一種應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病多模態(tài)診療的靶向試劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病多模態(tài)診療的靶向試劑，屬于靶向試劑制備的技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]炎癥是十分常見的基本病理過(guò)程，體表的外傷感染和各器官的大部分常見病和多發(fā)病(如肺炎、肝炎、腎炎等)都屬于炎癥相關(guān)的疾病。炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對(duì)損傷因子的防御性反應(yīng)。
[0003]炎癥根據(jù)持續(xù)時(shí)間不同分為急性和慢性炎癥。其中急性炎癥以發(fā)紅、腫脹、疼痛等為主要征候，即以血管系統(tǒng)的反應(yīng)為主所構(gòu)成的炎癥。局部血管擴(kuò)張，血液緩慢，血漿及中性白細(xì)胞等血液成分滲出到組織內(nèi)，滲出主要是以靜脈為中心，其共同的特征是可使血管透性亢進(jìn)、平滑肌收縮、血管擴(kuò)張，促進(jìn)白細(xì)胞游走。
[0004]炎癥病變主要在局部，但局部病變與整體又互為影響。在比較嚴(yán)重的炎癥性疾病，特別是病原微生物在體內(nèi)蔓延擴(kuò)散時(shí)，常出現(xiàn)明顯的全身性反應(yīng)。主要表現(xiàn)為:(一)發(fā)熱；(二)白細(xì)胞增多；(三)單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞增生；(四)實(shí)質(zhì)器官的病變。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]發(fā)明目的:為了提高對(duì)于炎癥相關(guān)疾病的診療效果，本發(fā)明提供一種應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病多模態(tài)診療的靶向試劑，所述試劑生物相容性好，無(wú)毒副作用，可以通過(guò)在炎癥病變部位的特異性富集，實(shí)現(xiàn)對(duì)炎癥相關(guān)疾病的多模態(tài)診療，具有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
[0006]技術(shù)方案:本發(fā)明的一種應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病多模態(tài)診療的靶向試劑由生物相容性優(yōu)良的卟啉衍生物與金屬離子或其納米簇組成，并且通過(guò)原位生物作用定點(diǎn)合成，其中，卟啉衍生物與金屬離子混合，或是卟啉衍生物與納米簇混合按重量比1:1至1:5之間的比例組成。
[0007]所述金屬離子是鋅離子、鎂離子或金離子中的一種或任意兩種的混合物。
[0008]所述納米簇是鋅納米簇、鎂納米簇或金納米簇中的一種或者任意兩種的混合物。
[0009]所述卟啉衍生物為磺酸基卟啉衍生物。
[0010]本發(fā)明的應(yīng)用方法如下:該靶向試劑應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病診療時(shí)，將卟啉衍生物與金屬離子或其納米簇試劑通過(guò)尾靜脈或者局部注射以及微注射進(jìn)入到創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的模型動(dòng)物體內(nèi)，Π卜啉衍生物與金屬離子或其納米簇靶向試劑可以快速的在創(chuàng)傷部位富集，使用特定波長(zhǎng)的光源照射病灶部位，可以實(shí)現(xiàn)光動(dòng)力治療和光熱治療相結(jié)合的多模態(tài)治療；利用小動(dòng)物活體熒光成像儀和宏觀變倍熒光顯微鏡成像儀可以實(shí)時(shí)對(duì)模型動(dòng)物成像，根據(jù)靶向試劑的熒光變化示蹤治療進(jìn)程。
[0011]其具體步驟是:
[0012]1.構(gòu)建創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的模型動(dòng)物，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對(duì)照模型組；同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組和空白組對(duì)照組；
[0013]2.將無(wú)菌的靶向試劑，通過(guò)尾靜脈注射或局部注射，以及微注射進(jìn)入正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M體內(nèi)；對(duì)照模型組和空白組不做處理。
[0014]3.在72小時(shí)內(nèi)，通過(guò)非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)高靈敏快速熒光示蹤和監(jiān)測(cè)(包括CT、超聲、熒光以及MRI)，觀察靶向試劑在模型動(dòng)物體內(nèi)循環(huán)并富集在炎癥病灶部位；
[0015]所述炎癥相關(guān)疾病是指:腎炎、肺部疾病、眼部疾病、肝部疾病、胃病、十二指腸潰瘍、糖尿病、外傷感染及傳染性疾病。
[0016]有益效果:本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)方法相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果:
[0017]本研宄采用的試劑由生物相容性優(yōu)良的卟啉衍生物與鎂離子等金屬離子或其原位生物合成的納米簇組成，通過(guò)與靶向生物活性分子定點(diǎn)作用實(shí)現(xiàn)相關(guān)病灶部位的精準(zhǔn)靶向標(biāo)記與成像檢測(cè)，可進(jìn)行活體非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的高靈敏示蹤和監(jiān)測(cè)(包括CT、超聲、熒光以及MRI)，且無(wú)生物毒副作用，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便易行，有效避免了傳統(tǒng)納米材料合成過(guò)程中引入的化學(xué)試劑以及納米材料穩(wěn)定劑對(duì)有機(jī)體造成的生物毒性，同時(shí)避免了傳統(tǒng)納米材料易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕獲后被清除從而不能到達(dá)病灶組織的缺點(diǎn)，以便實(shí)現(xiàn)活體靶向成像分析。同時(shí)，使用特定波長(zhǎng)的光源照射病灶部位，可以實(shí)現(xiàn)光動(dòng)力治療和光熱治療相結(jié)合的多模態(tài)治療，具有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0018]本發(fā)明公開了一種應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病多模態(tài)診療的靶向試劑，該試劑由生物相容性優(yōu)良的卟啉衍生物與金屬離子或其納米簇組成，通過(guò)原位生物作用定點(diǎn)合成對(duì)相關(guān)病灶部位精確靶向標(biāo)記的試劑，可以實(shí)現(xiàn)非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)高靈敏檢測(cè)與示蹤(包括CT、超聲、熒光以及MRI)，無(wú)毒副作用，簡(jiǎn)便易行；同時(shí)結(jié)合特定波長(zhǎng)的光照，利用卟啉衍生物顯著的光動(dòng)力學(xué)效應(yīng)和納米簇的光熱效應(yīng)實(shí)現(xiàn)對(duì)于炎癥病灶部位的抑制與治療。
[0019]本發(fā)明提供了應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病多模態(tài)診療靶向試劑，由生物相容性優(yōu)良的卟啉衍生物與鎂離子等金屬離子或其納米簇組成。其中，撲啉衍生物與金屬離子混合，或是卟啉衍生物與納米簇混合按重量比1:1至1:5之間的比例組成
[0020]其中，上述的金屬離子是鋅離子、鎂離子或金離子中的一種或任意兩種的混合物。
[0021]其中，上述的納米簇是鋅納米簇、鎂納米簇或金納米簇中的一種或者任意兩種的混合物。
[0022]其中，上述的卟啉衍生物為磺酸基卟啉衍生物。
[0023]具體措施如下:
[0024]首先制備生物相容性優(yōu)良的卟啉衍生物與金屬離子或其納米簇試劑，將相關(guān)的卟啉衍生物與金屬離子或其納米簇試劑分別溶于超純水，均配制成一定的濃度。
[0025]將上述一定濃度的靶向試劑應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病的多模態(tài)診療，包括以下步驟:
[0026]該靶向試劑應(yīng)用于炎癥相關(guān)疾病診療時(shí)，將卟啉衍生物和鎂離子等金屬離子或其納米簇試劑通過(guò)尾靜脈或者局部注射以及微注射進(jìn)入到創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的模型動(dòng)物體內(nèi)，相關(guān)卟啉衍生物與金屬離子或其納米簇靶向試劑可以快速在創(chuàng)傷部位富集，使用特定波長(zhǎng)的光源照射病灶部位，可實(shí)現(xiàn)光動(dòng)力治療和光熱治療相結(jié)合的多模態(tài)治療，同時(shí)利用小動(dòng)物活體熒光成像儀和宏觀變倍熒光顯微鏡成像儀可以實(shí)時(shí)對(duì)模型動(dòng)物成像，根據(jù)靶向試劑的熒光變化示蹤治療進(jìn)程；
[0027]上述方法的步驟具體為:
[0028]1.構(gòu)建創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的模型動(dòng)物，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對(duì)照模型組；同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組和空白組對(duì)照組；
[0029]2.將無(wú)菌的靶向試劑，通過(guò)尾靜脈注射或局部注射，以及微注射進(jìn)入正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M體內(nèi)；對(duì)照模型組和空白組不做處理。
[0030]3.注射12小時(shí)后，利用特定波長(zhǎng)(包括488nm和535nm)的激光光源對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M動(dòng)物病灶部位和正常對(duì)照組的相同部位施以光照30min，對(duì)照模型組和空白對(duì)照組不做處理；相同步驟每天重復(fù)，連續(xù)10天。
[0031]4.在72小時(shí)內(nèi)，通過(guò)非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)高靈敏快速示蹤和監(jiān)測(cè)(包括CT、超聲、熒光以及MRI)，觀察靶向試劑在模型動(dòng)物體內(nèi)循環(huán)并富集在炎癥病灶部位；
[0032]5.解剖模型組、對(duì)照組和空白組動(dòng)物，取全血和血清，測(cè)試血常規(guī)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳糖脫氫酶、肌酸激酶和尿素氮的指標(biāo)；取器官肝，腎和創(chuàng)傷周圍組織，制備病理切片，分析靶向試劑的多模態(tài)治療對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。
[0033]以下的說(shuō)明本質(zhì)上僅僅是示例性的而并不是為了限制本公開、應(yīng)用或用途。
[0034]實(shí)施例1
[0035]靶向試劑應(yīng)用于果蠅創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥模型的多模態(tài)檢測(cè):
[0036]1.在果蠅的下腹部構(gòu)造創(chuàng)口，誘發(fā)炎癥模型，是為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M；同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組和空白組。
[0037]2.將0.05ml無(wú)菌的濃度為lOmmol/L的卟啉衍生物和金屬離子或其納米簇試劑溶液，通過(guò)微注射儀注射進(jìn)入實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和正常對(duì)照組體內(nèi)；空白組不做處理。
[0038]3.在I?6小時(shí)期間，通過(guò)非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)高靈敏快速熒光示蹤和檢測(cè)，觀察靶向試劑在果蠅體內(nèi)運(yùn)輸并富集在炎癥病灶部位；
[0039]利用宏觀變倍熒光顯微鏡成像，分別選取I小時(shí)、2小時(shí)、6小時(shí)等不同時(shí)間點(diǎn)，將果蠅用C02麻醉，置于顯微鏡操作平臺(tái)上，選擇460nm等波長(zhǎng)激發(fā)采集熒光圖像。
[0040]4.步驟2所述金屬離子是鋅離子、鎂離子和金離子的一種或混合物；所述納米簇是金