肚菌母種的活化，活化前要將接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、打火機以及配制好的斜面培養(yǎng)基放在凈化工作臺里，打開紫外燈，對相關的接種器具進行紫外照射殺菌35min，然后從冰箱中取出保藏的要活化的菌種，開始接種前先將凈化工作臺的紫外燈關閉，雙手用酒精棉球進行消毒，接種時先將接種環(huán)用酒精燈的火焰反復灼燒，待冷卻后用接種環(huán)挑取菌種的菌絲塊，能用接種環(huán)接種2塊菌絲塊，并快速接種至預先配制好的斜面培養(yǎng)基上，接種完畢后，將斜面培養(yǎng)基的試管口用火焰進行殺菌，然后方可塞入棉塞或膠塞；接種結束后，將接種后的菌種放入恒溫恒濕箱中，設定溫度為25°C，靜置培養(yǎng)32h即可完成菌種的活化；
其中，羊肚菌母種轉接和活化時的斜面培養(yǎng)基按質量份數計包括以下組分:馬鈴薯:20份，葡萄糖:2份，瓊脂:1份，磷酸二氫鉀:0.5份，硫酸鎂0.1份，蒸餾水15份；
斜面培養(yǎng)基的制備具體為:首先把馬鈴薯洗凈并去皮，用刀把馬鈴薯切塊，大小均一，然后按照配方中的標準加入蒸餾水，煮沸30min后，用紗布對馬鈴薯溶液進行過濾，然后加入葡萄糖、瓊脂、磷酸二氫鉀和硫酸鎂，然后加水定容至100mL，再加熱8min，待所有藥品充分溶解后，裝入試管中，放到滅菌鍋里，在121°C的條件下對其進行滅菌，滅菌25min后取出，放入凈化工作臺中打開紫外殺菌燈，殺菌28min最后自然冷卻至室溫得到斜面培養(yǎng)基;
(2)接種到搖瓶深層發(fā)酵培養(yǎng)基中，先配制深層發(fā)酵培養(yǎng)基，深層發(fā)酵培養(yǎng)基按質量份數計包括以下成份:亞砸酸鈉5份，磷酸二氫鉀:0.3份，蒸餾水:8份，硫酸鎂:I份，黃豆粉:3份，麥麩:4份，玉米粉:3份；
深層發(fā)酵培養(yǎng)基的制備具體為:首先把麥麩、玉米粉、黃豆粉放入燒杯中，加水煮沸25min，然后用紗布濾去雜質，加入磷酸二氫鉀和硫酸鎂，加水定容至lOOmL，再加熱7min，待所有藥品充分溶解后，裝入500ml的搖瓶中，放到滅菌鍋里，在121°C的條件下對其進行滅菌，23min后取出，放入凈化工作臺中打開紫外殺菌燈，殺菌35min，等待其自然冷卻，冷卻后向搖瓶中中加入亞砸酸鈉制得深層發(fā)酵培養(yǎng)基；
在凈化工作臺上，打開紫外燈，對相關的接種器具進行紫外照射殺菌30min，對接種環(huán)反復灼燒，然后從活化的斜面菌種中取一塊接入液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)基中，然后用注射器向深層發(fā)酵培養(yǎng)基加入亞砸酸鈉，最后將搖瓶的瓶口放在酒精燈的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的報紙將瓶口封嚴，把接入羊肚菌菌種后的搖瓶放入振蕩培養(yǎng)箱中，控制培養(yǎng)溫度為27°C，振蕩培養(yǎng)箱轉速為100r/min，振蕩4天后取出，得到富砸羊肚菌菌絲體；富砸羊肚菌深層發(fā)酵得到的富砸羊肚菌菌絲生物量為9g/L，富砸羊肚菌多糖得率為4%，砸含量為9.3 μ g/mL。
[0012]實施例2
本實施例提供一種富砸羊肚菌深層發(fā)酵工藝，該深層發(fā)酵工藝的流程為:羊肚菌母種的轉接及活化-接種到搖瓶深層發(fā)酵培養(yǎng)基中-加入亞砸酸鈉-深層發(fā)酵培養(yǎng)-富砸羊肚菌菌絲體，其中:
(O羊肚菌母種的轉接，將母種轉接在配制好的斜面培養(yǎng)基上具體為:首先將接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、打火機以及斜面培養(yǎng)基放在凈化工作臺里，打開紫外燈，對它們進行紫外照射殺菌28min，關閉紫外燈，然后從冰箱中取出保藏的母種，接種時先將接種環(huán)用酒精燈的火焰反復灼燒，待冷卻后用接種環(huán)挑取母種，能用接種環(huán)接種2塊母種，并快速接種至預先配制好的斜面培養(yǎng)基上，接種完成后，將斜面培養(yǎng)基的試管口用火焰進行殺菌，然后塞入棉塞或膠塞，將接種后的菌種放入恒溫恒濕箱中，控制溫度為24°C，靜置培養(yǎng)3天，然后將其放入0°C的冰箱中保藏；
羊肚菌母種的活化，活化前要將接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、打火機以及配制好的斜面培養(yǎng)基放在凈化工作臺里，打開紫外燈，對相關的接種器具進行紫外照射殺菌28min，然后從冰箱中取出保藏的要活化的菌種，開始接種前先將凈化工作臺的紫外燈關閉，雙手用酒精棉球進行消毒，接種時先將接種環(huán)用酒精燈的火焰反復灼燒，待冷卻后用接種環(huán)挑取菌種的菌絲塊，能用接種環(huán)接種2塊菌絲塊，并快速接種至預先配制好的斜面培養(yǎng)基上，接種完畢后，將斜面培養(yǎng)基的試管口用火焰進行殺菌，然后方可塞入棉塞或膠塞；接種結束后，將接種后的菌種放入恒溫恒濕箱中，設定溫度為25°C，靜置培養(yǎng)24h即可完成菌種的活化；
其中，羊肚菌母種轉接和活化時的斜面培養(yǎng)基按質量份數計包括以下組分:馬鈴薯:25份，葡萄糖:1份，瓊脂:2份，磷酸二氫鉀:0.2份，硫酸鎂0.2份，蒸餾水20份；
斜面培養(yǎng)基的制備具體為:首先把馬鈴薯洗凈并去皮，用刀把馬鈴薯切塊，大小均一，然后按照配方中的標準加入蒸餾水，煮沸30min后，用紗布對馬鈴薯溶液進行過濾，然后加入葡萄糖、瓊脂、磷酸二氫鉀和硫酸鎂，然后加水定容至lOOmL，再加熱5min，待所有藥品充分溶解后，裝入試管中，放到滅菌鍋里，在120°C的條件下對其進行滅菌，滅菌30min后取出，放入凈化工作臺中打開紫外殺菌燈，殺菌26min最后自然冷卻至室溫得到斜面培養(yǎng)基;
(2)接種到搖瓶深層發(fā)酵培養(yǎng)基中，先配制深層發(fā)酵培養(yǎng)基，深層發(fā)酵培養(yǎng)基按質量份數計包括以下成份:亞砸酸鈉10份，磷酸二氫鉀:0.1份，蒸餾水:5份，硫酸鎂'2份，黃豆粉:2份，麥鉄:5份，玉米粉:2份；
深層發(fā)酵培養(yǎng)基的制備具體為:首先把麥麩、玉米粉、黃豆粉放入燒杯中，加水煮沸29min，然后用紗布濾去雜質，加入磷酸二氫鉀和硫酸鎂，加水定容至lOOmL，再加熱8min，待所有藥品充分溶解后，裝入500ml的搖瓶中，放到滅菌鍋里，在121°C的條件下對其進行滅菌，20min后取出，放入凈化工作臺中打開紫外殺菌燈，殺菌28min，等待其自然冷卻，冷卻后向搖瓶中中加入亞砸酸鈉制得深層發(fā)酵培養(yǎng)基；
在凈化工作臺上，打開紫外燈，對相關的接種器具進行紫外照射殺菌32min，對接種環(huán)反復灼燒，然后從活化的斜面菌種中取一塊接入液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)基中，然后用注射器向深層發(fā)酵培養(yǎng)基加入亞砸酸鈉，最后將搖瓶的瓶口放在酒精燈的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的報紙將瓶口封嚴，把接入羊肚菌菌種后的搖瓶放入振蕩培養(yǎng)箱中，控制培養(yǎng)溫度為26°C，振蕩培養(yǎng)箱轉速為95r/min，振蕩2天后取出，得到富砸羊肚菌菌絲體；富砸羊肚菌深層發(fā)酵得到的富砸羊肚菌菌絲生物量為10g/L，富砸羊肚菌多糖得率為3%，砸含量為9.0 μ g/mL。
[0013]實施例3
本實施例提供一種富砸羊肚菌深層發(fā)酵工藝，該深層發(fā)酵工藝的流程為:羊肚菌母種的轉接及活化-接種到搖瓶深層發(fā)酵培養(yǎng)基中-加入亞砸酸鈉-深層發(fā)酵培養(yǎng)-富砸羊肚菌菌絲體，其中:
(O羊肚菌母種的轉接，將母種轉接在配制好的斜面培養(yǎng)基上具體為:首先將接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、打火機以及斜面培養(yǎng)基放在凈化工作臺里，打開紫外燈，對它們進行紫外照射殺菌20min，關閉紫外燈，然后從冰箱中取出保藏的母種，接種時先將接種環(huán)用酒精燈的火焰反復灼燒，待冷卻后用接種環(huán)挑取母種，能用接種環(huán)接種2塊母種，并快速接種至預先配制好的斜面培養(yǎng)基上，接種完成后，將斜面培養(yǎng)基的試管口用火焰進行殺菌，然后塞入棉塞或膠塞，將接種后的菌種放入恒溫恒濕箱中，控制溫度為24°C，靜置培養(yǎng)2天，然后將其放入3°C的冰箱中保藏；
羊肚菌母種的活化，活化前要將接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、打火機以及配制好的斜面培養(yǎng)基放在凈化工作臺里，打開紫外燈，對相關的接種器具進行紫外照射殺菌30min，然后從冰箱中取出保藏的要活化的菌種，開始接種前