酵液重新淋入周圍香米中，發(fā)酵液將越聚越多，至香米發(fā)軟、不成形，發(fā)酵完成，此時(shí)的發(fā)酵液呈酸甜，稍有苦味，如果呈苦辣味，說明發(fā)酵已過，不能使用。
[0087]4、混合發(fā)酵
[0088]將中藥帶渣加入發(fā)酵后的香米中，另將上述紅棗菌液按照工藝比例加入，加入上述混合發(fā)酵液1-3倍的蒸餾水將發(fā)酵容器加滿，密封，35°C發(fā)酵24小時(shí)。
[0089]5、過濾:將發(fā)酵好的醪糟裝入潔凈布袋中壓濾，濾液在0-4°C冰柜中靜置8小時(shí)，取上清液，濃縮至0.2g (生藥)/mL，即得解酒保健飲料。
[0090]6、高溫滅菌:將解酒保健飲料放入消毒過的容器中，水浴加熱至70°C，保溫30分鐘，冷卻后，裝入已消毒的玻璃瓶中，密封，置于o-1o°c陰涼處或冷庫中存放，即為成品。
[0091]實(shí)施例3
[0092]一、中藥發(fā)酵用種子菌液的制備
[0093]同實(shí)施例1
[0094]二、紅棗漿加工工藝(紅棗25%的比例)
[0095]將新鮮紅棗1250g用清水清洗干凈(如果是干棗需在60°C熱水中浸泡3小時(shí))，用打核器去除棗核，加入3750mL清水，在70°C水浴中浸泡30分鐘，放入打漿機(jī)中打漿，然后放入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，121°C滅菌20分鐘，冷卻后加入紅棗漿重量10%的嗜酸乳桿菌菌液，35°C密封發(fā)酵12小時(shí)。在0-4°C條件下備用。
[0096]三、中藥(25%)
[0097]枳犋子150g，葛根100g，葛花200g，白茅根50g，菌陳50g，山楂120g，陳皮40g，薄荷10g,白術(shù)150g，茯苳100g，虎杖150g，生甘草40g。
[0098]1、中藥配制
[0099]將解酒劑中藥按照上述配方比例混合，在粉碎機(jī)中打碎，過40目篩，按照中藥和水1: 10的比例加入干凈的井水或經(jīng)曝氣2小時(shí)的自來水，裝入適當(dāng)?shù)娜萜髦?，容量不超過容器容量的三分之一，在121°C滅菌20分鐘。
[0100]2、中藥發(fā)酵
[0101]將紅曲霉種子液按照上述中藥液1.5%的比例加入，將容器置于搖床上，轉(zhuǎn)速160轉(zhuǎn)/分鐘，溫度30°C，間隔72小時(shí)后再加入上述中藥液0.2%的米曲霉種子液，調(diào)整培養(yǎng)溫度至34°C，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，至發(fā)酵液顯棕紅色為止。將裝有發(fā)酵液的容器放入50°C水浴中，保溫40分鐘，升溫至70°C，保溫40分鐘，溫度降至50°C以下，密封，在0-4°C環(huán)境下保存，備用。
[0102]3、香米發(fā)酵(20% )
[0103]將100g香米在水中浸泡5小時(shí)左右，以手掰開可碾成粉末為止，將泡好的大米放入底部鋪有紗布的蒸籠中，大火加熱至蒸籠冒出白汽，保持約15分鐘左右，揭開籠蓋，把香米移出，壓碎結(jié)塊，將米攤開放至溫度40-45?左右，分別按照香米干重10(g): ImL的比例接入紅曲霉菌種和0.4% (或2g/500g)的安琪甜酒曲，充分?jǐn)嚢杈鶆?，裝入陶瓷大缸中，將米拍至缸壁，中間留有上大下小的空洞，在30°C發(fā)酵48小時(shí)。約18小時(shí)后，缸中小洞會(huì)集聚發(fā)酵液，每天將發(fā)酵液重新淋入周圍香米中，發(fā)酵液將越聚越多，至香米發(fā)軟、不成形，發(fā)酵完成，此時(shí)的發(fā)酵液呈酸甜，稍有苦味，如果呈苦辣味，說明發(fā)酵已過，不能使用。
[0104]4、混合發(fā)酵
[0105]將中藥帶渣加入發(fā)酵后的香米中，另將上述紅棗菌液按照工藝比例加入，加入上述混合發(fā)酵液1-3倍的蒸餾水將發(fā)酵容器加滿，密封，35°C發(fā)酵24小時(shí)。
[0106]5、過濾:將發(fā)酵好的醪糟裝入潔凈布袋中壓濾，濾液在0-4°C冰柜中靜置8小時(shí)，取上清液，濃縮至0.2g (生藥)/mL，即得解酒保健飲料。
[0107]6、高溫滅菌:將解酒保健飲料放入消毒過的容器中，水浴加熱至70°C，保溫30分鐘，裝入已消毒的玻璃瓶中，密封，置于o-1o°c陰涼處或冷庫中存放，即為成品。
[0108]實(shí)施例4
[0109]一、中藥發(fā)酵用種子菌液的制備
[0110]同實(shí)例I
[0111]二、紅棗漿加工工藝(紅棗20%的比例)
[0112]同實(shí)例I
[0113]三、中藥(25%)
[0114]枳犋子200g，葛根150，葛花100，白茅根150g，菌陳150g，山楂50g，陳皮10g,薄荷30g，白術(shù)50g，茯苳50g，虎杖100g，生甘草120g，共1250g。
[0115]1、中藥配制
[0116]將解酒劑按照上述配方比例混合，在粉碎機(jī)中打碎，過40目篩，調(diào)整蒸餾水調(diào)整中藥水分，使水分含量達(dá)到50%，裝入適當(dāng)?shù)娜萜髦?，?21°C滅菌20分鐘。
[0117]2、中藥發(fā)酵
[0118]將紅曲霉種子液按照上述中藥干重15%的比例加入，用滅菌過得玻璃棒攪拌或者在三角瓶中震蕩使混合均勻，放入適當(dāng)大小的容器中，使中藥厚度不超過1.2cm，放入28°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時(shí)，加入中藥干重2%的米曲霉種子液，調(diào)整培養(yǎng)溫度至34°C，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)，將培養(yǎng)好的中藥按照中藥和水1: 9的比例加入滅菌后的無菌水，并在振蕩器中震蕩I小時(shí)混合均勻，將裝有發(fā)酵液的容器放入50 °C水浴中，保溫40分鐘，升溫至70 °C，保溫40分鐘，溫度降至50°C以下，密封，在0-4°C環(huán)境下保存，備用。
[0119]其余同實(shí)例I
[0120]實(shí)驗(yàn)部分
[0121]1、實(shí)驗(yàn)小鼠
[0122]健康昆明種雄性小鼠，20 ±2g
[0123]2、實(shí)驗(yàn)分組
[0124]將140只小鼠按照完全隨機(jī)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法，分成7個(gè)小組，每個(gè)小組20只小鼠，7個(gè)小組分別為:空白對(duì)照組:不服用解酒飲料，也不服用白酒，服用和實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水。
[0125]生理鹽水陰性對(duì)照組:服用解酒飲料等量的生理鹽水，不服用解酒飲料，服用白酒。
[0126]葛花解酲湯陽性對(duì)照組:葛花解酲湯為我國(guó)中醫(yī)解酒名方，以其作為陽性對(duì)照，月艮用熬制好的葛花解酲湯，服用白酒。
[0127]未發(fā)酵中藥陽性對(duì)照組:中藥經(jīng)過熬制，未經(jīng)過發(fā)酵，其余和發(fā)酵中藥組相同。月艮用中藥，服用白酒。
[0128]發(fā)酵中藥低劑量組、發(fā)酵中藥中劑量組、發(fā)酵中藥高劑量組，服用白酒，服用相應(yīng)劑量的解酒飲料。
[0129]防醉酒和解酒實(shí)驗(yàn)的分組安排相同。
[0130]3、實(shí)驗(yàn)藥劑的制備
[0131]乙醇脫氫酶(ADH)試劑盒，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)試劑盒，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST/GOT)試劑盒
[0132]丙二醛(MDA)試劑盒，還原型谷胱甘肽(GSH)試劑盒，甘油三脂試劑盒，均來自(南京建成生物工程研宄所)
[0133]生理鹽水:用少量蒸餾水將9克實(shí)驗(yàn)充分溶解，倒入100mL容量瓶中，配制成含量為0.9%的生理鹽水。
[0134]北京紅星二鍋頭:市售56度北京二鍋頭白酒。
[0135]葛花解酲湯:按照葛花解酲湯的配方，取適量重量的藥材用蒸餾水清洗干凈，晾干，粉碎，過40目篩，加藥物重量8倍量的蒸餾水，煎煮lh，濾過，向藥物殘?jiān)屑尤?倍量的蒸餾水，煎煮lh，濾過，再按照同樣的步驟重復(fù)一次，將三次濾液合并，濃縮至1.32g/mL。
[0136]葛花解酲湯配方:蓮花青皮(去瓢)0.9克木香1.5克橘皮(去白)人參(去蘆)豬苓(去黑皮)白茯苓各4.5克神曲(炒黃)澤瀉干生姜白術(shù)各6克白豆蔻仁葛花砂仁各15克。《脾胃論》
[0137]未發(fā)酵中藥:將中藥按照傳統(tǒng)方法提取，將一定量中藥放入合適容器中，加水量為中藥量的8倍，熬制60分鐘，過濾，加入殘?jiān)?倍量的水，熬制40分鐘，重復(fù)兩次，合并三次濾液，加入發(fā)酵好的大米中，其它操作同解酒保健飲料。濃縮至1.32g/mL，按照0.2mL/20g的用量給小鼠灌胃。
[0138]發(fā)酵中藥組:取適量解酒保健飲料，發(fā)酵中藥組低劑量組濃縮至0.66g (生藥)/mL,低濃度組濃縮至1.32g/mL，高濃度組濃縮至2.64g/mL，按照0.2mL/20g的用量給小鼠灌田冃ο
[0139]4、解酒保健飲料對(duì)小鼠防醉酒實(shí)驗(yàn)
[0140]將140只小鼠按照完全隨機(jī)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法，分成7個(gè)小組，每個(gè)小組20只小鼠，7個(gè)小組分別為:正常組，生理鹽水陰性對(duì)照組，葛花解酲湯陽性對(duì)照組，未發(fā)酵中藥陽性對(duì)照組，發(fā)酵中藥低劑量組，發(fā)酵中藥中劑量組，發(fā)酵中藥高劑量組
[0141]各試驗(yàn)組小鼠隔夜禁食不禁水過夜12小時(shí)，各組小鼠按照設(shè)定計(jì)量一次給藥，艮P，空白對(duì)照組、生理鹽水組灌服0.2mL/20g的生理鹽水，其它實(shí)驗(yàn)組小鼠按照0.2mL/20g的用量服用解酒藥物，30分鐘后，空白對(duì)照組灌服0.15mL/10g的生理鹽水，各組均以0.15ml/10g體重的用量灌胃56度北京紅星二鍋頭白酒。以小鼠從清醒到翻正反射消失的時(shí)間作為耐受時(shí)間，以翻正反射是否消失作為醉酒的判斷標(biāo)準(zhǔn)。判定的操作方法為:小鼠出現(xiàn)醉酒行為時(shí)，將其背向下放入鼠籠中，小鼠背向下的姿勢(shì)保持30秒以上，認(rèn)為反正反射消失。觀察小鼠活動(dòng)及死亡情況，并記錄24小時(shí)內(nèi)小數(shù)的死亡數(shù)量。
[0142]5、防醉酒實(shí)驗(yàn)血液指標(biāo)的測(cè)定。
[0143]將解酒保健飲料防醉酒實(shí)驗(yàn)中的小鼠依照上述防醉酒實(shí)驗(yàn)連續(xù)灌胃4天，每天一次，觀察記錄小鼠步態(tài)情況，翻正反射消失時(shí)間、恢復(fù)時(shí)間和耐受時(shí)間。第5天禁食12小時(shí)后，眼球取血，3500r/min離心5min，取上清液按照各試劑盒說明操作測(cè)定ALT和AST活性，之后，斷頸處死小鼠，取出肝臟，用PBS緩沖液沖洗后，用濾紙吸干水分，稱量肝臟重量。把肝臟剪碎，加入PBS緩沖液，均漿后以3500r/min離心5min，取上清液制成10%肝勻漿上清液，分別測(cè)定丙二醛、谷胱甘肽、甘油三脂含量和乙醇脫氫酶活性。
[0144]6、解酒保健飲料對(duì)小鼠解酒實(shí)驗(yàn)
[0145]各試驗(yàn)組小鼠隔夜禁食12小時(shí)，空白對(duì)照組服用0.15ml/10g的生理鹽水，各組均以0.15ml/10g體重的用量灌胃56度北京紅星二鍋頭白酒，30分鐘后，生理鹽水組和空白對(duì)照組灌服生理0.2mL/20g的生理鹽水，其它實(shí)驗(yàn)組小鼠按照設(shè)定劑量一次給藥，以小鼠翻正反射消失至清醒作為醒酒時(shí)間，觀察并記錄小鼠步態(tài)情況，翻正反射消失時(shí)間和恢復(fù)時(shí)間，計(jì)算出耐受時(shí)間和醉酒維持時(shí)間。
[0146]7、防醉酒實(shí)驗(yàn)血液指標(biāo)的測(cè)定。
[0147]將解酒試驗(yàn)中小鼠禁食12小時(shí)后，眼球取血，3500r/min離心5min，取上清液按照各試劑盒