少一顯色反應(yīng)區(qū)，該顯色反應(yīng)區(qū)包含有一具有專一性結(jié)合該報(bào)告載體并顯色的一第一類結(jié)合分子的對照組標(biāo)點(diǎn)，以及至少一分離該對照組標(biāo)點(diǎn)且具有專一性結(jié)合該第二標(biāo)志物并顯色的一第二類結(jié)合分子的檢測組標(biāo)點(diǎn)。該對照組標(biāo)點(diǎn)與該檢測組標(biāo)點(diǎn)的聯(lián)機(jī)不平行該軸向。
[0006]于一實(shí)施例中，該待測分子包含有經(jīng)過核酸擴(kuò)增技術(shù)的目標(biāo)核酸。其中，該核酸擴(kuò)增技術(shù)可為聚合酶連鎖反應(yīng)(Polymerase Chain React1n,PCR)，依賴核酸序列擴(kuò)增法(Nucleic Acid Sequence-Based Amplif icat1n ,NASBA)、自主序列復(fù)制系統(tǒng)(Self-Sustained Sequence Repl i cat 1n，3SR)、鏈替代擴(kuò)增法(Strand DisplacementAmplificat1n,SDA)、圈環(huán)形核酸擴(kuò)增法(Loop-mediated Isothermal Amplificat1n,LAMP)或重組聚合酶擴(kuò)增(Recombinase Polymerase Amplificat1n，RPA)等。
[0007]于一實(shí)施例中，該第一標(biāo)志物為生物素(b1tin)。
[0008]于一實(shí)施例中，該第二標(biāo)志物可為熒光黃異硫氰酸酯(F I u ο r e s c e i ηIsoth1cyanate，？11'0)、毛地黃素((11區(qū)0叉1區(qū)611；[11，01區(qū))、5-羧基四甲基羅丹明(5-Carboxytetramethylrhodamine ,TAMRA)、花菁染料3(Cyanine Dyes 3)或花菁染料5(Cyanine Dyes 5)等。
[0009]于一實(shí)施例中，該報(bào)告載體包含有一膠體金粒子以及復(fù)數(shù)附著于該膠體金粒子表面的鏈霉親和素(streptavidin)。
[0010]于一實(shí)施例中，該第一類結(jié)合分子為抗鏈霉親和素抗體或抗生物素抗體。
[0011]于一實(shí)施例中，該第二類結(jié)合分子為抗焚光黃異硫氰酸酯(FluoresceinIsoth1cyanate，F(xiàn)ITC)抗體、抗毛地黃素(digoxigenin, Dig)抗體、抗5-羧基四甲基羅丹明(5-Carboxytetramethylrhodamine ,TAMRA)抗體、抗花菁染料3(Cyanine Dyes 3)抗體或抗花菁染料5(Cyanine Dyes 5)抗體。
[0012]于一實(shí)施例中，該顯色反應(yīng)區(qū)包含有一個(gè)該對照組標(biāo)點(diǎn)以及二個(gè)分別位于該對照組標(biāo)點(diǎn)兩側(cè)的該檢測組標(biāo)點(diǎn)，該對照組標(biāo)點(diǎn)與二該檢測組標(biāo)點(diǎn)的聯(lián)機(jī)不平行該軸向。
[0013]于一實(shí)施例中，該對照組標(biāo)點(diǎn)與該檢測組標(biāo)點(diǎn)的聯(lián)機(jī)與該軸向垂直。
[0014]于一實(shí)施例中，該核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置偵測復(fù)數(shù)該待測分子，每一該待測分子的第二標(biāo)志物彼此不同，該檢測部包含有復(fù)數(shù)該顯色反應(yīng)區(qū)，每一顯色反應(yīng)區(qū)包含有一具有該第一類結(jié)合分子的對照組標(biāo)點(diǎn)，以及至少一分離該對照組標(biāo)點(diǎn)且具有對應(yīng)不同該第二標(biāo)志物的該第二類結(jié)合分子的檢測組標(biāo)點(diǎn)。
[0015]于一實(shí)施例中，該報(bào)告載體與該第一類結(jié)合分子結(jié)合后所呈現(xiàn)的顏色與該第二標(biāo)志物與該第二類結(jié)合分子結(jié)合后所呈現(xiàn)的顏色為可見光。
[0016]本實(shí)用新型核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置的檢測部根據(jù)所欲偵測的待測分子數(shù)目設(shè)置相對應(yīng)數(shù)目的顯色反應(yīng)區(qū)，每個(gè)顯色反應(yīng)區(qū)中，該對照組標(biāo)點(diǎn)與該檢測組標(biāo)點(diǎn)的聯(lián)機(jī)不平行該軸向。因此，該檢測部內(nèi)的空間能夠有效被運(yùn)用，達(dá)到偵測多個(gè)待測分子，容易判讀復(fù)數(shù)待測分子的檢測結(jié)果并減少對應(yīng)抗體的使用量的目的。本實(shí)用新型核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置的對照組標(biāo)點(diǎn)與檢測組標(biāo)點(diǎn)的特殊設(shè)計(jì)，具有定位與實(shí)現(xiàn)檢測二次認(rèn)證(二次重復(fù))的功能。除了保有應(yīng)用側(cè)流式檢測系統(tǒng)的裝置方便檢測的優(yōu)點(diǎn)之外，本實(shí)用新型核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置在單次檢測中偵測多個(gè)待測分子，大幅提升檢測的效率以及判讀正確性，提供更好的疾病診斷功效與方便性。
【附圖說明】
[0017]圖1為本實(shí)用新型核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置一實(shí)施例的基本結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖2為本實(shí)用新型核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置另一實(shí)施例的基本結(jié)構(gòu)示意圖；
[0019]圖3-1至圖3-3為本實(shí)用新型核酸分子擴(kuò)增產(chǎn)物的偵測裝置一實(shí)施例的檢測流程示意圖。
[0020]附圖標(biāo)記說明:10—樣品接觸部；20—結(jié)合部；30—檢測部；31、32、33—顯色反應(yīng)區(qū)；311、321、331—對照組標(biāo)點(diǎn)；312、322、332—檢測組標(biāo)點(diǎn)；41、42、43—待測分子;411、421、431—第一標(biāo)志物;412、422、432—第二標(biāo)志物;413、423、433—目標(biāo)核酸;50—報(bào)告載體;51—膠體金粒子;52—鏈霉親和素;60—第一類結(jié)合分子;71、72、73—第二類結(jié)合分子；a一軸向；L1、L2、L3一聯(lián)機(jī)。
【具體實(shí)施方式】