本發(fā)明屬于生物醫(yī)用材料技術領域，具體涉及一種長效緩釋口腔潰瘍貼膜及其制備方法。

背景技術：

口腔潰瘍等疾病具有多發(fā)、反復、周期性等特點，對人類健康和日常生活造成了嚴重影響。目前臨床上多使用口服給藥或噴劑給藥方式進行治療?？诜o藥方式容易引起副作用和耐藥性，且由于給藥次數(shù)較多，給患者生活帶來不便；噴劑給藥方式雖然可以直接將藥物作用到患處，但會因人的口腔唾液的分泌而造成藥物的快速、大量流失，藥物停留時間短、生物利用度不高。

近年來，載藥口腔貼膜作為一類治療口腔潰瘍的新劑型得到了人們的廣泛關注。相比其它劑型，口腔潰瘍貼膜具有如下優(yōu)點：(1)產(chǎn)品使用方便、安全；(2)直接作用患處，局部藥物濃度高，有利于潰瘍患處的康復；(3)對消化道無刺激、副作用小。李志平等公開了一種以海藻酸鈉為主要基材、負載有鹽酸達克羅寧、鹽酸金霉素、甲硝唑和地塞米松磷酸鈉等多種藥物的復合口腔潰瘍貼膜(申請?zhí)枺篊N201410698378)。朱昌玲等公開了一種可用于治療口腔潰瘍的植物多糖類貼膜及其制備方法(申請?zhí)枺篊N201310439781)，他們以白芨多糖為主要基材，負載維生素，并輔以甘油、吐溫等輔料。魏黎忠等以殼聚糖、聚乙烯醇和羧甲基淀粉鈉的復合物為基材，得到了一類具有良好吸脹性和透氣性的口腔潰瘍貼膜(申請?zhí)枺篊N200810233762)。但是，目前的口腔潰瘍貼膜多是速溶貼膜，持續(xù)治療效果較差，仍需頻繁給藥；且貼膜的力學強度不夠理想，與口腔的粘附性不佳，吸水溶脹后易脫落。

因此，如何制備一種可牢固粘附于口腔潰瘍患處、使所含治療藥物能長時間持續(xù)作用的口腔潰瘍貼膜便成為當前口腔潰瘍治療領域亟待解決的重要課題。迄今為止，利用改性纖維素和聚己內(nèi)酯制備復合膜及其用于口腔潰瘍治療應用尚未見報道。

技術實現(xiàn)要素：

為了解決以上現(xiàn)有技術的缺點和不足之處，本發(fā)明的首要目的在于提供一種長效緩釋口腔潰瘍貼膜。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述長效緩釋口腔潰瘍貼膜的制備方法。

本發(fā)明目的通過以下技術方案實現(xiàn)：

一種長效緩釋口腔潰瘍貼膜，所述口腔潰瘍貼膜由三層復合膜構成：最內(nèi)層為改性纖維素膜粘附層，中間層為改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物膜含藥中間層，最外層為聚己內(nèi)酯膜疏水層。

優(yōu)選地，上述長效緩釋口腔潰瘍貼膜中，所含改性纖維素、改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物和聚己內(nèi)酯三者的質量比為1:(1～5):(0.2～1)。

優(yōu)選地，上述長效緩釋口腔潰瘍貼膜的總厚度為0.5～2mm。

上述長效緩釋口腔潰瘍貼膜的制備方法，包括以下制備步驟：

(1)改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的合成：

稱取干燥的改性纖維素溶于無水二甲基亞砜(DMSO)中，再加入辛酸亞錫以及干燥的己內(nèi)酯單體，惰性氣氛保護下升溫至100～120℃反應12～24小時，反應產(chǎn)物經(jīng)正己烷沉淀，真空干燥，得到改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物；

(2)口腔潰瘍貼膜的制備：

a、將改性纖維素溶解于乙醇溶液中，在平板支撐物上制膜，50～70℃干燥后得到粘附層；

b、將步驟(1)中所得改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物與口腔潰瘍治療藥物溶解于二氯甲烷/乙醇混合溶液中，在步驟a所得粘附層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50～70℃干燥得到含藥中間層；

c、將聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷，在步驟b所得含藥中間層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50～70℃干燥，得到具有三層復合結構的口腔潰瘍貼膜。

優(yōu)選地，步驟(1)中所述改性纖維素為羥乙基纖維素、羥丙甲基纖維素或羥丙基纖維素；其干燥方法按照以下操作步驟：將改性纖維素置于真空干燥箱中于50～80℃條件下干燥12～48小時，得到干燥的改性纖維素。

步驟(1)中所述無水DMSO的制備方法按照以下操作步驟：將氫化鈣加入到二甲基亞砜中攪拌6～24小時，然后過濾得到無水二甲基亞砜，所述氫化鈣的加入量以每500mL二甲基亞砜中加入1～2克氫化鈣計。

步驟(1)中所述干燥的己內(nèi)酯單體的制備方法按照以下操作步驟：將氫化鈣加入到己內(nèi)酯單體中攪拌6～24小時，然后過濾得到干燥的己內(nèi)酯單體，所述氫化鈣的加入量以每500克己內(nèi)酯中加入1～2克計。

優(yōu)選地，步驟(1)中所述干燥的改性纖維素、干燥的己內(nèi)酯單體和辛酸亞錫的質量比為1:(0.2～0.6):(0.01～0.03)；所述無水二甲基亞砜的用量以每100毫升中加入0.5～1.0克干燥的改性纖維素計；沉淀所用的正己烷與二甲基亞楓的體積比為5～10:1。

步驟(1)中所述真空干燥優(yōu)選在40～60℃條件下真空干燥12～24小時。

步驟a中所述的乙醇溶液優(yōu)選質量分數(shù)為95％的乙醇溶液，所述改性纖維素溶解于乙醇溶液中的質量分數(shù)為1％～5％。

步驟a中所述平板支撐物優(yōu)選涂布有液體石蠟的水平潔凈的玻璃板。

優(yōu)選地，步驟b中所述二氯甲烷/乙醇混合溶液中二氯甲烷與乙醇的體積比為1:(2～5)；所述改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物溶解的質量分數(shù)為1％～5％；所述改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯與藥物的質量比為(20～100):1。

優(yōu)選地，所述的口腔潰瘍治療藥物為醋酸地塞米松、呋喃唑酮、多抗甲素、硫酸慶大霉素、多西環(huán)素、甲硝唑和維生素C中的一種或兩種以上的混合。

優(yōu)選地，步驟c中所述聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷的質量分數(shù)為5％～20％；所述聚己內(nèi)酯的重均分子量為10000～80000。

本發(fā)明的原理為：

針對口腔潰瘍患處直接、持續(xù)給藥是當前治療口腔潰瘍疾病的有效方法，該方法實施的關鍵是得到一類安全、粘附性強、防水的口腔貼膜，使之可長時間作用于口腔潰瘍患處釋放藥物。本發(fā)明利用生物安全、可降解的改性纖維素和聚己內(nèi)酯為基材，設計了一種三層復合膜的材料：最內(nèi)層改性纖維素具有良好的生物粘附性，可長時間粘附于患處；最外層為疏水的聚己內(nèi)酯，使貼膜具有良好的防水性，不易因溶脹造成脫落，可延長貼膜與口腔的作用時間；中間層為聚己內(nèi)酯修飾的改性纖維素，中間層可同時負載親水或疏水藥物，并起到粘連親水內(nèi)層和疏水外層的作用。

本發(fā)明的制備方法及所得到的產(chǎn)物具有如下優(yōu)點及有益效果：

(1)本發(fā)明所使用的改性纖維素和聚己內(nèi)酯具有生物安全性好、可降解、成本低等優(yōu)點，原料易得，是用作生物醫(yī)用的理想材料。

(2)三層復合膜的設計使得材料內(nèi)層具有粘附性、外層防水，可保證口腔貼膜長時間作用于患處。

(3)中間層為改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯，該共聚物具有兩親性，適用于絕大多數(shù)親水或疏水藥物的負載，并能很好地粘合親水內(nèi)層和疏水外層。

(4)本發(fā)明貼膜取用方便，易于患者自行操作，用完后直接手取丟棄。

(5)本發(fā)明貼膜載藥范圍廣，可選用絕大多數(shù)親水藥物或疏水藥物，可同時負載多種藥物。

(6)本發(fā)明的口腔潰瘍貼膜具有藥物緩釋效果，可長時間持續(xù)作用于患處，且副作用小、生物利用度高。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實施例2所得羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的核磁氫譜圖。

圖2為實施例2所得口腔潰瘍貼膜的釋藥曲線圖。

圖3為實施例2所得口腔潰瘍貼膜與細胞共培養(yǎng)的細胞毒性測試結果圖。

具體實施方式

下面結合實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。

以下實施例所用原料的通過如下方法預處理：

無水DMSO的制備方法：將1克氫化鈣加入到500mL二甲基亞砜中攪拌12小時，然后用砂芯漏斗過濾得到無水二甲基亞砜。

干燥己內(nèi)酯單體的制備方法：將1克氫化鈣加入到500mL己內(nèi)酯單體中攪拌12小時，然后用砂芯漏斗過濾得到干燥的己內(nèi)酯單體。

改性纖維素的干燥方法：將改性纖維素置于真空干燥箱中于70℃條件下干燥16小時。

實施例1

(1)羥乙基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的合成：

稱取5克干燥后的羥乙基纖維素溶于30mL無水二甲基亞砜中，升溫至40～60℃直到羥乙基纖維素溶解；然后加入0.1克辛酸亞錫以及2克干燥后的己內(nèi)酯單體，升溫至80℃，向反應瓶填充氮氣15分鐘后升溫至120℃，氮氣氣氛下反應12小時；反應結束后產(chǎn)物在150mL的正己烷中沉淀2次，然后在60℃條件下真空干燥24小時，得到羥乙基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物。

(2)口腔潰瘍貼膜的制備：

a、將羥乙基纖維素溶解于95％的乙醇溶液，質量分數(shù)為4％，在涂布有少許液體石蠟的水平潔凈的玻璃板上制膜，于50℃干燥后得到粘附層；

b、將羥乙基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物與硫酸慶大霉素按質量比50:1的比例溶解于二氯甲烷/乙醇的混合溶液(二氯甲烷與乙醇的體積比為1:5)，共聚物的質量分數(shù)為5％；將該溶液在步驟a所得粘附層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50℃干燥得含藥中間層；

c、將分子量45000的聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷，質量分數(shù)為15％；在步驟b所得含藥中間層上鋪成均勻液層，50℃干燥，得到具有三層復合結構的口腔潰瘍貼膜。所述改性纖維素、改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯三者的質量比為1:1:0.2。

實施例2

(1)羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的合成：

稱取5克干燥后的羥丙甲基纖維素溶于30mL無水二甲基亞砜中，升溫至40～60℃直到羥丙甲基纖維素溶解；然后加入0.1克辛酸亞錫以及2克干燥后的己內(nèi)酯單體，升溫至80℃，向反應瓶填充氮氣15分鐘后升溫至120℃，氮氣氣氛下反應12小時；反應結束后產(chǎn)物在150mL的正己烷中沉淀2次，然后在60℃條件下真空干燥24小時，得到羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物。

稱取3mg所得共聚物，溶解于0.5mL氘代二甲基亞楓中。所得樣品進行氫譜核磁表征，結果如圖1。圖1中化學位移在2.50和3.31ppm處對應的峰屬于二甲基亞楓和水的特征吸收峰；化學位移在1.28、2.30和4.35ppm處的峰歸屬于聚己內(nèi)酯鏈段的質子峰；化學位移在1.15和3.50ppm處的峰歸屬于羥丙甲基纖維素中羥丙甲基的質子峰。圖1的結果證實，羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯被成功合成。

(2)口腔潰瘍貼膜的制備：

a、將羥丙甲基纖維素溶解于95％的乙醇溶液，質量分數(shù)為5％，在涂布有少許液體石蠟的水平潔凈的玻璃板上制膜，于50℃干燥后得到粘附層；

b、將羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物與硫酸慶大霉素按質量比50:1的比例溶解于二氯甲烷/乙醇的混合溶液(二氯甲烷與乙醇的體積比為1:3)，共聚物的質量分數(shù)為5％；將該溶液在步驟a所得粘附層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50℃干燥得含藥中間層；

c、將分子量80000的聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷，質量分數(shù)為8％；在步驟b所得含藥中間層上鋪成均勻液層，50℃干燥，得到具有三層復合結構的口腔潰瘍貼膜。所述改性纖維素、改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯三者的質量比為1:5:0.5。

實施例3

(1)羥丙基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的合成：

稱取5克干燥后的羥丙基纖維素溶于30mL無水二甲基亞砜中，升溫至40～60℃直到羥丙基纖維素溶解；然后加入0.1克辛酸亞錫以及2克干燥后的己內(nèi)酯單體，升溫至80℃，向反應瓶填充氮氣15分鐘后升溫至120℃，氮氣氣氛下反應12小時；反應結束后產(chǎn)物在150mL的正己烷中沉淀2次，然后在60℃條件下真空干燥24小時，得到羥丙基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物。

(2)口腔潰瘍貼膜的制備：

a、將羥丙基纖維素溶解于95％的乙醇溶液，質量分數(shù)為5％，在涂布有少許液體石蠟的水平潔凈的玻璃板上制膜，于50℃干燥后得到粘附層；

b、將羥丙基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物與維生素C按質量比50:1的比例溶解于二氯甲烷/乙醇的混合溶液(二氯甲烷與乙醇的體積比為1:3)，共聚物的質量分數(shù)為5％；將該溶液在步驟a所得粘附層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50℃干燥得含藥中間層；

c、將分子量10000的聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷，質量分數(shù)為20％；在步驟b所得含藥中間層上鋪成均勻液層，50℃干燥，得到具有三層復合結構的口腔潰瘍貼膜。所述改性纖維素、改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯三者的質量比為1:5:1。

實施例4

(1)羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的合成同實施例2；

(2)口腔潰瘍貼膜的制備：

a、將羥丙甲基纖維素溶解于95％的乙醇溶液，質量分數(shù)為5％，在涂布有少許液體石蠟的水平潔凈的玻璃板上制膜，于50℃干燥后得到粘附層；

b、將羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物與多抗甲素、硫酸慶大霉素按質量比80:1:1的比例溶解于二氯甲烷/乙醇的混合溶液(二氯甲烷與乙醇的體積比為1:3)，共聚物的質量分數(shù)為3％；將該溶液在步驟a所得粘附層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50℃干燥得含藥中間層；

c、將分子量80000的聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷，質量分數(shù)為5％；在步驟b所得含藥中間層上鋪成均勻液層，60℃干燥，得到具有三層復合結構的口腔潰瘍貼膜。所述改性纖維素、改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯三者的質量比為1:5:0.2。

實施例5

(1)羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物的合成同實施例2；

(2)口腔潰瘍貼膜的制備：

a、將羥丙甲基纖維素溶解于95％的乙醇溶液，質量分數(shù)為5％，在涂布有少許液體石蠟的水平潔凈的玻璃板上制膜，于50℃干燥后得到粘附層；

b、將羥丙甲基纖維素接枝聚己內(nèi)酯共聚物與維生素C、多西環(huán)素按質量比100:5:1的比例溶解于二氯甲烷/乙醇的混合溶液(二氯甲烷與乙醇的體積比為1:3)，共聚物的質量分數(shù)為3％；將該溶液在步驟a所得粘附層上繼續(xù)鋪成均勻液層，50℃干燥得含藥中間層；

c、將分子量80000的聚己內(nèi)酯溶解于二氯甲烷，質量分數(shù)為5％；在步驟b所得含藥中間層上鋪成均勻液層，60℃干燥，得到具有三層復合結構的口腔潰瘍貼膜。所述改性纖維素、改性纖維素接枝聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯三者的質量比為1:1:1。

本發(fā)明所得口腔潰瘍貼膜的緩釋性能測試及細胞毒性測試：

將1平方厘米面積的實施例2所得口腔潰瘍貼膜在10mL磷酸鹽緩沖溶液(pH＝7.4)環(huán)境下進行體外釋放實驗。硫酸慶大霉素的釋放量用高效液相色譜對其進行定量分析，釋放結果如圖2所示。由圖2結果可以看出，該口腔潰瘍貼膜在實驗條件下可長時間持續(xù)釋放硫酸慶大霉素，其釋放時間可持續(xù)7天以上，且沒有明顯的爆釋現(xiàn)象，滿足長時間持續(xù)給藥的需求。

將0.25平方厘米的實施例2所得口腔潰瘍貼膜置于6孔板的細胞培養(yǎng)板中，與小鼠成纖維細胞共培養(yǎng)，分別在不同的時間點測定細胞的活性；以正常培養(yǎng)的細胞為對照組，結果如圖3所示。由圖3可以看出，該口腔潰瘍貼膜在實驗條件下顯示出良好的生物相容性，與小鼠成纖維細胞共培養(yǎng)7天均未顯示出明顯的細胞毒性，滿足使用需要。

上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其它的任何未背離本發(fā)明的精神實質與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。