一種含有阿達木單抗的藥物組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有阿達木單抗的藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 類風濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎為特征的慢性 全身性自身免疫性疾病。滑膜炎持久反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨和骨的破壞，關(guān)節(jié)功能障 礙，甚至殘廢。血管炎病變累及全身各個器官，故本病又稱為類風濕病。約80%患者的發(fā) 病年齡在20~45歲，以青壯年為多，男女之比為1 : 2~4。全世界光關(guān)節(jié)炎患者有3. 55 億人。在亞洲地區(qū)，每6個人中就有1人在一生的某個階段患上關(guān)節(jié)炎這種世界頭號致殘 性疾病。目前，估計中國大陸的關(guān)節(jié)炎病人有1億以上，而且人數(shù)還在不斷增加。而目前我 國患類風濕關(guān)節(jié)炎的人數(shù)達600萬左右。
[0003] 腫瘤壞死因子-a (tumor necrosis factor, TNF-α )是一種能夠直接殺傷腫瘤 細胞而對正常細胞無明顯毒性的細胞因子。它主要由滑膜巨噬細胞產(chǎn)生，能刺激滑膜成纖 維細胞增生，分泌白細胞介素6 (IL-6)，粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF)、趨化因 子以及基質(zhì)金屬蛋白酶和前列腺素等效應(yīng)分子，在RA的發(fā)病中起著極其重要的作用。目前 TNF-α拮抗劑是最有效的治療RA及其他類似疾病的藥物，主要有依那西普（etanerc印t)、 英夫利西單抗（infliximab)和阿達木單抗（adalimumab)等。
[0004] 阿達木單抗是通過特異性結(jié)合人體內(nèi)的TNF-α，阻止TNF-α與其細胞表面受 體結(jié)合，從而阻斷了 TNF-α的生物學活性，最終減輕炎癥反應(yīng)并減少破骨細胞激活，達到 控制并緩解癥狀體征的目的。它的上市不僅為類風濕性關(guān)節(jié)炎患者提供了一種新的治療 策略，而且因其對經(jīng)其它抗類風濕藥物治療無效或不能耐受這些藥物治療的頑固性活動 性類風濕性關(guān)節(jié)炎及強直性脊柱炎亦有效，并具有顯效快、療效高、安全性和耐受性好等 特點，臨床價值甚大，市場前景頗佳。目前市場上的阿達木單抗產(chǎn)品商品為美國雅培公司 (Abbott)生產(chǎn)的Humira?,于2002年獲得批準上市，其經(jīng)FDA批準的適應(yīng)癥有：中-重度類 風濕性關(guān)節(jié)炎、中-重幼年型類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、強制性脊柱炎和中-重度克羅恩氏 病等。
[0005] 阿達木單抗屬于全人源單抗，"全人源"就是指與人體自身產(chǎn)生的抗體免疫球蛋白 IgG沒有什么差別。一般來說，人體會隨機產(chǎn)生各種抗體，用來防御各種外來的病原。然而， 既然是隨機產(chǎn)生的抗體，也會把自身抗原當作攻擊對象的抗體。往往這種會攻擊自身的抗 體在具有成熟的功能之前就被我們的免疫系統(tǒng)消除掉，因此，簡單地說，人體內(nèi)一般產(chǎn)生不 了抗人抗原的抗體。所以，早期的治療用抗體往往是在鼠體內(nèi)產(chǎn)生的，因蛋白來源的屬種差 異，在人體內(nèi)存在的時間縮短，療效也受到影響，且有一定過敏風險。現(xiàn)在雖然可以通過與 人的抗體部分組合而減少鼠來源成分的比例，但是鼠源蛋白的影響并不能完全消除。而美 國雅培公司通過噬菌體表達技術(shù)，將來自健康的人類捐獻者的B細胞中隨機生成的抗體前 體進行篩選，找出了一種由人類B細胞生成的人類抗體，但是能特異性地結(jié)合TNF- α，也就 是Humira?。換句話說，Humira?是繞過人體自身審查消除機制而搜尋到的全人源TNF-α 抗體，不僅能夠有效拮抗人類的TNF-α，而且極大地減少了免疫排斥反應(yīng)。
[0006] 目前已上市的阿達木單抗制劑Humira?為水針制劑，含有阿達木單抗50mg/mL，氯 化鈉6. 16mg/mL，枸櫞酸鈉0· 35mg/mL，枸櫞酸I. 3mg/mL，二水磷酸二氫鈉0· 86mg/mL，二水 磷酸氫二鈉 I. 53mg/mL，甘露醇12mg/mL，聚山梨醇酯801mg/mL，溶液ρΗ5· 2。其中，阿達木 單抗為有效成分，氯化鈉為等滲劑，枸櫞酸鹽和磷酸鹽為緩沖劑，甘露醇為結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，聚 山梨醇酯80為表面活性劑。
[0007] 我們發(fā)現(xiàn)已上市的Humira?制劑較不穩(wěn)定，在長期和加速試驗條件下有顯 著的降解，特別是產(chǎn)生較多的雜質(zhì)如多聚體（aggregates)及不溶性微粒（insoluble particles)。而多聚體及不溶性微粒被認為是生物制藥安全性非常重要的質(zhì)量參數(shù) (critical quality attribute, CQA)，直接影響到阿達木單抗的用藥安全，特別是它們的 免疫原性，這對于長期用藥的產(chǎn)品如阿達木單抗尤為重要。
[0008] CN201080030083. 9公開了一種不含氯化鈉而含有高濃度（> 20mg/ml)多元醇如 甘露醇的阿達木單抗藥物制劑，該制劑相比已上市的Humira?制劑在高溫條件下具有更高 的穩(wěn)定性。
[0009] 和大多數(shù)蛋白分子一樣，阿達木單抗具有不穩(wěn)定性，會經(jīng)歷多種化學和物理降解。 和傳統(tǒng)合成的小分子藥物相比，生物分子具有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，如一級、二級、三級等高級結(jié)構(gòu)。 而蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，特別是高級結(jié)構(gòu)非常脆弱，容易發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，如變性（denaturation), 聚集（aggregation)和沉淀（precipitation)。保持抗體的高級結(jié)構(gòu)是發(fā)揮它們生物學活 性的最基本要求。這些降解的產(chǎn)物會對生物制藥的安全性產(chǎn)生很大的影響。特別是一些蛋 白聚集物會激發(fā)人體的免疫反應(yīng)，輕者會降低生物藥物的療效，重者甚至會造成病人的死 亡?？贵w藥物不僅僅需要在生產(chǎn)的時候能得到高純度的產(chǎn)品，還要在運輸、儲存和使用過程 中保持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。
[0010] 本發(fā)明人經(jīng)過大量的實驗研究，驚喜的發(fā)現(xiàn)，在含有阿達木單抗的藥物組合物中， 使用蔗糖或海藻糖作為阿達木單抗的結(jié)構(gòu)保護劑，可大大提高藥物組合物的穩(wěn)定性，具有 非常廣闊的市場應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明提供了一種含有阿達木單抗的藥物組合物，該組合物在較長的時間內(nèi)仍能 維持藥物組合物的物理和化學穩(wěn)定性，并且具有非常適合于皮下施用的粘度。
[0012] 具體的，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其含有阿達木單抗及結(jié)構(gòu)保護劑。其中， 所述組合物中阿達木單抗的濃度為l-200mg/ml，優(yōu)選10-100mg/ml，更優(yōu)選50mg/ml。所 述結(jié)構(gòu)保護劑選自鹿糖或海藻糖，優(yōu)選鹿糖，所述結(jié)構(gòu)保護劑的濃度為l -200mg/ml，優(yōu)選 10-100mg/ml。本發(fā)明人驚訝的發(fā)現(xiàn)，選用蔗糖或海藻糖作為結(jié)構(gòu)保護劑，所得組合物的物 理和化學穩(wěn)定性相比現(xiàn)有技術(shù)得到了很大程度的提高。
[0013] 進一步的，本發(fā)明所述的藥物組合物不含氯化鈉。本發(fā)明人驚訝的發(fā)現(xiàn)，選用蔗糖 或海藻糖作為結(jié)構(gòu)保護劑后，不含氯化鈉的阿達木單抗制劑的穩(wěn)定性顯著高于含有氯化鈉 的阿達木單抗制劑的穩(wěn)定性。
[0014] 本發(fā)明的藥物組合物進一步含有表面活性劑，包括但不限于聚山梨醇酯類，如聚 山梨醇酯20、聚山梨醇酯21、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯61、聚山梨醇酯 65、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯81、聚山梨醇酯85或其混合物，泊洛沙姆，triton，十二烷基 硫酸鈉，月桂硫酸鈉，辛基糖苷鈉，月桂基-磺基甜菜堿，聚乙二醇，聚丙二醇，或它們的混 合物，優(yōu)選聚山梨醇酯80。所述表面活性劑的濃度為0. 01-10mg/ml，優(yōu)選0. l-2mg/ml，更優(yōu) 選 lmg/ml〇
[0015] 本發(fā)明的藥物組合物進一步含有緩沖液，包括但不限于甘氨酸、乙酸/乙酸鹽、 琥珀酸/琥珀酸鹽、檸檬酸/檸檬酸鹽、抗壞血酸/抗壞血酸鹽、酒石酸/酒石酸鹽、順丁烯 二酸/順丁烯二酸鹽、乳酸/乳酸鹽、碳酸/碳酸氫鹽、苯甲酸/苯甲酸鹽、組氨酸、磷酸/ 磷酸鹽或tris/tris鹽酸鹽，優(yōu)選檸檬酸/檸檬酸鹽和碳酸/碳酸氫鹽的組合。其中加入 的緩沖液使得本發(fā)明組合物的pH值為4. 0-