速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10% ；
[0028](6)此后每隔I小時，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10%，直到人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力達(dá)到移植部位動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平為止；(7)對人造血管內(nèi)腔的血管內(nèi)皮細(xì)胞加載定常流，保持培養(yǎng)基的流速從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力保持在移植部位動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平24-72小時，使血管內(nèi)皮細(xì)胞有充分的時間適應(yīng)生理水平的脈動剪切力；
[0029]使血管內(nèi)皮細(xì)胞有充分的時間適應(yīng)生理水平的流動剪切力；
[0030](8)結(jié)束剪切力誘導(dǎo)，取下人造血管，用于后續(xù)生理指標(biāo)檢測及血管移植。
[0031]根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供了一種體外構(gòu)建具有抗流動剪切和抗血小板凝集功能的血管內(nèi)皮層的方法，其特征在于:
[0032](I)在人造血管內(nèi)腔表面接種血管內(nèi)皮細(xì)胞；
[0033](2)將接種了血管內(nèi)皮細(xì)胞的人造血管培養(yǎng)24-48小時，從而使內(nèi)皮細(xì)胞長滿人造血管內(nèi)腔表面；
[0034](3)將長滿內(nèi)皮細(xì)胞的人造血管兩端連接到充滿了培養(yǎng)液的剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的管路中，從而使人造血管和剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的管路構(gòu)成一個封閉的回路；
[0035](4)啟動剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的液體驅(qū)動泵，設(shè)定初始流速，從而使流經(jīng)人造血管內(nèi)腔的培養(yǎng)液對血管內(nèi)皮細(xì)胞的初始剪切力為0-2dyne/Cm2;
[0036](5)在剪切力施加I小時后，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10% ；
[0037](6)此后每隔I小時，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10%，直到人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力達(dá)到6-lOdyne/cm2;
[0038](7)此后每隔2小時，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一時段流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一時段提高10%，直到人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力達(dá)到移植動脈部位的動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平為止；
[0039](8)保持培養(yǎng)基的流速從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力保持在移植動脈部位動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力水平，啟動脈動電機(jī)，對人造血管內(nèi)腔的血管內(nèi)皮細(xì)胞加載移植動脈部位的動脈脈搏波24-72小時，使血管內(nèi)皮細(xì)胞有充分的時間適應(yīng)生理水平的脈動剪切力；
[0040](9)結(jié)束剪切力誘導(dǎo)，取下人造血管，用于后續(xù)生理指標(biāo)檢測及血管移植。
【附圖說明】
[0041]圖1示意顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施例的剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)。
[0042]圖2示意顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施例的體外構(gòu)建具有抗流動剪切和抗血小板凝集功能的血管內(nèi)皮層的方法的流程圖。
[0043]圖3示意顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施例的剪切力誘導(dǎo)和脈動波形誘導(dǎo)方法的流程圖。
[0044]圖4a_4b顯示了利用根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施例的為股胭動脈遠(yuǎn)端的血管移植準(zhǔn)備內(nèi)皮化的人造血管植入物過程中使用的剪切力增加程序和使用的股胭動脈脈搏波波形。
[0045]圖5顯示了利用根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施例的為股胭動脈遠(yuǎn)端的血管移植準(zhǔn)備內(nèi)皮化的人造血管植入物過程中使用的剪切力增加程序。
【具體實(shí)施方式】
[0046]如圖1所示，根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施例的剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)包括一個儲液瓶101和一個液體驅(qū)動泵102，一個脈動發(fā)生器103，人造血管104，一個控制器105，和連接管路107。其中連接管路107將儲液瓶101和液體驅(qū)動泵102，脈動發(fā)生器103，人造血管104連接成為一個封閉的回路。
[0047]根據(jù)一個具體實(shí)施例，液體驅(qū)動泵102動驅(qū)培養(yǎng)基在剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的封閉回路中循環(huán)流動，從而對人造血管104內(nèi)腔表面的血管內(nèi)皮細(xì)胞106產(chǎn)生流動剪切力；控制器105控制液體驅(qū)動泵102的啟動、關(guān)閉和流速調(diào)節(jié)。
[0048]根據(jù)一個具體實(shí)施例，脈動發(fā)生器103加載不同形式的脈搏波到人造血管的內(nèi)皮細(xì)胞上?？刂破?05控制脈動發(fā)生器103的啟動、關(guān)閉和脈動波形的調(diào)節(jié)。
[0049]如圖2所示，根據(jù)一個具體實(shí)施例，體外構(gòu)建具有抗流動剪切和抗血小板凝集功能的血管內(nèi)皮層的方法在于:
[0050](I)在人造血管內(nèi)腔表面接種血管內(nèi)皮細(xì)胞；
[0051](2)將接種了血管內(nèi)皮細(xì)胞的人造血管培養(yǎng)24-48小時，從而使內(nèi)皮細(xì)胞長滿人造血管內(nèi)腔表面；
[0052](3)將長滿內(nèi)皮細(xì)胞的人造血管兩端連接到充滿了培養(yǎng)液的剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的管路中，從而使人造血管和剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的管路構(gòu)成一個封閉的回路；
[0053](4)啟動剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的液體驅(qū)動泵，設(shè)定初始流速，從而使流經(jīng)人造血管內(nèi)腔的培養(yǎng)液對血管內(nèi)皮細(xì)胞的初始剪切力為0-2dyne/Cm2;
[0054](5)在剪切力施加I小時后，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10% ；
[0055](6)此后每隔I小時，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10%，直到人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力達(dá)到移植部位動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平為止；
[0056](7)保持培養(yǎng)基的流速從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力保持在移植部位動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平48小時，使血管內(nèi)皮細(xì)胞有充分的時間適應(yīng)生理水平的脈動剪切力；
[0057](8)結(jié)束剪切力誘導(dǎo)，取下人造血管，用于后續(xù)生理指標(biāo)檢測及血管移植。
[0058]如圖3所示，根據(jù)一個具體實(shí)施例，體外構(gòu)建具有抗流動剪切和抗血小板凝集功能的血管內(nèi)皮層的方法在于:
[0059](I)在人造血管內(nèi)腔表面接種血管內(nèi)皮細(xì)胞；
[0060](2)將接種了血管內(nèi)皮細(xì)胞的人造血管培養(yǎng)24-48小時，從而使內(nèi)皮細(xì)胞長滿人造血管內(nèi)腔表面；
[0061](3)將長滿內(nèi)皮細(xì)胞的人造血管兩端連接到充滿了培養(yǎng)液的剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的管路中，從而使人造血管和剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的管路構(gòu)成一個封閉的回路；
[0062](4)啟動剪切力誘導(dǎo)系統(tǒng)的液體驅(qū)動泵，設(shè)定初始流速，從而使流經(jīng)人造血管內(nèi)腔的培養(yǎng)液對血管內(nèi)皮細(xì)胞的初始剪切力為0-2dyne/Cm2;
[0063](5)在剪切力施加I小時后，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10% ；
[0064](6)此后每隔I小時，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一小時流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一小時提高10%，直到人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力達(dá)到6-lOdyne/cm2;
[0065](7)此后每隔2小時，調(diào)節(jié)液體驅(qū)動泵使培養(yǎng)液的流速比前一時段流速提高10%，從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力比前一時段提高10%，直到人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力達(dá)到移植動脈部位的動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力或剪切力峰值水平為止；
[0066](8)保持培養(yǎng)基的流速從而使人造血管內(nèi)腔的內(nèi)皮細(xì)胞受到的剪切力保持在移植動脈部位動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所承受的平均剪切力水平，啟動脈動電機(jī)，對人造血管內(nèi)腔的血管內(nèi)皮細(xì)胞加載移植動脈部位的動脈脈搏波72小時，使血管內(nèi)皮細(xì)胞有充分的時間適應(yīng)生理水平的脈動剪切