理；
[0052] 2)將混合酶溶于去離子水中，得到混合酶水溶液，其中，氧化酶水溶液中多酚氧化 酶酶活性為15U/ml、過氧化物酶酶活性為3U/ml;
[0053] 3)將步驟1)回潮處理的煙葉葉柄端置于混合酶水溶液中浸柄15min，然后按重量 比1 : 10將混合酶水溶液噴霧噴灑在煙葉上，得到含有混合酶的煙葉，其中，每克含有混合 酶的煙葉中，多酸氧化酶酶活性為I. 5U/ml、過氧化物酶酶活性為0. 3U/ml;靜置24h使煙葉 中水分平衡，再調節(jié)煙葉的含水率至24% ;
[0054] 4)將含水率為24%的煙葉置于溫度為40°C、濕度為70%的條件下發(fā)酵18天；得 到雪茄煙葉4。
[0055] 茄衣作為雪茄最外層的包裝物，通常感官質量要求燃燒性好，雜氣、刺激輕，外觀 質量要求嚴格。茄衣經氧化酶處理得到雪茄煙葉4,其煙葉整體偏紅棕色，柔韌性增強，易于 卷制，其感官質量變化不明顯。
[0056] 實施例5
[0057] 利用過氧化物酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，包括以下步驟：
[0058] 1)將30kg的雪茄茄芯上部煙在自然條件下醇化一年，然后在真空條件下對上部 煙進行回潮處理；
[0059] 2)將過氧化物酶溶于去離子水中，得到過氧化物酶水溶液，其中，過氧化物酶水溶 液中過氧化物酶酶活性為5U/ml;
[0060] 3)將步驟1)回潮處理的煙葉葉柄端置于過氧化物酶水溶液中浸柄lOmin，然后按 重量比1 : 15將過氧化物酶水溶液噴霧噴灑在煙葉上，得到含有過氧化物酶的煙葉，其中， 每克含有過氧化物酶的煙葉中，過氧化物酶酶活性為〇. 5U;靜置12h使煙葉中水分平衡，再 調節(jié)煙葉的含水率至26% ;
[0061] 4)將含水率為26%的煙葉置于溫度為35°C、濕度為65%的條件下發(fā)酵60天；得 到雪茄煙葉5。
[0062] 雪茄茄芯上部煙通常作為雪茄濃度型原料，勁頭大、刺激大、苦味重。煙葉經氧化 酶發(fā)酵處理得到雪茄煙葉5,其煙氣風格變化不大，苦味程度明顯減輕，雜氣、刺激性、勁頭 均有所減輕。
[0063] 實施例6
[0064] 利用多酚氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，包括以下步驟：
[0065] 1)將30kg的雪茄茄芯中部煙在自然條件下醇化一年，然后在真空條件下對上部 煙進行回潮處理；
[0066] 2)將多酚氧化酶溶于去離子水中，得到多酚氧化酶水溶液，其中，多酚氧化酶水溶 液中多酚氧化酶酶活性為lOU/ml;
[0067] 3)將步驟1)回潮處理的煙葉葉柄端置于多酚酶水溶液中浸柄lOmin，然后按重量 比1 : 5將多酚酶水溶液噴霧噴灑在煙葉上，得到含有多酚酶的煙葉，其中，每克含有多酚 酶的煙葉中，多酚氧化酶酶活性為IU;靜置12h使煙葉中水分平衡，再調節(jié)煙葉的含水率至 25% ；
[0068] 4)將含水率為25%的煙葉置于溫度為45°C、濕度為75%的條件下發(fā)酵25天；得 到雪茄煙葉6。
[0069] 雪茄茄芯中部煙通常作為一支雪茄香味的主要來源。煙葉經多酚氧化酶發(fā)酵處理 得到雪茄煙葉6,其煙氣風格變化不大，苦味程度明顯減輕，香氣豐富程度顯著增強，雜氣、 刺激性、勁頭均有所減輕，其使用價值大大提升。
[0070] 實施例7
[0071] 利用過氧化物酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，包括以下步驟：
[0072] 1)將30kg的雪茄茄芯下部煙在自然條件下醇化一年，然后在真空條件下對上部 煙進行回潮處理；
[0073] 2)將過氧化物酶溶于去離子水中，得到過氧化物酶水溶液，其中，過氧化物酶水溶 液中過氧化物酶酶活性為7U/ml;
[0074] 3)將步驟1)回潮處理的煙葉葉柄端置于過氧化物酶水溶液中浸柄20min，然后按 重量比1 : 5將過氧化物酶水溶液噴霧噴灑在煙葉上，得到含有過氧化物酶的煙葉，其中， 每克含有過氧化物酶的煙葉中，過氧化物酶酶活性為〇. 7U;靜置24h使煙葉中水分平衡，再 調節(jié)煙葉的含水率至25% ;
[0075] 4)將含水率為25%的煙葉置于溫度為45°C、濕度為65%的條件下發(fā)酵28天；得 到雪茄煙葉7。
[0076] 雪茄茄芯下部煙主要作為雪茄填充料，其苦味程度、雜氣、刺激較茄芯上部、中部 煙較輕。煙葉經過氧化物酶發(fā)酵處理得到雪茄煙葉6,原先的輕度苦味幾乎消失，其他感官 質量變化不大明顯。
[0077] 上述實施例中所用的原料都購于市面上，
[0078] 多酚氧化酶（PPO)，酶活性845U/g，合肥博美生物科技有限公司
[0079]過氧化物酶（辣根）（POD)，酶活性150000U/g，上海伯奧生物科技有限公司
[0080] 雪茄茄芯（上部煙、中部煙、下部煙）和雪茄茄衣都是進口物品。
[0081] 評吸試驗
[0082] 將未進過氧化酶發(fā)酵處理的雪茄茄芯（上部煙、中部煙、下部煙）、雪茄茄衣和實 施例1~7制備得到的雪茄煙葉1~7分別制備雪茄煙，將這11種雪茄煙在相同條件下進 行評吸效果監(jiān)測；監(jiān)測結果如下表1所示：
[0083] 表111種雪茄煙在相同條件下進行評吸效果表1
[0084]

[0090] 如表1和2所示：將未進過氧化酶發(fā)酵處理的雪茄茄芯（上部煙、中部煙、下部 煙）、雪茄茄衣與經過發(fā)酵得到雪茄煙相比；實施例1~7的雪茄煙葉制備得到雪茄煙的香 氣質、香氣量、余味、甜度明顯提高，雜氣和刺激性明顯降低，燃燒性能有所提高，雪茄煙的 總體品質整體提高。經過發(fā)酵得到雪茄煙苦味改善明顯，在香氣特征、煙氣特征、口感特征、 燃燒性和灰色得分上均有提高，品質得到提高。
[0091] 其它未詳細說明的部分均為現(xiàn)有技術。盡管上述實施例對本發(fā)明做出了詳盡的描 述，但它僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部實施例，人們還可以根據本實施例在不經 創(chuàng)造性前提下獲得其他實施例，這些實施例都屬于本發(fā)明保護范圍。
【主權項】
1. 一種利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：包括以下步驟： 1) 在自然條件下，醇化雪茄原煙葉，并在真空條件下對原煙葉進行回潮處理； 2) 將氧化酶溶于水水溶液中，得到氧化酶水溶液； 3) 將步驟1)回潮處理的煙葉葉柄端置于氧化酶水溶液中浸柄10~30min，然后按重 量比1 : 5~15將氧化酶水溶液噴霧噴灑在煙葉上，得到含有氧化酶的煙葉，靜置使煙葉 中水分平衡，再調節(jié)煙葉的含水率至25±1% ; 4) 將含水率為25±1 %的煙葉置于溫度為35~45°C、濕度為65~75%的條件下發(fā)酵 10~60天；得到雪茄煙葉。2. 根據權利要求1所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：所述步驟 2)中，氧化酶為多酸氧化酶和/或過氧化物酶。3. 根據權利要求2所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：所述步驟 2) 中，氧化酶為多酸氧化酶，多酸氧化酶水溶液的酶活性為10 - 30U/ml ; 或氧化酶為過氧化物酶，過氧化物酶水溶液的酶活性為5-7U/ml ; 或氧化酶為多酚氧化酶和過氧化物酶混合而成的混合酶，混合酶水溶液的中多酚氧化 酶酶活性為10_20U/ml、過氧化物酶酶酶活性為3-5U/ml。4. 根據權利要求1或2或3所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于： 所述步驟2)中，水為去離子水或純凈水。5. 根據權利要求3所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：所述步驟 3) 中，檢測煙葉中各組分酶的含量，并使每克含有多酚氧化酶的煙葉中，多酚氧化酶酶活性 為1~3U ; 或每克含有過氧化物酶的煙葉中，過氧化物酶酶活性為〇. 5~0. 7U ; 或每克含有混合酶的煙葉中，多酚氧化酶酶活性為1~2U ;過氧化物酶酶活性為 0? 3 ~0? 5U〇6. 根據權利要求5所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：所述步驟 3)中，氧化酶水溶液與煙草的重量比為1 : 10。7. 根據權利要求6所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：所述步驟 3)中，每克含有過氧化物酶的煙葉中，過氧化物酶酶活性為0. 6U。8. 根據權利要求6或7所述利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法，其特征在于：所述 步驟3)中，靜置的時間為12~24h。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用氧化酶發(fā)酵制備雪茄煙葉的方法。該方法將回潮處理的煙葉葉柄端置于氧化酶水溶液中浸柄10～30min，然后按重量比1︰5～15將氧化酶水溶液噴霧噴灑在煙葉上，得到含有氧化酶的煙葉，靜置使煙葉中水分平衡，再將含水率為25±1％的煙葉置于溫度為35～45℃、濕度為65～75％的條件下發(fā)酵10～60天；得到雪茄煙葉。本發(fā)明以雪茄煙葉為研究對象，發(fā)酵得到雪茄煙苦味改善明顯，在香氣特征、煙氣特征、口感特征、燃燒性和灰色得分上均有提高，品質得到提高。
【IPC分類】A24B15/20
【公開號】CN105029686
【申請?zhí)枴緾N201510359733
【發(fā)明人】胡捷, 張寧, 羅公金, 劉利平, 周斌
【申請人】湖北中煙工業(yè)有限責任公司
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年6月25日