為0-36個(gè)月的人類受試者中改善認(rèn)知發(fā)展、運(yùn)動(dòng) 發(fā)展和/或社會(huì)情感發(fā)展或用于在年齡為0-36個(gè)月的人類受試者中預(yù)防認(rèn)知障礙、運(yùn)動(dòng)障 礙和/或社會(huì)情感障礙的營養(yǎng)組合物，其包含
[0042]a)由產(chǎn)乳酸細(xì)菌發(fā)酵的乳源產(chǎn)品，所述發(fā)酵的乳源產(chǎn)品包含乳酸和/或乳酸鹽， 和
[0043] b)至少0. 2g不可消化的寡糖/100ml營養(yǎng)組合物和/或以所述營養(yǎng)組合物的干 重計(jì)至少1. 0重量％的不可消化的寡糖，其中所述不可消化的寡糖是選自如下的一種或多 種：低聚半乳糖、低聚果糖、糖醛酸低聚糖、低聚葡萄糖、低聚木糖、低聚甘露糖、低聚阿拉伯 糖、低聚葡甘露糖、低聚半乳甘露糖、大豆低聚糖、低聚異麥芽糖、不可消化的糊精、低聚阿 拉伯半乳糖、低聚龍膽糖、黑曲霉低聚糖、殼低聚糖、低聚巖藻糖、唾液酸寡糖，以及
[0044] c)鐵。
[0045] 本發(fā)明還涉及一種營養(yǎng)組合物，其包含
[0046]a)以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì)至少25重量％的由產(chǎn)乳酸細(xì)菌發(fā)酵的乳源產(chǎn)品， 其包含乳酸和/或乳酸鹽，和
[0047] b)至少0. 2g不可消化的寡糖/100ml營養(yǎng)組合物和/或以所述營養(yǎng)組合物的干 重計(jì)至少1. 0重量％的不可消化的寡糖，其中所述不可消化的寡糖為選自如下的一種或多 種：低聚半乳糖、低聚果糖、糖醛酸低聚糖、低聚葡萄糖、低聚木糖、低聚甘露糖、低聚阿拉伯 糖、低聚葡甘露糖、低聚半乳甘露糖、大豆低聚糖、低聚異麥芽糖、不可消化的糊精、低聚阿 拉伯半乳糖、低聚龍膽糖、黑曲霉低聚糖、殼低聚糖、低聚巖藻糖、唾液酸寡糖，以及
[0048]c)鐵，其濃度為0? 4-0. 7mg鐵/100ml營養(yǎng)組合物和/或0? 03-0. 055mg鐵/g營養(yǎng) 組合物干重。
[0049] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述營養(yǎng)組合物一一其包含以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì)至少 25重量％的由產(chǎn)乳酸細(xì)菌發(fā)酵的乳源產(chǎn)品，所述乳源產(chǎn)品包含乳酸和/或乳酸鹽一一包含 以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì)〇. 1-1. 5重量％的乳酸和乳酸鹽的總和，和/或0. 01-0. 20g乳 酸和/或乳酸鹽的總和/l〇〇ml營養(yǎng)組合物，其中以總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計(jì)，L-乳酸和 L-乳酸鹽的總和超過50重量％。
[0050] 或者，本發(fā)明涉及一種營養(yǎng)組合物，其包含
[0051]a)以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì)0.1-1. 5重量％的乳酸和乳酸鹽的總和，和/或 0. 01-0. 20g的乳酸和/或乳酸鹽的總和/100ml營養(yǎng)組合物，其中，以總?cè)樗岷腿樗猁}的總 和計(jì)，L-乳酸和L-乳酸鹽的總和超過50重量％，以及
[0052]b)至少0. 2g不可消化的寡糖/100ml營養(yǎng)組合物和/或以所述營養(yǎng)組合物的干 重計(jì)至少1. 0重量％的不可消化的寡糖，其中所述不可消化的寡糖是選自如下的一種或多 種：低聚半乳糖、低聚果糖、糖醛酸低聚糖、低聚葡萄糖、低聚木糖、低聚甘露糖、低聚阿拉伯 糖、低聚葡甘露糖、低聚半乳甘露糖、大豆低聚糖、低聚異麥芽糖、不可消化的糊精、低聚阿 拉伯半乳糖、低聚龍膽糖、黑曲霉低聚糖、殼低聚糖、低聚巖藻糖、唾液酸寡糖，以及
[0053]c)鐵，其濃度為0? 4-0. 7mg鐵/100ml營養(yǎng)組合物和/或0? 03-0. 055mg鐵/g營養(yǎng) 組合物干重。
[0054] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述營養(yǎng)組合物一一其包含以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì) 0. 1-1. 5重量％的乳酸和乳酸鹽的總和，和/或0. 01-0. 20g乳酸和/或乳酸鹽的總和 /100ml營養(yǎng)組合物，其中以總?cè)樗岷腿樗猁}的總和計(jì)，L-乳酸和L-乳酸鹽的總和多于50 重量％-一包含以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì)至少25重量％的由產(chǎn)乳酸細(xì)菌發(fā)酵的乳源產(chǎn) 品，所述乳源產(chǎn)品包含乳酸和/或乳酸鹽。
[0055] 應(yīng)注意的是，不管在本說明書中何處使用如"本發(fā)明營養(yǎng)組合物"或"根據(jù)（本） 發(fā)明的營養(yǎng)組合物"的詞語，其也是指根據(jù)本發(fā)明的方法和用途。
[0056] 膳食鐵
[0057] 本發(fā)明營養(yǎng)組合物包含鐵。在本發(fā)明的上下文中，鐵意指Fe2+或Fe3+。優(yōu)選地，所 述營養(yǎng)組合物包含非血紅素鐵，更優(yōu)選一種或多種選自以下的鐵源：硫酸亞鐵、乳酸亞鐵、 葡萄糖酸亞鐵、甘氨酸亞鐵、檸檬酸亞鐵、富馬酸亞鐵、二磷酸鐵（ferricdiphosphate)、及 枸櫞酸鐵銨，更優(yōu)選硫酸亞鐵和乳酸亞鐵。不管在本說明書中何處提到鐵的含量或濃度，其 是指Fe2+或Fe3+的含量或濃度，因此不包括鐵源的抗衡離子如硫酸根、乳酸根、葡糖酸根等 的重量。優(yōu)選二價(jià)鐵源，因?yàn)槿齼r(jià)鐵源需要在體內(nèi)被轉(zhuǎn)化為二價(jià)鐵，在年齡為0-36個(gè)月的 人類受試者（如嬰兒和幼兒）中這種能力可能受到限制。
[0058] 本發(fā)明營養(yǎng)組合物優(yōu)選包含至少0. 2mg鐵/100ml，更優(yōu)選至少0. 4mg/100ml。本 發(fā)明營養(yǎng)組合物優(yōu)選包含至少〇. 〇15mg鐵/g干重，更優(yōu)選至少0. 03mg/g干重。本發(fā)明營 養(yǎng)組合物優(yōu)選包含至少0. 3mg鐵/lOOkcal，更優(yōu)選至少0. 6mg/100kcal。最小量應(yīng)優(yōu)選使 得確保充足的鐵攝入并預(yù)防缺鐵癥。
[0059] 本發(fā)明營養(yǎng)組合物優(yōu)選包含不超過1.7mg鐵/100ml，更優(yōu)選不超過1.4mg鐵 /100ml，更優(yōu)選不超過0. 9mg鐵/100ml，甚至更優(yōu)選不超過0. 7mg鐵/100ml。本發(fā)明營養(yǎng) 組合物優(yōu)選包含不超過0. lmg鐵/g干重，更優(yōu)選不超過0. 065mg鐵/g干重，甚至更優(yōu)選不 超過0. 055mg鐵/g干重。本發(fā)明營養(yǎng)組合物優(yōu)選包含不超過3mg鐵/lOOkcal，更優(yōu)選不超 過2mg鐵/lOOkcal，甚至更優(yōu)選不超過1. 3mg鐵/lOOkcal。太多鐵可通過過氧化多不飽和 酸而導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量差并可具有不利的健康影響。所發(fā)現(xiàn)的提高的鐵生物利用率允許鐵濃度 比通常存在于嬰兒配方物中的鐵濃度稍微降低。
[0060] 發(fā)酵的乳源產(chǎn)品
[0061] 發(fā)酵是使用通常為有機(jī)化合物的內(nèi)源電子受體，從碳水化合物（如存在于牛奶中 的乳糖）的氧化中獲得能量的過程。這與細(xì)胞呼吸作用形成對(duì)比，在細(xì)胞呼吸作用中，電 子通過電子傳遞鏈被提供給外源電子受體（如氧氣）。在本發(fā)明中，通過產(chǎn)乳酸細(xì)菌進(jìn)行 的乳源產(chǎn)品的發(fā)酵具有乳源產(chǎn)品中存在的碳水化合物轉(zhuǎn)化為有機(jī)酸的通常含義。除了乳酸 以外，這些形成的有機(jī)酸還可包含其他有機(jī)酸如醋酸。乳酸細(xì)菌還可被稱為產(chǎn)乳酸細(xì)菌， 包括鏈球菌屬（Streptococcus)、乳球菌屬（Lactococcus)、乳桿菌屬（Lactobacillus)、明 串珠菌屬（Leuconostoc)、腸球菌屬（Enterococcus)、酒球菌屬（Oenococcus)、片球菌屬 (Pediococcus)和雙歧桿菌屬（Bifidobacterium)的細(xì)菌。優(yōu)選地，所述乳源產(chǎn)品未被保加 利亞乳桿菌（Lactobacillusbulgaricus)發(fā)酵。經(jīng)保加利亞乳桿菌發(fā)酵的產(chǎn)品被認(rèn)為不適 合嬰兒，因?yàn)閶雰褐袑-乳酸鹽轉(zhuǎn)化為丙酮酸鹽的特異性脫氫酶的活性遠(yuǎn)低于轉(zhuǎn)化L-乳 酸鹽的脫氫酶的活性。
[0062] 根據(jù)本發(fā)明，所述營養(yǎng)組合物包含由產(chǎn)乳酸細(xì)菌發(fā)酵的乳源產(chǎn)品。所述發(fā)酵的乳 源產(chǎn)品包含乳酸和/或乳酸鹽。優(yōu)選地，所述發(fā)酵的乳源產(chǎn)品還包含選自以下的一種或多 種：乳清、乳清蛋白、乳清蛋白水解產(chǎn)物、酪蛋白及酪蛋白水解產(chǎn)物。術(shù)語"發(fā)酵的乳源產(chǎn)品" 包括發(fā)酵的牛奶。通過孵育牛奶（例如，脫脂牛奶）和至少一種產(chǎn)乳酸細(xì)菌的結(jié)合物，或通 過孵育包含乳糖和優(yōu)選的選自乳清、乳清蛋白、乳清蛋白水解產(chǎn)物、酪蛋白和酪蛋白水解產(chǎn) 物中的一種或多種的組合物和至少一種產(chǎn)乳酸細(xì)菌的結(jié)合物來獲得所述發(fā)酵的乳源產(chǎn)品， 所述產(chǎn)乳酸細(xì)菌優(yōu)選為嗜熱鏈球菌（Streptococcusthermophilus)。優(yōu)選地，將所述結(jié)合 物孵育10分鐘至約6個(gè)小時(shí)。孵育期間的溫度優(yōu)選為20-50°C。孵育后，優(yōu)選對(duì)孵育的產(chǎn) 品進(jìn)行熱處理。通過此熱處理，優(yōu)選至少90%的活乳酸細(xì)菌被滅活。因此，在本發(fā)明的一個(gè) 實(shí)施方案中，所述營養(yǎng)組合物中的產(chǎn)乳酸細(xì)菌是滅活的和/或非復(fù)制型的。熱處理優(yōu)選在 80-180°C的溫度下進(jìn)行。制備適于本發(fā)明目的的發(fā)酵的乳源產(chǎn)品的過程本身是已知的。以 引用的方式納入本文的EP778885特別在實(shí)施例7中公開了制備發(fā)酵的乳源產(chǎn)品的合適的 方法。以引用的方式納入本文的FR2723960特別在實(shí)施例6中公開了制備發(fā)酵的乳源產(chǎn) 品的合適的方法。
[0063] 簡單來說，含乳糖和任選的其他大量營養(yǎng)物如（植物）脂肪、酪蛋白、乳清蛋白、維 生素和/或礦物質(zhì)等的乳源產(chǎn)品（優(yōu)選經(jīng)過巴氏滅菌）被濃縮，例如濃縮至值為15-50%的 干物質(zhì)，然后用嗜熱鏈球菌（S.thermophilus)接種，例如用5%的含Kf-lO113細(xì)菌/ml的培 養(yǎng)物接種。發(fā)酵溫度和持續(xù)時(shí)間如上所述。適當(dāng)?shù)兀诎l(fā)酵之后，經(jīng)發(fā)酵的乳源產(chǎn)品可經(jīng)巴 氏滅菌或消毒，并且例如經(jīng)過噴霧干燥或凍干以提供適用于配制成終產(chǎn)品的形式。
[0064] 為了本發(fā)明的目的優(yōu)選用于制備發(fā)酵的乳源產(chǎn)品的嗜熱鏈球菌的細(xì)菌菌株在底 物發(fā)酵過程中形成（develop) 半乳糖苷酶活性。優(yōu)選地，半乳糖苷酶活性與酸度 同時(shí)形成。優(yōu)選地，半乳糖苷酶活性形成至足以使發(fā)酵的乳源產(chǎn)品隨后富集低聚半乳 糖。因此，優(yōu)選地，當(dāng)在含乳糖的培養(yǎng)基（特別是基于牛奶濃縮物的培養(yǎng)基）中培養(yǎng)時(shí)， 適合的嗜熱鏈球菌菌株完成培養(yǎng)基的發(fā)酵，并伴有高產(chǎn)量的低聚半乳糖。適合的嗜熱鏈 球菌菌株的選擇記載于EP778885的實(shí)施例2和FR2723960的實(shí)施例1中。然后選擇 嗜熱鏈球菌的優(yōu)選菌株，其在形成的半乳糖苷酶活性的同時(shí)也產(chǎn)生低聚半乳糖。為 了本發(fā)明的目的用于制備發(fā)酵的乳源產(chǎn)品的嗜熱鏈球菌的優(yōu)選菌株已由達(dá)能日爾維公司 (CompagnieGervaisDanone)于 1995 年 8 月 23 日以登錄號(hào) 1-1620 和于 1994 年 8 月 25 日以登錄號(hào)1-1470保藏于法國微生物保藏中心（CollectionNationaledeCulturesde Microorganismes,CNCM)，CNCM由巴斯德研究所經(jīng)營，地址為法國巴黎DocteurRoux街25 號(hào)。優(yōu)選地，在發(fā)酵的乳源產(chǎn)品的制備中，還存在乳酸菌的其他菌株，或者同時(shí)或連續(xù)地，通 過乳酸菌的其他菌株額外發(fā)酵所述發(fā)酵的乳源產(chǎn)品。乳酸菌的其他菌株優(yōu)選選自乳桿菌屬 和雙歧桿菌屬，更優(yōu)選短雙歧桿菌（Bifidobacteriumbreve)，最優(yōu)選由達(dá)能日爾維公司于 1999年5月31日以登錄號(hào)1-2219保藏在CNCM的雙歧桿菌屬短雙歧桿菌（Bifidobacterium B.breve)菌株。優(yōu)選地，所述乳源產(chǎn)品被嗜熱鏈球菌（Streptococcusthermophilus)和/ 或短雙歧桿菌（Bifidobacteriumbreve)發(fā)酵。優(yōu)選地，所述營養(yǎng)組合物包含嗜熱鏈球菌 和/或短雙歧桿菌。優(yōu)選地，所述營養(yǎng)組合物中的產(chǎn)乳酸細(xì)菌以滅活和/或非復(fù)制形式存 在，因?yàn)槠渥柚巩a(chǎn)品中存在的大量乳糖的進(jìn)一步降解。
[0065] 本發(fā)明組合物優(yōu)選包含以總產(chǎn)品的干重計(jì)至少5重量％的經(jīng)發(fā)酵的乳源產(chǎn)品。優(yōu) 選地，所述組合物包含以總產(chǎn)品的干重計(jì)至少10重量％，更優(yōu)選至少25重量％，甚至更優(yōu) 選至少40重量％的發(fā)酵的乳源產(chǎn)品。本發(fā)明組合物包含以總產(chǎn)品的干重計(jì)至多100重量％ 的發(fā)酵的乳源產(chǎn)品。優(yōu)選地，所述組合物包含以總產(chǎn)品的干重計(jì)至多90重量％，更優(yōu)選至 多70重量％，甚至更優(yōu)選至多50重量％的發(fā)酵的乳源產(chǎn)品。
[0066] 本發(fā)明的營養(yǎng)組合物包含乳酸和/或乳酸鹽。乳酸和/或乳酸鹽在產(chǎn)乳酸細(xì)菌發(fā) 酵時(shí)形成。優(yōu)選地，以所述營養(yǎng)組合物的干重計(jì)，本發(fā)明營養(yǎng)組合物包含〇. 1-1. 5重量％的 乳酸和/或乳酸鹽，更優(yōu)選〇. 2-1. 0重量％。在一個(gè)實(shí)施方案中，優(yōu)選本發(fā)明營養(yǎng)組合物包 含0. 01-0. 20g乳酸和/或乳酸鹽/100ml營養(yǎng)