BA生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)的不定芽最早生根時間分別為15、11、11天，生根率均達100%，平均根長分別為4.2cm,4.8cm,5.1cm ;含0.01-0.05mg/L IBA的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的不定芽根系生長快、根粗壯，主根明顯、須根多，含0.lmg/L IBA培養(yǎng)基中培養(yǎng)的不定芽下端根與莖連接處出現愈傷組織塊。
[0025]實施例4
[0026]于春季休眠芽抽條后采集5cm左右的新生嫩枝，表面消毒后接種于含0.5mg/L6-BA、6g/L瓊脂粉、30g/L蔗糖的MS培養(yǎng)基中，于25±2°C，14小時光照，光照強度20001x條件下培養(yǎng)，誘導腋芽萌發(fā)。將腋芽萌發(fā)獲得的嫩莖，剪成2-3cm帶2個葉柄的節(jié)段，接種在含 0.5mg/L 6BA、0.05mg/L NAA、0.05mg/L TDZ、6g/L 瓊脂粉、30g/L 蔗糖、0.25g/L MES,0.2g/L左旋谷酰胺的MS培養(yǎng)基中，于25±2°C，14小時光照，光照強度20001 x條件下培養(yǎng)進行增殖培養(yǎng)。將增殖獲得的生長健壯、長3-4cm的單芽接種在含0.05mg/L IBA、7g/L瓊脂粉、15g/L蔗糖、0.25g/L MES的1/2MS培養(yǎng)基中，于25±2°C，14小時光照，光照強度20001x條件下生根培養(yǎng)。當根長至3-6cm時，將瓶蓋打開，煉苗3天。先用鑷子輕輕夾出幼苗，在流水中輕輕沖洗根部培養(yǎng)基，移栽至裝有基質(珍珠巖:泥炭土 = I: I)的一次性塑料杯中，將塑料杯每10個置于塑料自封袋中，室溫煉苗30天后，調查成活率，將生根苗上盆栽于珍珠巖+蛭石+田園土(比例3: 2: 5)的基質中生長。結果表明，按此程序進行金葉復葉槭的組培快繁，田間采集的外植體接種后，腋芽啟動可在培養(yǎng)15天后開始；啟動獲得的無菌材料增殖倍數平均為5.8，最高可達6.2 ;不定芽生根率達100%，根系粗壯發(fā)達，移栽成活率達78%。
[0027]實施例5
[0028]于春季休眠芽抽條后采集5cm左右的新生嫩枝，表面消毒后接種于含0.5mg/L6-BA、6g/L瓊脂粉、30g/L蔗糖的MS培養(yǎng)基中，于20±2°C，14小時光照，光照強度20001 x條件下培養(yǎng)，誘導腋芽萌發(fā)。將腋芽萌發(fā)獲得的嫩莖，剪成2-3cm帶2個葉柄的節(jié)段，接種在含 0.5mg/L 6BA、0.05mg/L NAA、0.05mg/L TDZ、6g/L 瓊脂粉、30g/L 蔗糖、0.25g/L MES,0.2g/L左旋谷酰胺的MS培養(yǎng)基中，于20±2°C，14小時光照，光照強度20001x條件下培養(yǎng)進行增殖培養(yǎng)。將增殖獲得的生長健壯、長3-4cm的單芽接種在含0.05mg/L IBA、7g/L瓊脂粉、15g/L蔗糖、0.25g/L MES的1/2MS培養(yǎng)基中，于20±2°C，14小時光照，光照強度20001X條件下生根培養(yǎng)。當根長至3-6cm時，將瓶蓋打開，煉苗3天。先用鑷子輕輕夾出幼苗，在流水中輕輕沖洗根部培養(yǎng)基，移栽至裝有基質(珍珠巖:泥炭土 = I: I)的一次性塑料杯中，將塑料杯每10個置于塑料自封袋中，室溫煉苗30天后，調查成活率，將生根苗上盆栽于珍珠巖+蛭石+田園土(比例3: 2: 5)的基質中生長。本實施例和實施例4唯一的區(qū)別是培養(yǎng)溫度不同。結果表明，25±2°C條件下培養(yǎng)的試管苗，在培養(yǎng)后期如不及時更換培養(yǎng)基，下部片葉片會出現輕微失綠白化現象，影響移栽成活率；培養(yǎng)溫度降至20±2°C后，可有效阻止試管苗下部葉片失綠白化現象，提高移栽成活率，該溫度下的移栽成活率為85%。兩種溫度在芽啟動時間、增殖倍數、生根性能方面影響不顯著。
[0029]綜上所述，通過調節(jié)培養(yǎng)基中激素的比例，控制培養(yǎng)條件，能夠顯著提前金葉復葉槭組織培養(yǎng)的芽啟動時間、提高試管苗增殖系數、增加生根性能，促進移栽成活率，本發(fā)明的栽培方法平均每個外植體增殖芽子數可達5.8個，不定芽生根率達100%，主根發(fā)達，須根數量多，移栽成活率達85%，為金葉復葉槭工廠化育苗提供了一條有效途徑。
[0030]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。
【主權項】
1.一種金葉復葉槭的組培快繁方法，其特征在于，包括如下步驟: 51、于春季休眠芽抽條后采集5cm左右的新生嫩枝，表面消毒后接種于附加0.5-1.0mg/L的6-芐基氨基嘌呤的MS培養(yǎng)基中，于20±2°C -25±2°C，14小時光照，光照強度20001x條件下培養(yǎng)，誘導腋芽萌發(fā)至6-8cm長的嫩莖； 52、取步驟SI獲得的嫩莖，剪成2-3cm帶2個葉柄的節(jié)段，接種于附加0.5mg/L 6-芐基氨基嘌呤、0.01-0.05mg/L噻苯隆、0.05mg/L萘乙酸的MS培養(yǎng)基中，于20±2°C -25±2°C，14小時光照，光照強度20001χ條件下，進行增殖培養(yǎng)； 53、選取步驟S2所得的生長健壯、長3-4cm的單芽接種于含0.01-0.05mg/L吲哚丁酸的1/2MS培養(yǎng)基中，于20±2°C -25±2°C，14小時光照，光照強度20001x條件下，進行生根培養(yǎng)。 54、當根長至3-6cm時，將瓶蓋打開，煉苗3天后，用鑷子輕輕夾出幼苗，在流水中輕輕沖洗根部培養(yǎng)基，移栽至裝有基質的一次性塑料杯中，將塑料杯每10個置于塑料自封袋中，室溫煉苗30天后，將生根苗上盆栽于含有珍珠巖、蛭石和田園土的基質中生長。2.根據權利要求1所述的金葉復葉槭組培快繁方法，其特征在于，所述步驟SI中的培養(yǎng)基中還包含6g/L瓊脂粉、30g/L蔗糖。3.根據權利要求1所述的金葉復葉槭組培快繁方法，其特征在于，所述步驟S2中增殖培養(yǎng)基還包含6g/L瓊脂粉、30g/L蔗糖、0.25g/L 2-嗎啉乙磺酸、0.2g/L左旋谷酰胺。4.根據權利要求1所述的金葉復葉槭組培快繁方法，其特征在于，所述步驟S3中生根培養(yǎng)基還包含7g/L瓊脂粉、15g/L蔗糖、0.25g/L 2-嗎啉乙磺酸。5.根據權利要求1所述的金葉復葉槭組培快繁方法，其特征在于，所述步驟S4中一次性塑料杯的基質由珍珠巖和泥炭土按1:1的比例混合而成。6.根據權利要求1所述的金葉復葉槭組培快繁方法，其特征在于，所述步驟S4中珍珠巖、輕石、田園土的比例為3: 2: 5。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種金葉復葉槭的組培快繁方法，包括如下步驟：于春季休眠芽抽條后采集5cm左右的新生嫩枝，表面消毒后接種于附加0.5-1.0mg/L的6-芐基氨基嘌呤的MS培養(yǎng)基中，誘導腋芽萌發(fā)；將獲得的嫩莖，剪成2-3cm長的節(jié)段，接種于MS培養(yǎng)基中，進行增殖培養(yǎng)；將生長健壯、長3-4cm的單芽接種于1/2MS培養(yǎng)基中，進行生根培養(yǎng)；當根長至3-6cm時，將瓶蓋打開，煉苗3天后，移栽。本發(fā)明通過培養(yǎng)基組分的調整和培養(yǎng)條件的控制，能夠較快啟動金葉復葉槭離體材料腋芽萌發(fā)，誘導試管苗莖段不經愈傷組織直接產生數目較多的不定芽，須根數量多，移栽成活率達85％，為金葉復葉槭工廠化育苗提供了一條有效途徑。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN104920225
【申請?zhí)枴緾N201510411373
【發(fā)明人】賈小明, 張煥玲, 石引剛, 張波, 賈昕曄, 陳星星, 王麗娜, 曹晴
【申請人】西北農林科技大學
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年7月3日