防治棘胸蛙爛皮病的全滅活疫苗及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明提供一種具有防治棘胸蛙爛皮病的全滅活疫苗制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 棘胸蛙養(yǎng)殖被認為是目前最具潛力的養(yǎng)殖項目之一，在中國長江以南地區(qū)發(fā)展較 快。然而，病害嚴重影響了其進一步規(guī)?；l(fā)展。目前，應用免疫學技術防治水生動物細菌 性疾病，已越來越多的受到各國水生動物疾病防治工作者的重視。相對于抗生素，研發(fā)"高 效、實用、低價、安全"的疫苗防治技術逐漸成為國際水產疫病防控的主要問題。
[0003] 疫苗的免疫方式在很大程度上決定了疫苗的使用與推廣。周永燦（2001)等的研 宄表明，肌肉注射法免疫效果最好，其最高凝集抗體效價達426. 7 ;與肌肉注射法相比，口 服免疫法和噴霧免疫法的最高凝集抗體效價出現(xiàn)較晚。周末等人（2009)對林蛙紅腿病進 行免疫實驗，結果顯示肌肉注射法和口服免疫法均能取得較好的免疫效果，浸泡免疫法次 之。
[0004] 疫苗的保存期也是疫苗大規(guī)模使用的制約因素。胡成鈺等（2001)在牛蛙紅腿病 菌苗免疫試驗中對疫苗的保存期進行的研宄，結果顯示菌苗在4-10°C環(huán)境下，保存120? 180d，攻毒試驗蛙仍有70 %左右的存活率。
[0005] 爛皮病對棘胸蛙養(yǎng)殖業(yè)危害巨大，但到目前為止，對于該病的致病病原，尚沒有統(tǒng) 一的定論，目前發(fā)現(xiàn)的導致棘胸娃爛皮病的致病菌主要有葡萄球菌（Staphylococcus)、奇 異變形桿菌（Proteusmirabilis)等。
[0006] 上文中提及的參考文獻具體如下：
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【發(fā)明內容】

[0018] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種使用安全且能有效防治棘胸蛙爛皮病的全 滅活疫苗及其制備方法。
[0019] 為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供一種防治棘胸蛙爛皮病的全滅活疫苗的制備 方法，包括以下步驟：
[0020] 1)、以瓊氏不動桿菌、魯氏不動桿菌、約氏不動桿菌這三種菌作為致病菌，對每種 致病菌分別進行如下處理：
[0021] 取〇D_值為0. 2的致病菌的菌懸液，加入體積濃度為40%的甲醛溶液從而配制成 甲醛的體積濃度為0. 2%的疫苗；將所述疫苗于37°C恒溫箱中滅活處理96h;從而分別得3 種致病菌的甲醛滅活苗；
[0022] 2)、將3種致病