化合物調(diào)節(jié)tak1活性的方法及該化合物用于治療手足口病的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種化合物調(diào)節(jié)TAKl活性的方法及該化合物用于制備治療由腸道病 毒71型或柯薩奇病毒A16引起的手足口病的藥物組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 手足口病（Hand，foot and mouth disease，HFMD)是由腸道病毒[以柯薩奇A組 16型（CVA16)、腸道病毒71型（EV71)多見]引起的急性傳染病，通常表現(xiàn)為以皰疹性咽 峽炎、咽喉痛和發(fā)熱為特征的溫和的和自限性疾病（Huang，C. C.，C. C. Liu，Y. C. Chang，C. Y. Chen, S. Τ. Wang, and T. F. Yeh. 1999. Neurologic complications in children with enterovirus 71infection，N Engl J Med. 341:936-942) D 少數(shù) HFMD 病例可出現(xiàn)無菌性腦 膜炎、腦干腦炎和急性馳緩性麻痹（一種小兒麻痹癥似綜合癥）。
[0003] 由例如CVA16和EV71的腸道病毒引起的HFMD帶來成數(shù)百萬的感染者以及數(shù) 百的死亡，而且現(xiàn)在被認為是重要的傳染疾?。?〇1〇111〇11，1'.，？.1^￥也￥3；^6,0.?6代『&，]\1 J.Cardosaj P. McMinnj and Μ. H. 0oi.2010.Virlogyj epidemiology, pathogenesis, and control of enterovirus 71. The Lancet Infectious Diseases. 10:778-790) 〇 目前沒有 有效的疫苗或特定的抗病毒治療，因此研發(fā)出有效針對手足口病的預(yù)防或治療手段是十分 迫切的。
[0004] 高水平的IL-6被報道是HFMD的發(fā)病原。雖然經(jīng)病原體刺激后誘發(fā)的更多 量的促炎細胞因子應(yīng)該活化急性階段的反應(yīng)和用于病原體清除的T細胞和B細胞的 刺 激(Kanda, T. , J. E. McManus, R. Nagaij S. Imaij T. Suzuki, D. Yang, B. M. McManus, and I. Kobayashi. 1996. Modification of viral myocarditis in mice by interleukin-6. Circ. Res. 78 : 848-856 ；Kopf, Μ. , H. Baumann, G. Freer, M. Freudenbergj M. Lamersj T. Kishimotoj R. Zinkernagelj H. Bluethmannj and G. Kohler. 1994. Impaired immune and acute-phase responses in interleukin-6-deficient mice. Nature. 368:339-342)，收集 的證據(jù)卻表明，過高水平的促炎細胞因子會壓倒免疫防衛(wèi)，而引起嚴重的免疫炎癥疾病。
[0005] -些臨床研究表明，大量促炎細胞因子的誘發(fā)是EV71病毒感染引起嚴重的發(fā)病 原因。實際上，從EV71感染病患體內(nèi)采集的血清和腦脊髓液（cerebral spinal fluid，CSF) 中含有高水平的促炎細胞因子，如IL-6,持續(xù)被報道，例如：
[0006] I. Lin，Τ. Y.，L. Y. Chang，Y. C. Huang，K. H. Hsu，C. H. Chiu，and K. D. Yang. 2002. Different proinflammatory reactions in fatal and non-fatal enterovirus 71infections:implications for early recognition and therapy.Acta Paediatr. 91:632-635 ；
[0007] 2. Linj T. Y. , S. H. Hsiaj Y. C. Huang, C. T. Wuj and L. Y. Chang. 2003. Proinflammatory cytokine reactions in enterovirus 71infections of the central nervous system. Clin Infect Dis.36:269-274 ；
[0008] 3. Wang, S. Μ. , Η. Υ. Leij Μ. C. Huang, L. Υ. Suj Η. C. Linj C. Κ. Yuj J. L. Wang, and C. C. Liu. 2006. Modulation of cytokine production by intravenous immunoglobulin in patients with enterovirus 71-associated brainstem encephalitis. J.Clin. Virol. 37:47-52 ；
[0009] 4. Wang, S. M. , H. Y. Leij L. Y. Suj J. M. Wuj C. K. Yuj J. R. Wang, and C. C. Liu. 2007. Cerebrospinal fluid and cytokines in enterovirus 7lbrain stem encephalitis and echovirus meningitis infections of varying severity.Clin. Microbiol. Infect. 13:677-682 ；
[0010] 5. Wengj K. F. , L. L. Chen, P. N. Huang, and S. R. Shih. 2010. Neural pathogenesis of enterovirus 71infection. Microbes Infect. 12:a505-510 ；
[0011] 6. Wang, S. M. , H. Y. Leij and Liuj C. C. 2012. Cytokine immunopathogenesis of enterovirus 71brain stem encephalitis. Clin Dev Immunol. 2012:876241〇
[0012] 在小鼠中，持續(xù)高水平的IL-6被報道是在嬰兒小鼠模型中EV71的發(fā)病原因 (Khong, W. X. , D. G. Fooj S. L Trastij E. L. Tan, and S. Alonso. 2011. Sustained high levels of interleukin_6contribute to the pathogenesis of enterovirus 71in a neonate mouse model. J Virol. 85:3067-3076)。
[0013] 然而，IL-6的產(chǎn)生是如何影響HFMD的進展仍然未知。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014] 本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)中的上述問題提出的。
[0015] 本發(fā)明提供了一種鑒定化合物是否調(diào)節(jié)哺乳動物TAKl活性的方法，其中TAKl活 性標記著對產(chǎn)生由腸道病毒71型或柯薩奇病毒A16引起的手足口病的病原體誘發(fā)的促炎 細胞因子起關(guān)鍵作用。
[0016] 本發(fā)明還提供了一種用于治療由腸道病毒71型或柯薩奇病毒A16引起的手足口 病的藥物組合物，所述組合物包括具有磷脂酶Cf3 2活性的蛋白、多肽或它們的活化化合 物，和/或其生理學(xué)上可耐受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體。
[0017] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0018] 本發(fā)明的第一個方面是提供一種鑒定化合物是否調(diào)節(jié)哺乳動物TAKl活性的方 法，包括如下步驟：
[0019] 步驟1、將哺乳動物細胞化合物孵育；
[0020] 步驟2、將步驟1的細胞用病毒及病毒抗原成分誘導(dǎo)劑刺激；
[0021] 步驟3、測定來自步驟2的細胞的TAKl活性；
[0022] 其中，所述TAKl活性標記著對產(chǎn)生由腸道病毒71型或柯薩奇病毒A16引起的手 足口病的病原體誘發(fā)的促炎細胞因子起關(guān)鍵作用。
[0023] 優(yōu)選地，所述步驟1的哺乳動物細胞是嚙齒動物的細胞，所述嚙齒動物更優(yōu)選為 鼠，更優(yōu)選為小鼠。
[0024] 優(yōu)選地，所述步驟1的哺乳動物細胞是人類的細胞。
[0025] 其中，所述細胞選自胰細胞、肌細胞、肝細胞、腎細胞、腦細胞、脂肪細胞、巨噬細胞 的任意一種或多種，更優(yōu)選為巨噬細胞。
[0026] 哺乳動物的細胞來自小鼠的細胞培養(yǎng)物。
[0027] 優(yōu)選地，所述步驟2的病毒及病毒抗原成分選自聚肌苷酸胞苷酸poly (I :C)、 H5N1、NDV、CAV16中的任意一種或多種，更優(yōu)選為聚肌苷酸胞苷酸poly (I: C)。
[0028] 其中，所述化合物活化細胞中的磷脂酶Cβ 2。
[0029] 本發(fā)明的第二個方面是提供一種用于治療由腸道病毒71型或柯薩奇病毒Α16引 起的手足口病的藥物組合物，所述組合物包括具有磷脂酶Cf3 2活性的蛋白、多肽或它們的 活化化合物，和/或其生理學(xué)上可耐受的鹽，以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
[0030] 所述化合物優(yōu)選為2, 4, 6-三甲基-N-(meta-3-三氟甲基-苯基）-苯磺酰胺 (2, 4, 6-trimethyl-N-(meta-3-trifluoromethyl-phenyl)-benzenesulfonamide, m-3M3F BS) 〇
[0031] 本發(fā)明的第三個方面是提供化合物m-3M3FBS和/或其生理學(xué)上可耐受的鹽用于 制備藥物組合物的