1.一種在體外產(chǎn)生釉質(zhì)產(chǎn)品的方法,所述方法包括:
(a)在細(xì)胞培養(yǎng)物中提供分化的細(xì)胞;
(b)將分化的細(xì)胞暴露于誘導(dǎo)去分化的試劑,從而產(chǎn)生去分化的細(xì)胞;
(c)將所述去分化的細(xì)胞暴露于5-羥色胺受體激動(dòng)劑,從而產(chǎn)生生成包含釉質(zhì)素的細(xì)胞外基質(zhì)的成釉質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞;和
(d)將所述細(xì)胞外基質(zhì)暴露于誘導(dǎo)礦物質(zhì)化的組合物,從而產(chǎn)生釉質(zhì)產(chǎn)品。
2.一種在體外產(chǎn)生釉質(zhì)產(chǎn)品的方法,所述方法包括:
(a)在細(xì)胞培養(yǎng)物中提供干細(xì)胞或前體細(xì)胞;
(b)將干細(xì)胞或前體細(xì)胞暴露于5-羥色胺受體激動(dòng)劑,從而產(chǎn)生生成細(xì)胞外基質(zhì)的成釉質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞;和
(c)將所述細(xì)胞外基質(zhì)暴露于誘導(dǎo)礦物質(zhì)化的組合物,從而產(chǎn)生釉質(zhì)產(chǎn)品。
3.權(quán)利要求1的方法,其中所述分化的細(xì)胞是上皮細(xì)胞。
4.權(quán)利要求3的方法,其中所述上皮細(xì)胞是口腔上皮角質(zhì)形成細(xì)胞。
5.權(quán)利要求1的方法,其中所述分化的細(xì)胞從動(dòng)物收獲或是所建立的細(xì)胞系的細(xì)胞。
6.權(quán)利要求1的方法,其中誘導(dǎo)去分化的所述試劑是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子。
7.權(quán)利要求6的方法,其中所述轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子是TGFβ1。
8.權(quán)利要求1的方法,其中所述去分化的細(xì)胞表達(dá)N-鈣粘著蛋白和八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(Oct-4),但不表達(dá)E-鈣粘著蛋白。
9.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述分化的細(xì)胞、所述干細(xì)胞或所述前體細(xì)胞是經(jīng)遺傳修飾的。
10.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述5-羥色胺受體激動(dòng)劑是5-羥色胺,氮雜唑酮,曲坦,LY-334,370,拉西地酸,麥角酰二乙胺,麥斯卡林,2,5-二甲氧基-4-溴苯乙胺,氯卡色林,西沙必利,替加色羅,普盧卡必利,AS-19,或其鹽、水合物或類(lèi)似物。
11.權(quán)利要求10的方法,其中所述類(lèi)似物是二甲-4-羥色胺或N,N-二甲基色胺。
12.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述誘導(dǎo)礦物質(zhì)化的組合物包含鈣和磷酸鹽。
13.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述細(xì)胞培養(yǎng)物包含表皮生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子或成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子。
14.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述細(xì)胞培養(yǎng)物包含層粘連蛋白,膠原蛋白IV,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖或巢蛋白。
15.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述細(xì)胞培養(yǎng)物包含從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肉瘤提取的溶解的基底膜制備物。
16.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,其中所述細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)配置可使所述成釉質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞增殖成三維細(xì)胞簇。
17.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法,還包括將所述成釉質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞暴露于包含生長(zhǎng)因子的組合物的步驟。
18.權(quán)利要求17的方法,其中所述組合物包含成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子或上皮生長(zhǎng)因子。
19.通過(guò)權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所述的方法制備的釉質(zhì)產(chǎn)品。
20.一種在體外產(chǎn)生釉質(zhì)產(chǎn)品的方法,所述方法包括:
(a)提供產(chǎn)生包含釉質(zhì)素的細(xì)胞外基質(zhì)的原代細(xì)胞;和
(b)將所述原代細(xì)胞置于三維培養(yǎng)系統(tǒng)中,任選地具有誘導(dǎo)礦物質(zhì)化的試劑和/或包含生長(zhǎng)因子的組合物,其中所述原代細(xì)胞被培養(yǎng)足夠的時(shí)間以允許形成包含釉質(zhì)產(chǎn)品的釉質(zhì)類(lèi)器官。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法,其中所述原代細(xì)胞是成釉質(zhì)細(xì)胞。
22.通過(guò)權(quán)利要求20或權(quán)利要求21的方法制備的釉質(zhì)產(chǎn)品。
23.一種成型為外科修復(fù)物的方法,所述方法包括:
(a)提供通過(guò)權(quán)利要求1-22中任一項(xiàng)所述的方法制備的釉質(zhì)產(chǎn)品;和
(b)使所述釉質(zhì)產(chǎn)品經(jīng)受印模或成型為計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)包所示的釉質(zhì)產(chǎn)品。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法,其中所述外科修復(fù)物是牙科修復(fù)物。
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法,其中所述牙科修復(fù)物是牙冠,鑲蓋,相應(yīng)的支架,鑲嵌物,覆蓋物,全口拖牙,部分拖牙或橋。
26.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法,其中所述外科修復(fù)物是矯形假體。
27.一種包含產(chǎn)生釉質(zhì)素的細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),其中所述系統(tǒng)被配置為允許所述細(xì)胞形成釉質(zhì)類(lèi)器官的三維系統(tǒng)。
28.如權(quán)利要求27所述的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),其中產(chǎn)生釉質(zhì)素的細(xì)胞天然地產(chǎn)生釉質(zhì)素。
29.權(quán)利要求28的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),其中產(chǎn)生釉質(zhì)素的細(xì)胞是成釉質(zhì)細(xì)胞。
30.權(quán)利要求27的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),其中產(chǎn)生釉質(zhì)素的細(xì)胞是被遺傳工程化而表達(dá)釉質(zhì)素的。