總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及凍干針劑，尤其涉及總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑，本發(fā)明還涉及所述總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑的制備方法，屬于固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑及其制備領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]總蟾毒內(nèi)酯是系有傳統(tǒng)藥材蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍或黑框蟾蜍陰干全皮為主要原料提取的脂溶性化合物，具體成分包括脂蟾毒配基、華蟾酥毒基、蟾毒靈、蟾毒它靈、日蟾毒它靈-3-半辛二酸脂、蟾毒靈3- 丁二酰精氨酸脂、華蟾毒精3- 丁二酰精氨酸脂等。蟾毒內(nèi)酯類化合物的抗腫瘤作用自上個(gè)世紀(jì)90年代以來已在國(guó)內(nèi)外被廣泛研宄和報(bào)道，研宄表明其具有明顯的抗腫瘤活性，且能將腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化為正常細(xì)胞(誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化)、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞新生血管形成、降低腫瘤轉(zhuǎn)移等作用。但目前現(xiàn)有的劑型為普通片劑、口服液、膠囊劑及注射液等存在服藥次數(shù)多，服藥量大，口服有腥臭味，注射導(dǎo)致血管刺痛，引發(fā)靜脈炎等弊端。
[0003]納米制劑是由粒徑在1-1OOOnm范圍內(nèi)的納米粒作為載藥體，進(jìn)一步加工做成片劑、注射劑、乳劑等制劑類型，具體包括脂質(zhì)體、聚合物納米粒、膠束、固體脂質(zhì)納米粒、納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體、囊泡、納米乳等納米粒。由于納米粒具有獨(dú)特的粒徑大小、表面電荷性質(zhì)以及可被修飾等特點(diǎn)，可在抗腫瘤方面發(fā)揮獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。納米粒在人或動(dòng)物體內(nèi)具有EPR效應(yīng)，使載藥后的納米?？筛患谀[瘤組織，提高抗腫瘤藥物靶向性，減少抗腫瘤藥物對(duì)正常組織細(xì)胞的殺傷，降低全身毒性。固體脂質(zhì)納米粒作為新型納米載體，可包載脂溶性藥物，繼而增加藥物水中溶解度；降低藥物在血液循環(huán)時(shí)刺激性，并由EPR效應(yīng)富集在腫瘤組織；體內(nèi)緩慢釋放，提高藥物體內(nèi)生物利用度；和傳統(tǒng)納米載體如脂質(zhì)體、聚合物納米粒等相比，具有高生物相容性、高穩(wěn)定性的特點(diǎn)，是總蟾毒內(nèi)酯的理想載體。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒；
[0005]本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供一種總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑；
[0006]本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供一種總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒及總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑的制備方法。
[0007]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:
[0008]本發(fā)明首先公開了一種總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒，包括以下各組分:總蟾毒內(nèi)酯、固態(tài)脂質(zhì)、脂溶性乳化劑、水溶性乳化劑和注射用水。
[0009]各組分的重量百分含量為:總蟾毒內(nèi)酯0.001?0.03%，固態(tài)脂質(zhì)0.07?0.45%,脂溶性乳化劑0.15?0.9%，水溶性乳化劑0.15?0.9%，余量為注射用水；
[0010]優(yōu)選的，各組分的重量百分含量為:總蟾毒內(nèi)酯0.01%，固態(tài)脂質(zhì)0.2%，脂溶性乳化劑0.5%，水溶性乳化劑0.5%，余量為注射用水。
[0011]其中，所述固態(tài)脂質(zhì)選自單硬脂酸甘油酯，硬脂酸，三硬脂酸甘油酯，三月桂酸甘油酯，三肉豆蔻酸甘油酯，葵酸甘油酯，鯨蠟醇棕櫚酸酯，蜂蠟，二月桂酸甘油酯，十六醇、膽甾醇油酸酯中的任意一種或任意兩種按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為，單硬脂酸甘油酯與硬脂酸按照任意比例組成的混合物；最優(yōu)選為，單硬脂酸甘油酯與硬脂酸按照質(zhì)量比例15:1組成的混合物；
[0012]所述脂溶性乳化劑選自卵磷脂，卵黃磷脂或兩者按照任意比例組成的組合物，優(yōu)選為卵磷脂；
[0013]所述水溶性乳化劑選自脂肪酸山梨坦類，聚山梨酯類，聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物類，聚氧乙烯脂肪酸酯類，聚氧乙烯脂肪醇醚類，蔗糖脂肪酸類中的任意一種或者兩種以上按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為聚山梨酯類；最優(yōu)選為吐溫-80。
[0014]本發(fā)明還公開了一種所述總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒的制備方法，包括以下步驟:
[0015](I)按照所述配比稱取各組分，將總蟾毒內(nèi)酯、脂溶性乳化劑、固態(tài)脂質(zhì)加入有機(jī)溶劑中，加熱，構(gòu)成油相；
[0016](2)將水溶性乳化劑加入注射用水中，并加熱到同油相等溫，形成水相；
[0017](3)在攪拌條件下將油相滴加入水相中，并持續(xù)攪拌至有機(jī)溶劑揮發(fā)完全，形成初乳液；
[0018](4)將初乳液倒入冰水中，并持續(xù)攪拌，即得。
[0019]其中，步驟(I)所述有機(jī)溶劑選自甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮或無水乙醇中任意一種或兩種以上按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為無水乙醇與丙酮按照任意比例組成的混合物；最優(yōu)選為，無水乙醇與丙酮按照體積比1:1組成的混合物；
[0020]步驟⑴按照mg/mL計(jì)，總蟾毒內(nèi)酯、脂溶性乳化劑和固態(tài)脂質(zhì)的總質(zhì)量:有機(jī)溶劑=60-120:1，優(yōu)選為114:1 ;所述加熱為加熱至70°C ；
[0021]步驟⑵按照mg/mL計(jì)，水溶性乳化劑:注射用水=10-25:1，優(yōu)選的，水溶性乳化劑:注射用水=20:1 ；
[0022]步驟(4)按照mg/mL計(jì)，初乳液:冰水=210-630:I，優(yōu)選為420:1 ;其中，所述冰水由注射用水制得，是冰與水的混合物，溫度為0°c ;所述冰水包含在制備總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒所用的水的總質(zhì)量之中；
[0023]步驟(3)或步驟⑷所述攪拌為700rpm ;步驟(4)所述攪拌的時(shí)間為2h。
[0024]本發(fā)明所制備的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒粒徑為190-250nm，多分散系數(shù)為0.18-0.3，包封率為 30% -80% ο
[0025]本發(fā)明中所述脂溶性乳化劑、固態(tài)脂質(zhì)、水溶性乳化劑、有機(jī)溶劑的不同種類及其不同用量對(duì)總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑、多分散系數(shù)(roi)、包封率起重要影響作用。其中，總蟾毒內(nèi)酯與單硬脂酸甘油酯，硬脂酸，卵磷脂、無水乙醇與丙酮、吐溫-80制備的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒質(zhì)量評(píng)價(jià)較好；優(yōu)選的，2mg總蟾毒內(nèi)酯，30mg單硬脂酸甘油醋，2mg硬脂酸，80mg卵磷脂、無水乙醇與丙酮(體積比1:1)、80mg吐溫-80所制得的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑為208.4nm，PDI為0.19，包封率為79.8%，質(zhì)量評(píng)價(jià)最好。因?yàn)?，總蟾毒?nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒的粒徑越小、分散系數(shù)越小，其制得的凍干粉針劑藥物的靶向性越好；單位投藥量包封率越大，其可作用于腫瘤細(xì)胞的藥量越大，效果越好。
[0026]改變脂溶性乳化劑、固態(tài)脂質(zhì)、水溶性乳化劑的種類或用量，或者改變有機(jī)溶劑種類，所制備的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒的粒徑增大、分散系數(shù)增大，包封率顯著降低。例如，在其他條件均一致的情況下，僅改變固態(tài)脂質(zhì)的種類，固態(tài)脂質(zhì)分別為單硬脂酸甘油酯和硬脂酸按質(zhì)量比15:1組成、三肉豆蔻酸甘油酯、蜂蠟、二月桂酸甘油酯或十六醇，所制得的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒的質(zhì)量評(píng)價(jià)存在明顯差異，平均粒徑為208.4-224.6nm，多分散系數(shù)(BH)為0.19-0.28，包封率為59.8-79.8%;其中，固態(tài)脂質(zhì)為單硬脂酸甘油酯和硬脂酸按質(zhì)量比15:1組成所所制得的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑為208.4nm，PDI為0.19，包封率為79.8%，質(zhì)量評(píng)價(jià)最好。
[0027]本發(fā)明進(jìn)一步公開了一種總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑，包括以下各組分:總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒和凍干保護(hù)劑。
[0028]按照mg/ml計(jì)，凍干保護(hù)劑:總蟾毒內(nèi)醋固體脂質(zhì)納米粒=1-10:100 ;優(yōu)選為5:100。
[0029]其中，所述凍干保護(hù)劑選自葡萄糖、蔗糖、海藻糖、甘露醇、氯化鈉、乳糖、山梨醇、木糖醇、葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、右旋糖酐、甘油或甘氨酸的任意一種或兩種以上按照任意比例組成的混合物。
[0030]本發(fā)明還公開了一種所述總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑的制備方法，包括以下步驟:按照所述配比向總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒中加入凍干保護(hù)劑，冷凍干燥，即得。
[0031]本發(fā)明所制得總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑用注射用水溶解，以納米粒大小、粒徑分布和包封率做質(zhì)量評(píng)價(jià)，復(fù)溶后所測(cè)得的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒粒徑為190-250nm，多分散系數(shù)為0.18-0.3，包封率為30% -80% ;最優(yōu)的，復(fù)溶后所測(cè)得的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑為208.4nm，多分散系數(shù)為0.19，包封率為79.8%。
[0032]本發(fā)明技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果:
[0033]本發(fā)明總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒凍干針劑復(fù)溶后所測(cè)得的總蟾毒內(nèi)酯固體脂質(zhì)納米粒粒徑為190-250nm，多分散系數(shù)為0.18-0.3，包封率為30% -80% ;能夠有效提高總蟾毒內(nèi)酯的腫瘤細(xì)胞靶向性，降低毒副作用，同時(shí)具有緩釋、延長(zhǎng)生物半衰期的作用。
【具體實(shí)施方式】
[0034]下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而更為清楚。但是應(yīng)理解所述實(shí)施例僅是范例性的，不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改或替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0035]實(shí)施例1總蟾毒內(nèi)酯固體脂