取物。在本文，來自總狀土木 香的根或其它部分的提取物可優(yōu)選通過用包含在水中的50-99wt%的量的低級醇（優(yōu)選這 樣的低級醇的量為65-90wt % )的液體組合物提取所述植物物質(zhì)來獲得。在提取中，低級醇 優(yōu)選為具有1至6個碳原子的醇（即C1-C6醇，優(yōu)選鏈烷醇），最優(yōu)選乙醇。
[0027] 本發(fā)明進一步涉及包含總狀土木香提取物和茶氨酸的組合物的制備方法，該方法 包括獲得Pushkarmool的干地根，用包含在水中的50-99wt %的量的低級醇（優(yōu)選這樣的低 級醇為具有1-6個碳原子的鏈烷醇，優(yōu)選乙醇）的液體組合物提取所述干地根，干燥獲得的 提取物，將如此獲得的干燥提取物與茶氨酸混合，以使茶氨酸與總狀土木香提取物以重量 比1 : 0.1至1 : 50 (更優(yōu)選重量比1 : 0.5至1 : 20)存在。在這樣的方法中，為了良 好的提取，優(yōu)選該Pushkarmool的干地根的提取包括在5至40°C的溫度下將這樣的干地根 在包含低級醇的所述液體組合物中浸泡4至48小時，隨后加熱至高于40°C的溫度1至12 小時，然后除去不溶物。除去不溶物后獲得的液體包含活性物。這樣的液體可以原樣使用， 但通常被濃縮。這樣的濃縮可通過任何合適的手段來實現(xiàn)。為了獲得干燥成分，濃縮包括 干燥（即除去水、醇和任選的其它溶劑）。 實施例
[0028] 通過檢測評估茶氨酸和總狀土木香提取物（聯(lián)合和彼此分開）對人體內(nèi)脂聯(lián)素分 泌的潛在刺激作用。
[0029] 材料
[0030] 茶氨酸
[0031] 使用的茶氨酸購自 Taiyo green tea products (Japan)，商品名為 Suntheanine， 100 %純L-異構(gòu)體茶氨酸。
[0032] 總狀土太香提取物
[0033] 使用的總狀土木香提取物通過使干燥土木香粉末的商業(yè)樣品經(jīng)受下述處理獲得。 該樣品以商品名Pushkarmool購自來自Bangalore(Channabasappa)的當?shù)厣倘恕?br>[0034] -100g干燥的商品總狀土木香粉末在800ml的包含75%乙醇和25%水（wt% )的 混合物中浸泡（整夜，約16-18小時）；
[0035] -將這樣浸泡的粉末加熱至55-60°C 2個小時；
[0036] -冷卻至35_40°C，并濾除殘余物以獲得澄清濾液；
[0037] -使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮濾液至干燥粉末，將其儲存在4°C直到使用。
[0038] 脂聯(lián)素檢測方案
[0039]-將3T3L1 (小鼠前脂肪細胞）以3*103個細胞/孔的密度接種在96孔板上； [0040]-在5天的后融合（細胞形成均勻?qū)拥臈l件）后，細胞在分化培養(yǎng)基中分化（不成 熟的脂肪細胞轉(zhuǎn)化為成熟脂肪細胞的過程）10天；
[0041] -在第11天，用非細胞毒性濃度（以下稱為濃度）的總狀土木香提取物和茶氨酸 處理成熟的脂肪細胞；
[0042] -將細胞培養(yǎng)48小時并收集上清液和儲存。分析上清液以通過ELISA檢測脂聯(lián)素 水平；
[0043] -相對于未處理的對照（培養(yǎng)基對照）評價受試成分的功效；
[0044]-如果與單個組分的相加作用相比，總狀土木香提取物和茶氨酸的任一受試組合 在增加脂聯(lián)素水平方面的作用以統(tǒng)計學顯著的方式更大，則該特定組合被認為是協(xié)同的。
[0045] 總狀土太香的75%含水乙醇提取物中的總多酚宙量
[0046] 使用Folin-Ciocalteu試劑（ISO 14502-1 : 2005(E))來定量總狀土木香樣品中 的總多酚含量（TPP)。TPP以沒食子酸的當量表示（結(jié)果：1% )。這表明75%含水乙醇提 取物的多酚含量相當?shù)汀?br>[0047] 乙醇提取物的定量顯不在75 %含水乙醇提取物中存在的土木香內(nèi)醋 (alIantolactone)通過IR(紅外光譜法）檢測為2. 5-3%。（參考由Unilever R&D出版的 BL Phytochem. Anal. 2012, 23,171-176)。
[0048] 基于此，相信總狀土木香提取物富含可產(chǎn)生生物活性的其它中性化合物，如三萜 糖苷。
[0049] 總狀土太香提取物和荼氨酸各自的體外效果
[0050] 為了研宄總狀土木香和茶氨酸在增加從3T3L1分泌脂聯(lián)素方面的功效，將細胞用 不同濃度的總狀土木香（如本文材料部分所述獲得）和茶氨酸在細胞培養(yǎng)基中進行處理。 來自對照細胞的脂聯(lián)素的％作為一百，以此計算出處理值。從表1中的結(jié)果顯而易見的是， 總狀土木香（的醇/水提取物）和茶氨酸在體外研宄中以劑量響應方式增加脂聯(lián)素水平。
[0051] 表 1
[0052]
【主權(quán)項】
1. 包含茶氨酸和總狀土木香提取物的可食用組合物，所述可食用組合物不包含綠茶或 綠茶提取物。
2. 包含茶氨酸和總狀土木香提取物的可食用組合物，所述可食用組合物任選包含 EGCG，其中，如果混合物包含EGCG，那么茶氨酸/EGCG的重量比小于5,優(yōu)選小于3,更優(yōu)選小 于2。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其中所述總狀土木香提取物為總狀土木香根或其部 分的提取物。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求任一項的組合物，其中通過用包含在水中的50-99wt %的量的低 級醇的液體組合物提取所述植物物質(zhì)可獲得所述總狀土木香提取物。
5. 根據(jù)前述權(quán)利要求任一項的組合物，其中茶氨酸與總狀土木香提取物以茶氨酸：總 狀土木香提取物重量比1 : 0. 1至1 : 50存在。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求任一項的組合物，進一步包含紅茶和/或紅茶提取物。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的組合物，進一步包含占總組合物的40至99重量％的 量的易消化碳水化合物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的組合物，進一步包含占總組合物的30-95重量％的鹽。
9. 包含總狀土木香提取物和茶氨酸的組合物的制備方法，該方法包括獲得 Pushkarmool的干地根，用包含在水中的50-99wt %的量的低級醇的液體組合物提取所述 干地根，干燥獲得的提取物，將如此獲得的干燥提取物與茶氨酸混合，以使茶氨酸和總狀土 木香提取物以重量比1 : 〇. 1至1 : 50存在。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中所述低級醇為乙醇。
11. 根據(jù)權(quán)利要求9或10的方法，其中所述低級醇的濃度為65-90%。
12. 根據(jù)權(quán)利要求9至11中任一項的方法，其中所述Pushkarmool的干地根的提取包 括在5至40°C的溫度下將這種干地根在包含低級醇的所述液體組合物中浸泡4至48小時， 隨后加熱至高于40°C的溫度1至12小時，然后除去不溶物。
13. 根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中將除去不溶物后獲得的液體濃縮。
14. 包含茶氨酸和總狀土木香提取物的組合物在制備刺激胰島素敏感性和/或治療前 期糖尿病和/或治療2型糖尿病的食品或藥物中的用途，其中茶氨酸和總狀土木香提取物 以茶氨酸：總狀土木香提取物重量比1 : 〇. 1至1 : 50存在。
15. 包含茶氨酸和總狀土木香提取物的組合物，用于刺激胰島素敏感性的治療和/或 前期糖尿病的治療和/或2型糖尿病的治療，其中茶氨酸和總狀土木香提取物以茶氨酸：總 狀土木香提取物重量比1 : 0. 1至1 : 50存在。
【專利摘要】包含茶氨酸和總狀土木香提取物的可食用組合物，例如用于刺激人體內(nèi)脂聯(lián)素的釋放。
【IPC分類】A23L1-30, A61K36-28, A61P3-10, A61K36-82
【公開號】CN104837496
【申請?zhí)枴緾N201380061014
【發(fā)明人】G·巴納杰, V·卡達姆科德, R·卡拉蒂爾, S·馬朱德
【申請人】荷蘭聯(lián)合利華有限公司
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2013年10月29日
【公告號】CA2889620A1, EP2922558A1, WO2014079665A1